藥物的雜質(zhì)檢查總結(jié)

1、第三章藥物的雜質(zhì)檢查雜質(zhì)（forin、impurities）是指：有毒副作用的物質(zhì)本身無(wú)毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)本身無(wú)毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)藥物中雜質(zhì)的來(lái)源生產(chǎn)過(guò)程中引入（1）原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物（2）試劑、溶劑、催化劑類（3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來(lái)的雜質(zhì)貯藏過(guò)程中產(chǎn)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等易發(fā)生水解反應(yīng)的結(jié)構(gòu)：酯、內(nèi)酯、酰胺、鹵代烴、苷類等藥物中的雜質(zhì)按來(lái)源分為一般雜質(zhì)（generalimpurities）如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化

2、物、熾灼殘?jiān)?。一般雜質(zhì)的檢查方法收載在中國(guó)藥典的附錄中。特殊雜質(zhì)（special impurities）：指某一個(gè)或某一類藥物的生產(chǎn)或貯藏過(guò)程中引入的雜質(zhì)， 如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中的有關(guān)物質(zhì)。特殊雜質(zhì)檢查方 法收載在中國(guó)藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。雜質(zhì)限量：指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬(wàn)分之幾來(lái)表示藥物的雜質(zhì)檢查法1.對(duì)照法限量檢查法（Limit Test）特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量靈敏度法系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。特點(diǎn)：不需對(duì)照物質(zhì)比較法含量測(cè)定法：測(cè)定雜質(zhì)的絕對(duì)含量，如測(cè)定吸光度、pH值等。特點(diǎn)：

3、準(zhǔn)確測(cè)定雜質(zhì)的量，不需對(duì)照品雜質(zhì)限量的計(jì)算雜質(zhì)限量允許雜質(zhì)存在的最大量供試品量雜質(zhì)限量的計(jì)算雜質(zhì)限量允許雜質(zhì)存在的最大量供試品量雜質(zhì)限量=雜質(zhì)限量=標(biāo)準(zhǔn)溶液體積X標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度供試品量V - C L =x 100%S一般雜質(zhì)檢查規(guī)則藥品檢驗(yàn)操作標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性：如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過(guò)2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo) 氣管長(zhǎng)度及孔的大小要一致（2）對(duì)照品與供試品同步操作正確的比色、比濁方法檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份 氯化物檢查法（一）原理對(duì)照法藥物：Cl- + AgNO3 HN03 AgCl 白色渾濁對(duì)照：NaCl（C, V）+

4、AgNOhno3 AgCl 白色渾濁3檢查方法藥典附錄除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml （溶液如顯堿性，可滴 加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過(guò)；置50ml納氏比色管中，加 水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml 納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對(duì)照溶液。于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗 處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得測(cè)定條件標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液10口gCl-/ml，50ml溶液中含5

5、080瞄的Cl-所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于 標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液58ml。反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。加硝酸的目的：（1）加速AgCl渾濁的形成；（2）產(chǎn)生較好的乳濁；（3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。試劑：硝酸銀供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見(jiàn)光易分解。比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。平行操作原則干擾及排除若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。（1）內(nèi)消色法：倍量法如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原

6、褪色后再依法檢查。碘化物中氯化物的檢查不溶于水的有機(jī)藥物（1）加水振搖，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。（2）加熱，放冷，過(guò)濾，取濾液進(jìn)行檢查。（3）溶于有機(jī)溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。硫酸鹽檢查法一）原理對(duì)照法藥物：SO2-+ BaCl hci BaSO白色渾濁對(duì)照：K2SO4（c、V）+ BaCl2 hci BaSO4白色渾濁測(cè)定條件標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5mg所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn) K2SO4 溶液 1 5ml。反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜試劑：氯化鋇供試液和對(duì)照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，

7、使生成白色渾濁而不是白色沉淀比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。干擾及排除若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。鐵鹽檢查法硫氰酸鹽法原理對(duì)照法藥物:L+皿Fe3+ +6SCN- HC1 lFe(SCN) L 紅色Fe3+6對(duì)照：Fe3+(C、V)+ 6SCNHCt- Fe(SCN)6L-紅色檢查方法藥典附錄除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管 中，加稀鹽酸4ml與過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml， 再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液(取各 藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)

8、準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與 過(guò)硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml， 搖勻)比較，即得測(cè)定條件1)用FeNH4(SO4)2.12H2O (硫酸鐵銨)配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液(加入硫酸防止Fe3+的水解)， 標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10艇Fe3+/ml，50ml溶液中含1050瞄的Fe3+ 顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.05.0ml反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。試劑：硫氰酸銨。加過(guò)量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行檢查 Fe2+和 Fe3+鐵鹽檢查時(shí)，

9、加過(guò)硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時(shí)可防止光線使硫氰酸鐵還原或分 解褪色。加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。干擾及排除為了提高靈敏度或供試管與對(duì)照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層 比色。具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700800C熾灼破壞處理后再依法檢查。干擾離子的影響重金屬檢查法以鉛為代表第一法硫代乙酰胺法1. 原理 對(duì)照法CH CSNH + H O- pH3.5 r CH CONH + H S322322藥物：Pb2+ + H S pH3.5 PbS黃色棕黑色對(duì)照：PbNO3(c. V)+ H2S PH3.5 PbS黃色棕黑色適用

10、于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。測(cè)定條件用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液(加硝酸防止Pb2+水解)，標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10|ig Pb2+/m 1，適宜比色范圍為27ml溶液中含1020瞄的Pb2+。本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為33.5。顯色劑：從Ch.P (1990)開(kāi)始改用硫代乙酰胺做顯色劑干擾及排除1)供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。外消色法：在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無(wú)干擾的有色溶液。內(nèi)消色法改用第四法，微孔濾膜過(guò)濾法若供試品中有微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或 鹽酸羥胺(0.51.0g)還原Fe3+為Fe2+，

