標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 34222-2017 核糖核酸酶活力檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),旨在規(guī)范核糖核酸酶(RNase)活力的測(cè)定過(guò)程。該標(biāo)準(zhǔn)適用于從不同來(lái)源獲得的核糖核酸酶樣品,包括但不限于微生物發(fā)酵產(chǎn)物、植物提取物以及重組表達(dá)產(chǎn)品等。其主要目的是提供一套科學(xué)合理且可重復(fù)性強(qiáng)的方法來(lái)評(píng)價(jià)這些酶制劑的質(zhì)量和活性水平。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),檢測(cè)原理基于核糖核酸酶能夠特異性地催化RNA鏈中磷酸二酯鍵斷裂這一特性。通過(guò)監(jiān)測(cè)反應(yīng)前后底物濃度的變化或者產(chǎn)物生成量,間接反映酶活性大小。具體操作步驟涵蓋了試劑準(zhǔn)備、樣品處理、反應(yīng)條件設(shè)定、終止反應(yīng)及結(jié)果計(jì)算等多個(gè)環(huán)節(jié),并對(duì)每個(gè)步驟都給出了詳細(xì)的操作指南和技術(shù)參數(shù)要求。

在實(shí)驗(yàn)材料方面,《GB/T 34222-2017》規(guī)定了所需的各種化學(xué)試劑及其純度等級(jí),同時(shí)指定了用于校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)品類型;對(duì)于儀器設(shè)備,則列出了必要的分析工具如分光光度計(jì)等,并對(duì)其性能指標(biāo)提出了明確要求。

此外,該標(biāo)準(zhǔn)還特別強(qiáng)調(diào)了質(zhì)量控制的重要性,建議實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)控檢查以確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性與可靠性。同時(shí),在附錄部分提供了參考性資料,比如典型的工作曲線示例、常見(jiàn)問(wèn)題解答等內(nèi)容,為使用者提供更多技術(shù)支持。


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....

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  • 2017-09-07 頒布
  • 2018-04-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS07080

B20/39.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34222—2017

核糖核酸酶活力檢測(cè)方法

Determinationoftheactivityofribonuclease

2017-09-07發(fā)布2018-04-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T34222—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院廈門市格靈生物技術(shù)有限公司福建賽福食品檢測(cè)研究所有

:、、

限公司浙江工商大學(xué)河北農(nóng)業(yè)大學(xué)合肥工業(yè)大學(xué)河北省出入境檢驗(yàn)檢疫局泉州市標(biāo)準(zhǔn)化研究所

、、、、、、

北京市食品科學(xué)研究院河北食品檢驗(yàn)研究院東營(yíng)市標(biāo)準(zhǔn)化信息所河南大學(xué)

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人馬愛(ài)進(jìn)陳智勇黃秀娟王彥波孫紀(jì)錄鄭磊劉道亮林清山孫勇云振宇

:、、、、、、、、、、

傅玲琳吳琦趙琳周魏劉鵬康文藝宗學(xué)花

、、、、、、。

GB/T34222—2017

核糖核酸酶活力檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了核糖核酸酶活力檢測(cè)原理儀器設(shè)備及器具主要試劑分析步驟和結(jié)果分析

、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于生化試劑核糖核酸酶活力檢測(cè)

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

核糖核酸酶ribonucleaseRNase

;

水解核糖核酸中磷酸二酯鍵生成寡核苷酸或單核苷酸的核酸酶

(RNA),。

32

.

核糖核酸酶活力單位ribonucleaseactivityunit

以濃度為的酵母為底物在且的條件下內(nèi)使反應(yīng)

0.15mg/mL1.5mLRNA,50℃pH5.0,1min

液在處吸光度增加所需要的酶量

260nm0.001。

注一個(gè)酶活力單位以表示

:U。

4原理

核糖核酸酶催化核糖核酸分解降解產(chǎn)物在波長(zhǎng)下具有特征吸收峰通過(guò)外標(biāo)法計(jì)算核糖

,260nm,

核酸酶的酶活力

5儀器設(shè)備及器具

51恒溫水浴槽精度為

.:0.1℃。

52紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)精度為

.-:0.001。

53計(jì)精度為

.pH:0.01。

54石英比色皿

.1cm。

55電子天平精度為或

.:0.0001g、0.01g0.1g。

6試劑

本方法所用試劑均為分析純除特殊說(shuō)明外實(shí)驗(yàn)用水均為

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