PCR項(xiàng)目及臨床意義

1、PCR檢驗(yàn)室常規(guī)項(xiàng)目簡介序號種類檢測項(xiàng)目定量/定性簡稱取樣1RNA艾滋病毒定量HIV血清、抗凝全血2DNA乙肝病毒定量/定性HBV血清、抗凝全血3RNA丙肝病毒定量/定性HCV血清、抗凝全血4DNA結(jié)核桿菌定性TB痰液、胸腹水5DNA人乳頭瘤病毒定性/分型HPV分泌物拭子、病損組織6DNA淋球菌定性NG分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）7DNA沙眼衣原體定性CT分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）8DNA解脲脲原體定性UU分泌物拭子（宮頸管、尿道壺腹部）9RNA甲型流感病毒定性-咽部拭子、肺灌洗液10RNA乙型流感病毒定性-咽部拭子、肺灌洗液11DNA肺炎支原體定性MP咽部拭子、肺灌洗液12DNA單

2、純皰疹病毒定性HSV分泌物拭子、皮損組織13DNA巨細(xì)胞病毒定量/定性CMV血清、血漿或尿液14DNA梅毒螺旋體定性TP皮損刮出液、抗凝全血15DNAEB病毒定性EB分泌物拭子、組織等16DNA幽門螺旋桿菌定性HP口腔含漱液、胃粘膜17RNA腸道病毒71定性EV71大便樣本等18RNA柯薩奇病毒A16定性CA16大便樣本等1. 乙型HBV-DNA定量HBV-DNA定量檢測方法的出現(xiàn)從根本上突破了免疫學(xué)方法間接檢測的局限性，通過直接檢測病毒的核酸水平真實(shí)地反映病毒的情況從而對于HBV的準(zhǔn)確診斷、有效治療、精確預(yù)后及新藥研制等各個方面具有重大意義：1）判斷疾病的嚴(yán)重程度和傳染性。HBV-DNA是直

3、接反映HBV復(fù)制狀態(tài)及傳染性的最佳指標(biāo)。2）PCR定量結(jié)果與血清免疫學(xué)結(jié)果的綜合評價。采用FQ-PCR定量檢測乙肝病毒DNA，結(jié)合“二對半”檢測結(jié)果，對于機(jī)體乙肝病毒感染狀態(tài)尤其變異株發(fā)生和病人預(yù)后的評估更為科學(xué)。3）觀察抗病毒藥物療效，指導(dǎo)藥物用量。直接檢測血清中的HBV-DNA是監(jiān)控HBV傳染和觀察抗病毒藥物療效的最可靠的方法。根據(jù)2000拉米夫定臨床應(yīng)用指導(dǎo)意見，中國慢性乙型肝炎病人治療的目的之一就是要降低血清HBV-DNA。同時血清HBV-DNA滴度的動態(tài)變化還可在臨床上對用藥的劑量、用藥時間是否需要聯(lián)合用藥以及用藥的效果等提供參考。4）獻(xiàn)血員窗口期病毒核酸的篩查及早期診斷。HBsAg

4、在血清中的檢出通常在乙肝病毒感染后的24月出現(xiàn)，平均為56天左右。而HBV-DNA的檢出可以將該所謂窗口期提前615天，對于早期診斷和提高輸血安全有著重要的意義。5）預(yù)測病情、判斷預(yù)后。通常HBV-DNA持續(xù)陽性超過6個月的會轉(zhuǎn)為慢性肝炎?？笻Be陽性患者血清HBV-DNA持續(xù)陽性常提示肝損嚴(yán)重。6）對阻斷母嬰傳播的監(jiān)測。聯(lián)合應(yīng)用高價免疫球蛋白和乙肝疫苗有效地阻斷母嬰傳播，但仍有5-10%嬰兒對疫苗呈低反應(yīng)，熒光定量PCR可對此進(jìn)行監(jiān)測。7）器官移植中的作用。肝臟器官移植是目前肝硬化晚期治療的唯一方法，定量檢測HBV-DNA為肝移植術(shù)后的跟蹤觀測具有較好的臨床價值。乙肝病毒定量相關(guān)檢測還有：乙

