啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標準以及檢驗方法

1、啤酒的質(zhì)量和衛(wèi)生標準檢驗方法前言:啤酒的原料主要有大麥、啤酒花等。它們里面含的蛋白質(zhì)、碳水化合物、啤酒花苦味物質(zhì)等在釀造過程中發(fā)生細微變化后，并作為復合體存留在啤酒中。這些成分決定著啤酒的香味、醇度和泡沫。也就是說，這些成分能增加啤酒的表面張力和粘度，使啤酒能生出更白、更細的泡沫。啤酒里一般含有大約0.5%的碳酸氣體。這些碳酸氣體在發(fā)酵過程中產(chǎn)生、并融入啤酒，但是融進啤酒的這些碳酸氣的量約是在正常壓力下的兩倍，也就是說呈超飽和狀態(tài)。所以，當打開啤酒拴時，里面的啤酒恢復到正常壓力狀態(tài)下，再加上倒酒時，碳酸氣受到碰撞而恢復成氣體，這樣許多氣泡浮到啤酒液面上，就形成泡沫。啤酒泡沫之所以呈白色奶油狀，

2、是因為這些泡沫還帶了啤酒成分形成的表面張力和粘度。下面是啤酒的所有成分：1 .谷物（Grains）出芽（Malting）就是把大麥浸泡在水中使其發(fā)芽。這個過程一般持續(xù)36-48個小時，使麥芽中休眠狀態(tài)下的酶發(fā)育。酶在發(fā)酵過程中是非常關鍵的，它可以把淀粉轉化成糖，而糖在酵母的作用下又分解成二氧化碳和酒精。在出芽過程中，大麥的味道變得有些甜。大麥在出芽后需要弄干，這個過程的不同使大麥麥芽的味道也有所不同。自然風干的麥芽色澤只有很小的變化，可以用來釀造金黃色澤的啤酒；而經(jīng)過烘烤或煙熏的麥芽顏色變得很深，可以用來釀造色澤較重的啤酒；很多種啤酒都會使用不同品種的大麥，這樣就可以使最終產(chǎn)品的味道更加復雜。

3、有些啤酒廠也使用其它類別的谷物來釀造啤酒或調(diào)味。黑麥可以使啤酒增添一種香辣、雄健的口味；小麥可以使啤酒增添一定的果香，啤酒泡沫更豐富；燕麥可以使啤酒顯得油滑、濃重；水稻：可以使啤酒的色澤比較清淡；玉米大多使用于廉價啤酒種或作為味道的補充。2 .啤酒花（Hops）啤酒花又叫蛇麻草，英語是Hops。這是一種與*同一品系的植物，啤酒花實際上就是植物花蕊的一部分，它的調(diào)味屬性體現(xiàn)在啤酒花中的精油和果酸上。啤酒花含有的這些物質(zhì)可以使啤酒有一定的苦澀和芳香，平衡大麥麥芽中的糖分。啤酒花被采摘后需要烘干才能使用。釀造，而有些啤酒卻使用多種啤酒花來達到釀酒大師要求的獨特味道。3 .酵母（Yeast）酵母是一種

4、屬于真菌類的非常微小的生物菌，在自然環(huán)境中幾乎到處都有。啤酒在釀造過程中有三種方法加入酵母菌。啤酒的質(zhì)量標準啤酒的檢測標準，按照國家頒布的啤酒質(zhì)量標準本標準適用于以麥芽（包括特種麥芽）為主要原料，加酒花，經(jīng)酵母發(fā)酵釀制而成的、含有二氧化碳的、起泡的、低酒精度的各類熟、鮮啤酒。1、二氧化碳：指啤酒中溶解的二氧化碳含量，這些二氧化碳是在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的，它有利于啤酒的起泡性，飲后賦予一種舒適的刺激感覺，即所謂的殺口力。特別是在15c左右飲用時，二氧化碳逐步放出，給人以清新、爽快的感覺，還能聞出啤酒特有的酒花香味。2、泡持性：通常，啤酒倒入干凈的杯中即有泡沫升起，泡沫持久的程度即為泡持性。質(zhì)量的啤酒

5、泡沫潔白細膩，持泡時間長、掛杯性好，給人賞心悅目的感覺。3、濁度：是以EBC濁度單位表示啤酒透明度的外觀指標，好啤酒的濁度很低，在0.5EBC單位以下。差的啤酒可產(chǎn)生失光，甚至混濁，濁度數(shù)值就高。引起酒液混濁的原因有兩方面，一是細菌總數(shù)超標引起的生物性混濁，這種酒已不能飲用，另一種是由于啤酒在貯存過程中，酒的蛋白質(zhì)、多酚等物質(zhì)遇冷或氧化產(chǎn)生的混濁，冷混濁在啤酒恢復到室溫后可自行消失，這種混濁并不影響飲用，因此，建議消費者不要將酒冷藏的溫度過低，一般在10c15c即可。4、酒精度及原麥汁濃度：酒精度指酒液中酒精的百分含量，可用體積百分數(shù)或質(zhì)量百分數(shù)表示。原麥汁濃度是依據(jù)酒精度及啤酒中的真正濃度按

