輻照滅菌劑量確認(rèn)報(bào)告

1、 報(bào)告編號(hào)： 輻照滅菌劑量確定報(bào)告產(chǎn)品名稱: xxxxxxx 產(chǎn)品型號(hào)： xxxxxxxxx 產(chǎn)品批號(hào)： 20131030、20140224 報(bào)告日期： 2014年5月4日 目 錄 摘 要3方 法4結(jié) 果11資料保存11參考文獻(xiàn)11摘 要本報(bào)告依據(jù)ISO11137標(biāo)準(zhǔn)要求，確定醫(yī)療器械產(chǎn)品輻照滅菌劑量。報(bào)告通過(guò)定義產(chǎn)品族及檢測(cè)產(chǎn)品中微生物負(fù)荷數(shù)量，設(shè)定在SIP=1.0的情況下產(chǎn)品輻照滅菌加工過(guò)程中的驗(yàn)證劑量VDmax25，并通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)證劑量，進(jìn)一步證實(shí)25.0kGy作為公司產(chǎn)品輻照滅菌劑量，同時(shí)，指定最大可接收的劑量值。本次輻照滅菌確認(rèn)以公司生產(chǎn)的xxxxx產(chǎn)品為確認(rèn)對(duì)象。根據(jù)ISO111

2、37中劑量設(shè)定方法和要求，驗(yàn)證過(guò)程中對(duì)xxxxx產(chǎn)品連續(xù)3批次的產(chǎn)品進(jìn)行初始污染菌的檢驗(yàn)及分析，結(jié)果表明，xxxxx產(chǎn)品中的初始污染菌的數(shù)量分別為780 cfu/件、860 cfu/件、690 cfu/件，其中回收率為89.93%，校正因子為1.11。同時(shí)根據(jù)ISO11137-2：2012 VDmax25要求，確定了xxxxx產(chǎn)品的輻照滅菌驗(yàn)證劑量為8.2±10%kGy，并從該產(chǎn)品中獨(dú)立批號(hào)中隨機(jī)抽取10件樣品，用驗(yàn)證劑量進(jìn)行輻照滅菌，并對(duì)驗(yàn)證產(chǎn)品進(jìn)行無(wú)菌檢查。無(wú)菌檢測(cè)無(wú)一件產(chǎn)品為陽(yáng)性，符合ISO11137-2：2012標(biāo)準(zhǔn)的要求。驗(yàn)證后，并采用25.0kGy輻照劑量對(duì)xxxxx產(chǎn)品

3、進(jìn)行輻照加工，經(jīng)無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果顯示輻照后的產(chǎn)品無(wú)菌檢驗(yàn)無(wú)一件為陽(yáng)性結(jié)果，符合規(guī)定要求。根據(jù)VDmax25用于單批產(chǎn)品的程序，驗(yàn)證了xxxxxx產(chǎn)品在輻照滅菌過(guò)程中最低滅菌劑量為25.0kGy，滅菌保證水平（SAL）為10-6。同時(shí)，根據(jù)輻照加工過(guò)程中的不穩(wěn)定因素值，本次驗(yàn)證對(duì)輻照滅菌過(guò)程中進(jìn)行裝載模式實(shí)驗(yàn)，同時(shí)確定了xxxxxx產(chǎn)品最大可接受的劑量值為40.0kGy。檢測(cè)： 審 核： 批 準(zhǔn)：年 月 日 年 月 日 年 月 日 方法與結(jié)果1 xxxxxx產(chǎn)品初始污染菌檢測(cè)1.1產(chǎn)品族確認(rèn)根據(jù)產(chǎn)品原材料的性質(zhì)和來(lái)源、產(chǎn)品的構(gòu)成、產(chǎn)品的設(shè)計(jì)和尺寸、生產(chǎn)工藝對(duì)所有的無(wú)菌包裝產(chǎn)品進(jìn)行定義劃分。目前，本公