5、肝標(biāo)志物定性，乙肝標(biāo)志物定量，乙型HBV-DNA定量，肝臟功能檢測。2. 乙型HBV-DNA定性HBV-DNA是乙肝病毒基因，其有無、多少是乙肝病毒存在及有無復(fù)制能力的直接標(biāo)志。早期診斷乙肝病毒感染的直接證據(jù)，提高乙肝病毒檢測的陽性率，用于乙肝病毒治病機(jī)理的研究，作為乙肝病毒分子流行病學(xué)研究。乙肝病毒相關(guān)檢測還有：乙肝標(biāo)志物定性，乙肝標(biāo)志物定量，乙型HBV-DNA定量，肝臟功能檢測。3. 丙肝病毒RNA定量HCV RNA定量檢測有助于預(yù)測、監(jiān)測抗病毒治療的效果，HCV病毒核酸的定量檢測在一定程度上能反應(yīng)肝臟炎癥活動程度，分析抗病毒治療后HCV RNA血清水平有助于總結(jié)抗病毒制劑的療效，為調(diào)整劑

6、量、確定療程提供依據(jù)。丙肝病毒相關(guān)檢測還有：丙肝抗體檢測，肝臟功能檢測。4. 結(jié)核桿菌DNA定性根據(jù)臨床表現(xiàn)，常規(guī)痰涂片或分離培養(yǎng)對某些結(jié)核病人可能造成誤診或漏診。熒光PCR理論上可檢出一個結(jié)核桿菌，特異性好，且時間短至1-2小時即可出報告?？梢詫Y(jié)核病人早期診斷，可以鑒別診斷肺結(jié)核和肺癌。作為抗癆治療的療效評價；結(jié)核病的分子流行病學(xué)研究。結(jié)核桿菌的相關(guān)檢測還有：結(jié)核抗體檢測，ADA，結(jié)核桿菌芯片檢測，抗酸染色，OT試驗(yàn)，PPD試驗(yàn)，放免分析，結(jié)核培養(yǎng)。5. HPV基因分型宮頸癌是人類所有癌癥中唯一病因明確的癌癥，即人乳頭瘤病毒的感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件和主要病因，99.7%的宮頸癌患者都能

7、發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染，從HPV感染到宮頸癌的發(fā)生需要經(jīng)過多年甚至數(shù)十年的時間，這為宮頸癌篩查指明了方向。因此早期定期進(jìn)行HPV感染的篩查，對預(yù)警癌變傾向，及時發(fā)現(xiàn)、預(yù)防和早期診斷及臨床治療具有非常重要的意義。相關(guān)檢查項(xiàng)目：組織原位雜交，基因芯片技術(shù)，液基細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)6. 乳頭瘤病毒DNA定性HPV16，18病毒DNA通常整合到人基因中，可能是宮頸癌的啟動癌基因，對于婦產(chǎn)科的防癌普查有指導(dǎo)意義，而HPV6.11?？烧T發(fā)良性濕疣或?qū)m頸糜爛。因此，HPV的檢查非常重要。相關(guān)檢查項(xiàng)目：組織原位雜交，基因芯片技術(shù)，液基細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)。7. 梅毒螺旋體DNA定性FQ-PCR檢測人體不同來源標(biāo)本中TP-DNA的結(jié)

