肺炎支原體明膠顆粒凝集試驗及其臨床應用（課堂PPT）

1、肺炎支原體肺炎支原體明膠顆粒凝集試驗明膠顆粒凝集試驗及其臨床應用及其臨床應用成都市中西醫(yī)結合醫(yī)院 檢驗科 楊溪霖肺炎支原體（mycoplasmsa pneamoniae,MP）肺炎支原體肺炎肺炎支原體肺炎炎炎v支原體肺炎全年均可發(fā)病，以秋冬季多見。它由急性期患者的口、鼻分泌物經空氣飛沫傳播，引起呼呼吸吸道道感感染染。其發(fā)病主要與室內活動增加及密切接觸有關。支原體感染也可表現為咽炎、氣管支氣管炎臨床表現及實驗室檢查臨床表現及實驗室檢查潛伏期潛伏期1-3周周起病形式多樣，多數起病形式多樣，多數患者僅以低熱、疲乏患者僅以低熱、疲乏起病起病部分患者可以突發(fā)高部分患者可以突發(fā)高熱并伴有明顯的頭痛熱并伴有

2、明顯的頭痛、肌痛、惡心等全身、肌痛、惡心等全身中毒癥狀中毒癥狀呼吸道癥狀以呼吸道癥狀以干咳干咳最突出，常持續(xù)最突出，常持續(xù)4周周以上，多伴有顯著咽以上，多伴有顯著咽痛，偶有胸痛、痰中痛，偶有胸痛、痰中帶血；帶血；呼吸道以外的癥狀呼吸道以外的癥狀中，以耳痛、麻疹樣中，以耳痛、麻疹樣或猩紅熱樣皮疹較多或猩紅熱樣皮疹較多見見陽性體征以顯著的咽陽性體征以顯著的咽部充血和耳鼓膜充血較部充血和耳鼓膜充血較多見多見外周血白細胞總數和外周血白細胞總數和中性粒細胞比例多正常中性粒細胞比例多正常，有些患者可升高，有些患者可升高常用方法常用方法接接血血凝凝試試驗驗(PHA)v 4.明明膠膠顆顆粒粒凝凝集集試試驗驗(

3、PA)v 5.酶酶聯聯免免疫疫吸吸附附試試驗驗（ELISA）v 6.金金標標快快速速檢檢測測v 7.其其它它方方法：法：間間接接免免疫疫熒熒光光試試驗驗（IFA）、乳乳膠膠凝凝集集試試驗驗（LA）、免免疫疫印印跡跡測測定定（WB）、黏黏附附抑抑制制試試驗、驗、放放射射免免疫疫沉沉淀淀試試驗、驗、補補體體介介導導的的殺殺傷傷試試驗驗等等常用方法比較常用方法比較到到紅紅細細胞胞（禽禽類類或或羊）羊）上，上，與與血血清清中中的的抗抗Mp抗抗體體可可發(fā)發(fā)生生凝凝集集反反應。應。該該試試驗驗的的敏敏感感性性和和特特異異性性均均明明顯顯優(yōu)優(yōu)于于CFT。PHA不不能能區(qū)區(qū)分分抗抗體體的的類類型，型，因因此此

4、單單份份測測定定出出現現低低滴滴度度的的抗抗體體陽陽性性結結果果并并不不能能確確定定是是既既往往感感染染還還是是新新近近感感染。染。最最好好能能間間隔隔23周周再再采采取取第第2份份血血樣樣進進行行測測定，定，觀觀察察抗抗體體滴滴度度是是否否有有4倍倍以以上上的的增增加加（血血清清轉轉化）化）。單單次次測測定定出出現現高高滴滴度度抗抗體體陽陽性性（大大于于1:8）也也有有助助于于對對Mp新新近近感感染染的的判判斷斷v 明明膠膠顆顆粒粒凝凝集集試試驗驗(PA)：其其原原理理與與間間接接血血凝凝試試驗驗基基本本相相同，同，只只是是用用人人工工合合成成的的明明膠膠顆顆粒粒取取代代了了紅紅細細胞胞作作

5、為為凝凝集集試試驗驗的的載載體，體，從從而而使使結結果果判判定定更更清清晰，晰，靜靜置置穩(wěn)穩(wěn)定定性性更更好，好，非非特特異異性性反反應應大大大大減減少少，檢檢測測的的敏敏感感性性也也有有了了進進一一步步提提高高（對對IgM和和IgA更更敏敏感）感）被動凝集法被動凝集法被動凝集法被動凝集法結結果果判判讀讀容容易，易，過過夜夜后后判判讀讀不不發(fā)發(fā)生生顯顯著著變變化化2.消消除除紅紅細細胞胞載載體體引引起起的的非非特特異異性性凝凝集集3.特特異異性，性，靈靈敏敏度度較較高高4.血血清清MP抗抗體體滴滴度度與與MP感感染染者者病病情情的的嚴嚴重重程程度度呈呈正正相相關關被動凝集法被動凝集法SERODI