4、司xxxxxx產(chǎn)品使用輻照滅菌，沒(méi)有不同規(guī)格型號(hào)，依據(jù)ISO11137-2:2006可以歸為一個(gè)產(chǎn)品族。1.2 取樣 根據(jù)ISO11137-2：2012醫(yī)療器械產(chǎn)品的輻照滅菌-第二部分：滅菌劑量的建立中“5 建立和驗(yàn)證滅菌劑量的產(chǎn)品取樣和檢測(cè)”要求，本公司xxxxxx產(chǎn)品取樣如下：xxxxxx：規(guī)格型號(hào)：xxxx型，生產(chǎn)批號(hào)：20131030、20140224、20140226每批次抽取樣品10件。1.2初始污染菌的檢測(cè)采用平板計(jì)數(shù)法檢測(cè)產(chǎn)品中的初始污染菌數(shù)量，依據(jù)EN ISO11737-1：2006醫(yī)療產(chǎn)品輻射滅菌：微生物學(xué)方法第一部分：產(chǎn)品上微生物總數(shù)的測(cè)定。1.2.1 回收率檢測(cè)取標(biāo)準(zhǔn)包

5、裝產(chǎn)品10件，將測(cè)試產(chǎn)品選擇多次洗脫進(jìn)行回收率測(cè)定，反復(fù)洗脫四次培養(yǎng)記數(shù)，計(jì)算回收率。計(jì)算公式：回收率（%）=洗脫1細(xì)菌數(shù)量/總洗脫細(xì)菌數(shù)量×100%； 校正因子=1/回收率1.2.2 樣品中初始污染菌的檢測(cè)1) 洗脫液：無(wú)菌0.9%NaCl溶液。2） 初始污染菌的洗脫：以無(wú)菌操作，采用無(wú)菌注射器將無(wú)菌0.9%NaCl溶液注入到供試品包裝盒內(nèi)，振蕩洗脫一定時(shí)間，收集洗脫液，并做好相關(guān)的標(biāo)記，相同方法反復(fù)洗脫四次，并收集洗脫液，分別標(biāo)記為洗脫液1、洗脫液2、洗脫液3、洗脫液4。3）接種及培養(yǎng)接種：在無(wú)菌條件下，將收集的不同的洗脫液取適量經(jīng)集菌儀過(guò)濾后，取濾膜于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)并計(jì)數(shù)

6、。其中分別以無(wú)菌0.9%NaCl溶液做空白對(duì)照和以金黃色葡萄球菌菌懸液做陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)。培養(yǎng)：將配制好的平板放入培養(yǎng)箱中，在溫度為30-35條件下培養(yǎng)48h后，分別對(duì)平板上的微生物記數(shù)。4）計(jì)數(shù)：按菌落計(jì)數(shù)原則進(jìn)行計(jì)數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，計(jì)算出每件產(chǎn)品的菌落數(shù)（cfu/或cfu/100cm2）。1.2.2.3 初始污染菌檢測(cè)結(jié)果1） 收率檢測(cè)結(jié)果回收率試驗(yàn)主要取10件標(biāo)準(zhǔn)包準(zhǔn)樣品，通過(guò)洗脫、瓊脂覆蓋，通過(guò)計(jì)算得出回收率為89.8%，校正因子為1.11。具體結(jié)果見表1。表1： 回收率測(cè)定結(jié)果樣品號(hào)每次洗脫的細(xì)菌總數(shù)（cfu/件）回收率（%）洗脫1洗脫2洗脫3洗脫4總0%25

7、186022086.3%37008812087.5%46967034087.0%55414811090.2%69076528090.7%77484111093.5%89057916090.5%97246313090.5%10736559092.0%平均回收率89.8%校正因子1.112）初始污染菌測(cè)定結(jié)果（見表2）xxxxxx（生產(chǎn)批號(hào)：20131030、20140224、20140226）中，其中校正后的最高生物負(fù)載量為860cfu/件，最低生物負(fù)載量為 690 cfu/件，平均初始污染菌分別為 780 cfu/件。表2：初始污染菌測(cè)定結(jié)果1產(chǎn)品批次第一批第二批第三批批 號(hào)201310302

8、014022420140226序 號(hào)產(chǎn)品編號(hào)初始污染菌（CFU/件）產(chǎn)品編號(hào)初始污染菌（CFU/件）產(chǎn)品編號(hào)初始污染菌（CFU/件）1201310030-00120140224-00120140226-001220131030-00220140224-00220140226-002320131030-00320140224-00320140226-003420131030-00420140224-00420140226-004520131030-00520140224-00520140226-005620131030-00620140224-00620140226-006720131030-0