11、可消除干擾3)若供試品為鐵鹽，F(xiàn)e3+在鹽酸中生成HFeCl，用乙醚提取除去，剩余微量鐵在氨堿性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法檢查若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法檢查第二法熾灼殘?jiān)ㄟm用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。原理 對(duì)照法500600 C熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。操作方法樣品：S置坩蝸中- 500600C熾灼殘?jiān)?殘?jiān)麳NO 3、A HC1、A 氯化物h2o NR電0調(diào)節(jié)至pH7.0左右一PH3 5緩沖液2 0ml 依一法檢查對(duì)照：空坩蝸H2SO4、A HNO

12、3、A HC1、A nh3 h2o、a _H2O _標(biāo)準(zhǔn)Pb(no3)2溶液 一pH3 5緩沖液2 0ml 依一法檢查含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿(因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量 重金屬)第三法硫化鈉法適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。原理對(duì)照法藥物：Pb2 + + Na S NaOH PbS黃色棕黑色對(duì)照：PbNO3 J V)+ Na2S NaOH PbS黃色棕黑色測(cè)定條件NaOH堿性條件下顯色劑：硫化鈉砷鹽檢查法(一)古蔡法原理 對(duì)照法Zn + HCl H2 + AsO3- AsH3 個(gè)遇HgBr2試紙生成黃色棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)

13、砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較操作方法標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作測(cè)定條件標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，川gAs/ml。酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度；碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的 配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行；氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生；可抑制微量Sb的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100 jigSb存在不干擾。醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝

14、管高度6080mm。鋅粒應(yīng)無(wú)砷砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察干擾及排除供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，A，使氧化成硫酸鹽，以 除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中 砷鹽的檢查。具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。常用的有機(jī)破壞方法：堿破壞法：石灰法、無(wú)水碳酸鈉堿融法酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查本法適用于不含Sb或含Sb量小于100瞄的供試品。（二）Ag-DDC法檢查、含量測(cè)定1.原理：對(duì)照法Zn + HCl H2 + AsO3- AsH3 個(gè)AsH3 + 6Ag（DDC）As（DDC）

15、+ 6Ag（紅色）+ 3HDDC直接比色或于510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，進(jìn)行比較。用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP（29）用毗啶，Ch.P（2005）用 三乙胺。本法適用于含Sb量小于500口g的供試品。（三）白田道夫法 Ch.P（2005）含Sb藥物中砷鹽的檢查如葡萄糖酸銻鈉原理 對(duì)照法As3+、As5+ SnCl 一HCl 2As （棕褐色的膠態(tài)砷）熾灼殘?jiān)鼨z查法檢查不含金屬的有機(jī)藥物或揮發(fā)性無(wú)機(jī)藥物中混入的無(wú)機(jī)雜質(zhì)（金屬氧化物或無(wú)機(jī)鹽類）。原理樣品炭化后+ H2SO4濕潤(rùn)一700800C熾灼至恒重一熾灼殘?jiān)蛩峄曳郑┫蘖恳话銥?.1%0.2%操作方法樣品+熾灼至恒

16、重的坩蝸- 直火緩緩加熱至全部黑色、無(wú)煙霧，放冷H 2 S O4 0 51m l濕潤(rùn)，直火加熱 至H2SO4蒸氣除盡血榆浦溫灼燒 殘?jiān)ê阒兀胱茪堅(jiān)?=殘?jiān)佰釄逯?空及堝重X100% 供試品重注意事項(xiàng)供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘?jiān)蘖亢头Q量誤差決定。含氟的藥物對(duì)瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝若殘?jiān)枇糇髦亟饘贆z查，則500600C熾灼至恒重。加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機(jī)物炭化溶液顏色檢查法控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。第一法 目視比色法 即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長(zhǎng)范圍定性觀察觀察方法r平視顏色較深時(shí)從上向下顏色較淺時(shí)第二法 分光光度法 單一波長(zhǎng)定量第三法 色差計(jì)法 全波

17、長(zhǎng)范圍定量易炭化物檢查法檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機(jī)雜質(zhì)方法：H2SO4炭化后與對(duì)照液比較。對(duì)照液：“溶液顏色檢查”項(xiàng)下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；由比色用氯化鉆液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對(duì)照液；高錳酸鉀液比色：同置白色背景前，平視觀察比較。澄清度檢查法檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項(xiàng)檢查。1. 檢查方法 對(duì)照法供試品T供試品溶液比較規(guī)定級(jí)號(hào)的濁度標(biāo)準(zhǔn)液溶劑：水、酸、堿、有機(jī)溶劑有機(jī)酸的堿金屬鹽類藥物強(qiáng)調(diào)用“新沸過(guò)的冷水”干燥失重測(cè)定法干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測(cè)定方法：常壓

18、恒溫干燥法適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105 Co干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。熾灼殘?jiān)旱诙渭耙院蟾鞔畏Q重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼0.5h后進(jìn)行。干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。干燥劑：無(wú)水氯化鈣、硅膠、P2O5。減壓干燥法適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa (20mmHg)以下。殘留溶劑測(cè)定法殘留溶劑測(cè)定法藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過(guò)程中使用的， 但在工藝過(guò)程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。藥品中常見(jiàn)的殘留溶劑(第一、第二、第三類溶劑)的殘留限度應(yīng)符合規(guī)定。對(duì)其他溶劑， 應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn)，制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)或其他基本的質(zhì)量要求。檢查方法中國(guó)藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機(jī)溶劑1.色譜柱毛細(xì)管柱填充柱 直徑為0.250.18mm的二乙烯苯一乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適 宜的填料