6、A- MYCOII操作步驟操作步驟被動凝集法被動凝集法緣緣均均勻勻且且平平滑滑的的圓圓形。形。2。粒粒子子形形成成小小環(huán)環(huán)狀，狀，呈呈現現出出外外周周邊邊緣緣均均勻勻且且平平滑滑的的圓圓形。形。3.粒粒子子環(huán)環(huán)明明顯顯變變大，大，其其外外周周邊邊緣緣不不均均勻勻且且雜雜亂亂地地凝凝集集在在周周圍。圍。4。產產生生均均一一的的凝凝集，集，凝凝集集粒粒子子在在底底部部整整體體上上呈呈膜膜狀狀延延展。展。MP感染的血清學及臨床診斷MP的免疫性的免疫性感感染染后后也也不不能能產產生生完完全全的的保保護護性性免免疫疫v Mp特特異異性性的的IgM抗抗體體在在發(fā)發(fā)病病后后不不久久即即可可出出現現升升高，高

7、，14周周內內達達到到峰峰值，值，然然后后在在幾幾個個月月內內逐逐漸漸下下降降到到沒沒有有臨臨床床意意義義的的水水平。平。急急性性感感染染后后IgM的的持持續(xù)續(xù)時時間間在在不不同同個個體體中中差差異異較較大。大。兒兒童童的的IgM反反應應一一般般強強于于成成人，人，約約50%的的成成人人患患者者無無法法在在Mp感感染染后后測測到到IgM的的升升高高v IgG的的出出現現時時間間晚晚于于IgM，5周周左左右右達達到到峰峰值，值，上上升升速速度度較較慢慢且且在在體體內內的的持持續(xù)續(xù)時時間間較較長長（4年年左左右）右），但但在在感感染染數數月月后后就就會會下下降降到到較較低低水水平。平。有有些些兒兒

8、童童無無法法測測得得明明顯顯的的IgG反反應應v 特特異異性性IgA的的免免疫疫反反應應與與IgM類類似，似，但但其其在在成成年年人人尤尤其其是是老老年年人人中中的的反反應應水水平平更更高高血清學診斷后抗體產生，36周可達高峰，23個月后逐漸下降，故應在發(fā)病7d后采血檢測。v通常檢測滴度陽性起點為1：40，但在臨床診斷上因隱性感染存在，此值多無臨床意義。v一般認為成人1：801：160或以上對臨床診斷有意義，兒童亦為1：160以上有意義。MP感染的臨床診斷 道感染癥狀，無明顯臟器所累。v （2）MP肺炎：有發(fā)熱、咳嗽、呼吸困難及肺部啰音，胸片有片狀影或相應影像學改變，MP血清學檢測陽性。v （

9、3）MP肺炎肺外并發(fā)癥（肺外臟器受累）：除明確診斷為MP感染外，同時可累及心、腦、腎、淋巴、血液系統等，并出現相應受累癥狀與體征，如出現胸腔積液、MP腦炎、感染后腎炎、心肌炎、血小板減少性紫癜，有者呈多臟器所累。MP血清學檢測陽性。v （4）MP血癥：MP血培養(yǎng)費時23周，對實驗室技術要求較高。對肺炎支原體的治療原則對肺炎支原體的治療原則生生素素治治療療v 支支原原體體肺肺炎炎雖雖然然有有一一定定的的自自限限性，性，但但仍仍應應進進行行抗抗生生素素治治療療以以縮縮短短病病程程并并減減少少其其傳傳染染性性v 在在非非典典型型性性肺肺炎炎的的病病原原體體未未完完全全確確定定時，時，可可以以采采取取

10、一一些些經經驗驗用用藥，藥，對對Mp有有效效的的藥藥物物也也能能覆覆蓋蓋一一些些其其他他病病原原體體（非非病病毒毒類）類）v 抗抗生生素素的的使使用：用：首首選選為為大大環(huán)環(huán)內內酯酯類類，也也可可選選用用四四環(huán)環(huán)素素類類（老老年年人）人）和和喹喹諾諾酮酮類。類。Mp對對-內內酰酰胺胺類類抗抗生生素素天天然然耐耐藥，藥，磺磺胺胺類類對對Mp也也沒沒有有作作用用v 抗抗生生素素使使用用一一般般應應持持續(xù)續(xù)710天，天，但但口口服服用用藥藥延延長長至至1421天天也也是是合合適適的的v 除除使使用用抗抗生生素素外，外，還還應應采采取取一一些些對對癥癥治治療療措措施施（止止咳咳藥、藥、退退燒燒藥、藥、