9、0720140224-00720140226-007820131030-00820140224-00820140226-008920131030-00920140224-00920140226-0091020131030-01020140224-01020140226-010校正后初始污染菌（CFU/件）780860690校正后平均初始污染菌（CFU/件）7802 VDmax25的建立 根據(jù)ISO11137中VDmax25建立要求：若批平均生物負(fù)載總平均生物負(fù)載×2，則用最高批次值；若批平均生物負(fù)載總平均生物負(fù)載×2，則用總平均生物負(fù)載，依據(jù)平均生物負(fù)載（總平均或最高批次生

10、物負(fù)載）確定驗(yàn)證劑量。產(chǎn)品族中代表產(chǎn)品xxxxxx平均微生物批平均生物負(fù)載總平均生物負(fù)載×2，總平均生物負(fù)載780cfu/件。從ISO11137表9中查出驗(yàn)證劑量值應(yīng)為8.2±10%kGy。3 劑量驗(yàn)證試驗(yàn)3.1 驗(yàn)證試驗(yàn)取樣 取標(biāo)準(zhǔn)包裝產(chǎn)品10件（規(guī)格型號(hào)：xxx型，生產(chǎn)批號(hào)：20140224，10支）3.2 確認(rèn)驗(yàn)證劑量試驗(yàn)的實(shí)施 委托xxxx有限公司進(jìn)行輻照滅菌，輻照劑量為8.2±10%kGy。3.3驗(yàn)證試驗(yàn)的無(wú)菌檢驗(yàn)3.3.1 無(wú)菌檢驗(yàn)方法依據(jù)EN ISO11737-2：2006 醫(yī)療產(chǎn)品輻射滅菌-微生物學(xué)方法-第二部分：無(wú)菌試驗(yàn)。1）洗脫液：0.9%Na

11、Cl。2） 培養(yǎng)基：硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基、改良馬丁培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基3） 洗脫接種：采用集菌儀法，將無(wú)菌的0.9%NaCl注入到滅菌后的產(chǎn)品包裝盒中，充分振搖后，將洗脫液通過(guò)集菌儀分流到全封閉集儀培養(yǎng)器中，同時(shí)將硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基或改良馬丁培養(yǎng)基分流到培養(yǎng)器中，做好標(biāo)簽，培養(yǎng)。以洗脫液0.9%NaCl作為空白對(duì)照和金黃色葡萄球菌菌液作為陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)。4） 培養(yǎng)：輻照后的樣品洗脫液濾膜分別接種在硫乙醇酸鹽需氧厭氧液體培養(yǎng)基中，在28-32條件下培養(yǎng)14h，觀察結(jié)果。改良馬丁培養(yǎng)基置于30-35條件下培養(yǎng)14h，觀察結(jié)果。5）結(jié)果判定a)若10個(gè)產(chǎn)品中不超過(guò)1個(gè)樣品陽(yáng)性，接受驗(yàn)證試驗(yàn)，并且接

12、受25kGy作為滅菌劑量。b)若10個(gè)產(chǎn)品中出現(xiàn)2個(gè)以上陽(yáng)性，不接受驗(yàn)證結(jié)果，如果這個(gè)結(jié)果可以歸咎于錯(cuò)誤的生物負(fù)荷值測(cè)定，不正確的無(wú)菌測(cè)試或不適當(dāng)?shù)尿?yàn)證劑量分布，驗(yàn)證試驗(yàn)可以按一個(gè)糾正措施重新進(jìn)行。如果產(chǎn)生這個(gè)結(jié)果的原因不通過(guò)糾正措施識(shí)別，這個(gè)方法無(wú)效。3.3.3 劑量驗(yàn)證檢驗(yàn)結(jié)果1) 樣品釋出物的抑菌試驗(yàn)將滅菌的xxxxxx的洗脫液濾膜在硫乙醇酸鹽需氧厭氧液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后，分別接種金黃色葡萄球菌菌懸液約100 cfu，繼續(xù)培養(yǎng)24h后，觀察，均有細(xì)菌生長(zhǎng)。證明樣品中無(wú)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的釋放物，結(jié)果如下。表3：產(chǎn)品釋出物檢驗(yàn)結(jié)果微生物接種量（cfu）產(chǎn)品+SCDB+標(biāo)準(zhǔn)菌對(duì)照SCDB+標(biāo)準(zhǔn)