6、經(jīng)驗公式計算出的數(shù)值，用其來表述原料麥汁的多少。我們見到的標簽標注的10?；?1。等均是指酒的原麥汁濃度，它可讀為10度或11度，今年頒布的新國標則標記為10°P或11°Po原麥汁濃度與酒精度不是一回事，通常情況下，原麥汁濃度高則酒中含酒精也越多，我們常飲用的11。啤酒其酒精度在4.5%(V/V)左右。雖然啤酒中酒精含量較低，但是由于二氧化碳能促進酒精在人體內(nèi)吸收，因此一次大量飲用也會醉酒傷身。5、總酸：指啤酒發(fā)酵過程中產(chǎn)生的脂肪酸及其他有機酸的總量。啤酒中的酸包括揮發(fā)性及不揮發(fā)性的各種酸，如乙酸、低碳脂肪酸及乳酸等。適宜的總酸能賦予啤酒以柔和清爽的口感。如果總酸過高或酸味

7、明顯，則是污染了雜菌的標志，這樣的酒不宜飲用。6、雙乙酰：是在啤酒主發(fā)酵期間酵母代謝的產(chǎn)物，是啤酒口味不成熟的標志。如其含量超過風味閾值，會給啤酒帶來不愉快的便飯味，酵母菌種、原料和麥汁組成、發(fā)酵條件等均影響啤酒中雙乙酰的含量。由于其風味閾值比較低，對于優(yōu)質(zhì)淡色啤酒而言，雙乙酰含量在0.10m感官指標和理化指標表濃、黑國蛹的出脂標應符合表皿定項目1)11優(yōu)級1一綴EU11二轉1外現(xiàn)11無明顯懸浮物和沉淀物111詢顯沂淀物1泡11形態(tài)1111泡沫細扇，掛杯1泡沫較細感，掛杯111范濤較粗1沫1泡持性，S111|孑210|801|孑12。色度1濃色11I15.0_40.0EEC11黑色11|>

8、;40,0香氣和口味1V1具有明顯的麥若香都翅眼的愛邦1氣,口味純正？X1香氣，口味純正？1口，酒體蒂厚，柔1較爽口，殺口，1夠口，«tII1有麥芽香氣，口1口，1表2漆色啤酒的0!指標應符合表N的規(guī)定透明度I清亮透明，無明顯懸浮物和沉淀物尚清,校透明濁度.ERCIW2.0EBC泡持性1哂裝號I14"210180=1805.011.012010412°I5,0(5.011.0|5.0_14.0香氣和口味8。5.0_1N.OI具有明顯的酒花香1有潮眼的酒花I有酒花香氣，I氣，爽I口IieHEiE,相I口.港體諧調(diào).索【校爽口.諧調(diào).I味I和無異香.異味I無異香、異&

9、#174;IHII表3理化要求應符合表3砒癥項目1伏級I一級I二級_jt1總歐|18*16。W4.5|14DI<3.0mil00ml：1121F|<2.6|ior|爭化碳%,m/m|>_4|±0.38|>0.35雙ZSH淡色|&0.13|<0-15|<0,20m-L|濃色、黑色|<0,14|<0.16|<0,20I二、啤酒的衛(wèi)生標準按照：中華人民共和國國家標準GB2758-2012食品安全國家標準發(fā)酵酒及其配制酒1.1 原料要求應符合相應的標準和有關規(guī)定。1.2 感官要求應符合相應產(chǎn)品標準的有關規(guī)定。1.3 理化指標理化指

10、標應符合表1的規(guī)定。表1:項目指標檢驗方法甲醛/(mg/L)<2.0GB/T5009.491.4污染物和真菌毒素限量1.4.1污染物限量應符合GB2762的規(guī)定。表2:項目指標檢驗方法鉛&mg/Kg0.2GB5009.121.4.2真菌毒素限量應符合GB2761的規(guī)定。查閱后發(fā)現(xiàn)在啤酒中無真菌毒素限量1.5微生物限量微生物限量應符合表2的規(guī)定。表2:項目米樣方案及限量檢驗方法ncm沙門氏菌500/25mLGB/T4789.25金黃色葡萄球菌500/25mLa樣品的分析及處理按GB4789.1執(zhí)行。1 食品添加劑食品添加劑的使用應符合GB2760的規(guī)定。項目指標焦糖色按生產(chǎn)需要適量

11、使用納他霉素g/L0.01三氯蔗糖g/Kg0.65海藻酸內(nèi)一醇酯g/Kg0.3啤酒質(zhì)量指標檢測方法1、啤酒原麥汁濃度的測定比重瓶法GB4928-91啤酒試驗方法中第9條啤酒原麥汁濃度的試驗方法1.0 1范圍本方法采用比重瓶法測定啤酒的真正濃度結合采用其它方法所測得的啤酒灑精度通過計算獲得啤酒的原麥汁濃度本方法適用于各種類型啤酒中原麥汁濃度的測定以原麥汁含量的質(zhì)量百分數(shù)即m/m表示測定值保留一位小數(shù)(1) 原理啤酒經(jīng)加熱蒸發(fā)蒸去酒精后的殘液用水恢復至原重然后用比重瓶測定20時殘液的比重2020D經(jīng)查比重與浸出物含量對照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分數(shù)即為真正濃度啤酒的酒精度可用比重瓶測定法