8、果，實(shí)際上是反映了梅毒螺旋體在這些部位的載量及其消長規(guī)律。梅毒血清學(xué)檢查比如RPR、TPPA，是診斷各期梅毒最常用的實(shí)驗(yàn)室檢查手段，但其陽性結(jié)果不代表體內(nèi)有活的TP存在。相關(guān)檢查項(xiàng)目：RPR、TPPA、TPHA8. 淋球菌DNA定性傳統(tǒng)的涂片、培養(yǎng)等方法，靈敏度不高，女性病人檢出率僅50%淋球菌感染，男性可發(fā)生尿道炎。女性可引起尿道炎及子宮頸炎。不經(jīng)治療或治療不徹底，可致慢性感染。胎兒經(jīng)產(chǎn)道時，可感染淋病性急性結(jié)膜炎。因此，在淋病的早期診斷，對該病有重大意義。淋球菌相關(guān)檢查項(xiàng)目：淋球菌培養(yǎng)，涂片革蘭氏染色，基因探針技術(shù)。9. 沙眼衣原體DNA定性非淋球菌感染的尿道炎、宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、急性輸

9、卵管炎及盆腔炎，有超過50%是由沙眼衣原體感染所致，同時可引起不孕不育。因此，在婦產(chǎn)科和男性生殖泌尿科，同時檢測UU和CT很有必要?？芍律逞?、成人和新生兒包涵體結(jié)膜炎。沙眼衣原體相關(guān)檢查項(xiàng)目：細(xì)胞培養(yǎng)，免疫熒光法，沙眼衣原體抗體檢測。10. 解脲支原體DNA定性解脲支原體在非淋球菌性尿道炎中，有50%是由本病引起的。如果孕婦生殖道帶有解脲支原體，可通過胎盤感染胎兒引起早產(chǎn)、死胎，分娩時可引起新生兒呼吸道感染。另外還可導(dǎo)致不孕不育。因此，婦產(chǎn)科普查解脲支原體有很重要的意義。相關(guān)檢查項(xiàng)目：解脲支原體培養(yǎng)，解脲支原體抗體,生長抑制試驗(yàn),代謝抑制試驗(yàn)。11. EB病毒DNA定性EB病毒屬于皰疹病毒，可

10、引起增殖性感染和非增殖性感染。特別是非增殖性感染，可導(dǎo)致細(xì)胞癌變。被認(rèn)為與傳染性單核細(xì)胞增多癥。淋巴癌、胃咽癌、何杰金氏癌、慢性疲勞綜合癥有關(guān)。相關(guān)檢查項(xiàng)目：EB病毒特異性抗體或異嗜性抗體凝集試驗(yàn)。12. 單純皰疹病毒DNA定性HSV-1型：主要侵犯口、唇的皮膚黏膜，可引起腦炎，偶爾可見于外生殖系統(tǒng)。HSV-2型：一般與外生殖系感染和新生兒感染有關(guān)?？梢鹋K器的病變（包括腦炎）偶見于口腔病變。相關(guān)檢查項(xiàng)目：單純皰疹病毒抗體檢測。13. 肺炎支原體DNA定性肺炎支原體是原發(fā)性非典型肺炎和急性呼吸道感染的病原體，尤其是兒童和青少年中常見。常在軍營和中小學(xué)生中流行。每隔3-5年流行一次。許多患者癥狀

11、較輕，只有頭疼、發(fā)熱、咳嗽等呼吸道癥狀，也有個別引起死亡的報道。有時合并中耳炎、心血管、神經(jīng)癥狀和皮疹。肺炎支原體感染是在治療上與其它微生物感染是治療不盡相同，為避免濫用抗生素，應(yīng)早期、快速、準(zhǔn)確的檢測肺炎支原體。相關(guān)檢查項(xiàng)目：肺炎支原體抗體檢測；補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)；肺炎支原體培養(yǎng)。14. 幽門螺旋桿菌DNA定性幽門螺桿菌感染是慢性活動性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織（MALT） 淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界衛(wèi)生組織/國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（WHO/IARC） 將幽門螺桿菌定為類致癌原?，F(xiàn)在PCR可通過鼻胃管收集5ml胃液作PCR檢測。采用膠囊包裹的尼龍線取胃液標(biāo)本的方法，使這一診斷性試驗(yàn)的侵入性更小。相關(guān)檢查項(xiàng)目：C13/C14呼吸