13、菌金黃色葡萄球菌100+2） 無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果將滅菌的xxxxxx的洗脫液濾膜，分別對(duì)需氧/厭氧型細(xì)菌及霉菌進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表現(xiàn)為無(wú)菌生長(zhǎng)，結(jié)果見表4。表4 無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果樣品名稱樣品數(shù)量需氧/厭氧菌霉菌陰性對(duì)照陽(yáng)性數(shù)xxxxxx10件-+5 25kGy劑量驗(yàn)證5.1 25kGy劑量驗(yàn)證試驗(yàn)本次取10件xxxxxx，委托xxxxx有限公司進(jìn)行輻照滅菌，最低輻照劑量設(shè)為25kGy。5.1 無(wú)菌檢驗(yàn)結(jié)果將滅菌的xxxxxx的洗脫液濾膜，分別對(duì)需氧/厭氧型細(xì)菌及霉菌進(jìn)行檢測(cè)，檢驗(yàn)結(jié)果無(wú)一件呈陽(yáng)性，符合規(guī)定要求。見表5。表5：無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果樣品名稱生產(chǎn)批號(hào)樣品數(shù)量需氧/厭氧菌霉菌陰性對(duì)照陽(yáng)性數(shù)xxxxxx201

14、4022410件-+6 最大劑量驗(yàn)證6.1 最大劑量驗(yàn)證設(shè)定 根據(jù)美國(guó)FDA的參考文獻(xiàn)，在伽馬加工過(guò)程中，最大耐受劑量必須是其最小滅菌劑量的1.6倍以上，結(jié)合廣州華大的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，設(shè)定最大耐受劑量值為40.0kGy，委托xxxxxx科技有限公司輻照40.0kGy后，驗(yàn)證此劑量對(duì)產(chǎn)品特性的影響。6.2 最大劑量驗(yàn)證試驗(yàn)取標(biāo)準(zhǔn)包裝產(chǎn)品10件（規(guī)格型號(hào)：XQL-型，生產(chǎn)批號(hào)：20140224，10支）委托xxxxxx科技有限公司輻照40.0kGy后，驗(yàn)證此劑量對(duì)產(chǎn)品外觀及物理性能的影響。6.3 最大耐受劑量輻照后產(chǎn)品物理性能對(duì)比試驗(yàn)表8：輻照后產(chǎn)品物理性能對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果項(xiàng)目未輻照產(chǎn)品情況25.0kGy輻

15、照產(chǎn)品情況40.0kGy輻照產(chǎn)品情況對(duì)比情況xxxxx外觀表面清潔、顏色為白色表面清潔、顏色為黃色表面清潔、零件顏色為淺黃色輻照后顏色不變外包裝密封后應(yīng)不漏水；納物袋不漏水納物袋不漏水納物袋不漏水無(wú)明顯變化 通過(guò)對(duì)xxxxxx物理性能測(cè)試試驗(yàn)，結(jié)果表明，xxxxxx輻照40.0kGy后物理性能與輻照前相比無(wú)明顯變化，符合產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)要求。因此，40.0kGy作為最大耐受劑量驗(yàn)證通過(guò)。7 結(jié)論 從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得，xxxxxx在8.2kGy±10%劑量驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合ISO11137VDmax 25中規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)。這表明，在本研究條件下，25.0kGy可確定為常規(guī)滅菌的最低劑量。此劑量提

16、供的滅菌保證水平為SAL=10-6。同時(shí)，根據(jù)產(chǎn)品的特性及輻照加工過(guò)程中輻照劑量的不確定度，在設(shè)計(jì)過(guò)程中確定了上限最高輻照劑量值為40.0kGy。經(jīng)最大耐受劑量實(shí)驗(yàn)的驗(yàn)證結(jié)果，確定了xxxxxx最大可接受的劑量值為40.0kGy。資料保存所有資料、記錄及報(bào)告均保存xxxxx有限公司。參考文獻(xiàn)A . Sterilization of Health Care Products-Radiation-Part1:Requriements for development,Validation and Routine Control of a Sterilization process for medical devices ISO-11137-1:2006B. Sterilization of Health Care Products-Radiation-Part2:Establishing the Sterilization dose ISO-11137-2:2006C. Sterilization of Medical Devic