11、止止痛痛劑劑等）等）MP肺炎的藥物治療中度MP肺炎可以口服大環(huán)內酯類抗生素，包括紅霉素、羅紅霉素、克拉霉素、阿奇霉素等。v重度MP肺炎在疾病進展時期可以靜脈用藥，但應適用時轉變?yōu)槲改c道用藥，v采用抗生素序貫療法。阿奇霉素的特點素，其具有獨特的藥代動力學特征，即呈現多房室模型，有良好的組織滲透性，組織濃度高，在細胞和組織內的濃度可超過血液濃度的10100倍，炎癥部位較非炎癥部位濃度高6倍。這種優(yōu)化的體內分布十分有利于致病菌的抑制和清除作用，它還能對MP發(fā)揮其一致蛋白合成的獨特作用。v 阿奇霉素胃腸都反應輕微，大量以原型由糞便排出，清除緩慢而部明顯損害肝臟功能。v 阿奇霉素半衰期長，具有顯著的抗生

12、素后效應，由于組織對阿奇霉素的攝取快而釋放慢，故其血漿半衰期接近70小時。v 臨床上使用阿奇霉素3天即可停藥，但在細胞內和被釋放出的阿奇霉素濃度于57天內仍超出常見敏感細菌的最小抑菌濃度，而繼續(xù)保持抗菌活性。v 阿奇霉素具有口服劑量小，口服次數少及療程相對短的優(yōu)點。治療方法霉素或紅霉素，阿奇霉素10mg/（kgd），每日1次，服3d停4d。中至重度支原體肺炎，靜脈給藥，選擇阿奇霉素，10mg/（kgd），每日1次，用5d停3d（或用3d停4d）為一個療程，總計2-3個療程或更長。v 支原體血癥主要表現為持續(xù)高熱或馳張高熱，肺部可見大片狀陰影，血支原體抗體陽性，選擇紅霉素靜滴，劑量同前，應用3-

13、7d，若支原體血癥已控制，即體溫下降，可改為阿奇霉素靜滴或口服，總療程4-6周。v 應用阿奇霉素的過程中，要取得家長的知情同意?；旌细腥荆ǘ馗腥荆┰ê喜⒓毦虿《靖腥荆?，vMP感染易引起EB病毒感染（傳染性單核細胞增多）或二者混合感染，二者不僅臨床癥狀相似，且都可疑引起血清嗜異凝集試驗陽性反應，v除給予大環(huán)內酯類藥物外，應同時給予抗炎、抗病毒治療總結總結4入入院。院。v 4天天前前患患兒兒無無明明顯顯誘誘因因出出現現發(fā)發(fā)熱，熱，體體溫溫最最高高達達39.5，伴伴咳咳嗽，嗽，表表現現為為陣陣發(fā)發(fā)性性咳咳嗽，嗽，干干咳，咳，晚晚上上重，重，院院外外予予口口服服“阿阿莫莫西西林、林、頭頭孢孢克克

14、肟、肟、肺肺力力咳咳”2天，天，靜靜點點“頭頭孢孢呋呋辛、辛、炎炎琥琥寧寧（用用量量不不詳）詳）”1天天治治療，療，效效果果不不明明顯，顯，咳咳嗽嗽加加重重入入院。院。v 6-4門門診診胸胸片片示示:右右上上肺肺炎炎,右右肺肺上上肺肺不不張張按按序。序。v 入入院院查查體：體：體體溫溫39，神神清，清，精精神神尚尚好，好，熱熱性性病病容，容，口口周周無無發(fā)發(fā)紺，紺，呼呼吸吸促，促，咽咽充充血，血，雙雙側側扁扁桃桃體體度度腫腫大，大，充充血，血，呼呼吸吸35次次/分，分，右右肺肺上上呼呼吸吸音音減減低，低，心心腹腹未未見見異異常。常。v qd1d6-5阿阿奇奇霉霉素素10mg/kg/日日iv qd7dL,N:76.6%,L22.9%,CRP54mg/Lv 6-7胸胸部部CT示：示：右右肺肺上上葉葉不不張張v 6-7肺肺炎炎支支原原體體抗抗體：體：陰陰