12、或其它儀器分析方法測得原麥汁濃度則通過計算獲得(1) 儀器1. 瓷蒸發(fā)皿1. 高精度恒溫水浴20時精度為0.11. 附溫度計比重瓶25mL1. 感量為0.1mg的分析天平1. 試樣制備稱取100.0g酒樣于已知質(zhì)量的瓷蒸發(fā)皿中于沸水浴上蒸發(fā)至原體積的1/3取下冷卻加水恢復至殘液原重100.0g混勻備用1. 操作步驟比重瓶空重的測定將比重瓶洗凈干燥稱量反復操作直至恒量記錄比重瓶空重（m）比重瓶水重的測定將煮沸并冷卻至15左右的蒸儲水注滿已恒量的比重瓶插上帶溫度計的瓶塞瓶中應無氣泡立即浸于200.1的高精度恒溫水浴中彳寺內(nèi)容物溫度達到20，并保持1520min不變后用濾紙吸去溢出支管的水，立即蓋好

13、小帽取出比重瓶迅速擦干后稱量記錄比重瓶和水的質(zhì)量（m1）酒樣殘液比重的測定用酒樣殘液沖洗比重瓶23次然后裝滿此樣品按5.2同樣操作記錄比重瓶和酒樣殘液的質(zhì)量并計算酒樣殘液的比重2020D經(jīng)查比重與浸出物含量對照表即可得出試樣中浸出物含量的質(zhì)量百分數(shù)即真正濃度n結果計算1004-.4x1.0665式中X原麥汁濃度%m/mA酒精含量%m/mn真正濃度%m/m7精密度同一樣品的兩次測定值之差不得超過0.1%m/m2、啤酒酒精度的測定實驗原理：用小火將啤酒中的酒精蒸儲出來，收集儲出液。用密度瓶測定儲出液的密度，密度以相同溫度下，同體積的溶液和純水之間的質(zhì)量比來表示。根據(jù)密度-酒精度對照表，可查得酒精含

14、量。實驗儀器：電爐，調(diào)壓變壓器，鐵架臺，500mL園底燒瓶(錐形瓶)，冷凝管，100mL容量瓶，規(guī)格為25mL附有溫度計并具有磨口帽小支管的密度瓶(見圖)。實驗步驟:.樣品處理(1)在已精確稱重至0.05g的500mL三角燒瓶中，稱取100.0g除氣啤酒，再加50mL水,(2)按上冷凝器，冷凝器下端用一已知重量的100mL容量瓶或量筒接收儲出液。若室溫較高，為了防止酒精蒸發(fā)，可將容量瓶浸于冷水或冰水中。(3)開始蒸儲時用文火加熱，沸騰后可加強火力，蒸儲至儲出液接近100mL時停止加熱。(4)取下容量瓶，于普通天平上加蒸儲水至儲出液重100.0g,混勻。.儲出液密度的測定(1)空瓶稱重：將密度瓶

15、洗干凈后，吹干或低溫烘干(可用少量酒精或乙醛洗滌)，冷卻至室溫，精確稱重至0.1mg。(2)稱水重：將煮沸30分鐘并冷卻至1518c的蒸儲水裝滿密度瓶(注意瓶內(nèi)不要有氣飽)。裝上溫度計。立即浸入20±0.1C的恒溫水浴中，讓瓶內(nèi)溫度計在20c下保持20分鐘,取出密度瓶用濾紙吸去溢出支管外的水，立即蓋上小帽，室溫下平衡溫度后，擦干瓶壁上的水，精確稱重。(3)儲出液稱重：倒出蒸儲水，用少量儲出液洗滌后，加入冷卻至1519c的微出液，按(2)測得微出液重量。(4)密度計算：密度瓶和儲出液重一空瓶重儲出液密度=密度瓶和蒸儲水重一空瓶重.查密度和酒精對照表，求得酒精含量。3、啤酒濁度的檢測原理

16、：EBC濁度計是利用光學原理測定啤酒，由于老化或受冷而引起的混濁，可直接測定出樣品的濁度以EBC濁度單位表示。檢驗方法儀器濁度計濁度管操作按濁度計的儀器說明書，取除氣但未經(jīng)過過濾的酒樣(發(fā)酵液和冷麥汁須要過濾)倒入玻璃管中，用EBC蟲度計進行測定。直接讀取結果。所得結果應表示至一位小數(shù)4、啤酒總酸的測定實驗原理：根據(jù)酸堿中和原理。用氫氧化鈉標準溶液直接滴定啤酒中的總酸，以pH=8.2為電位滴定終點，根據(jù)消耗氫氧化鈉標準溶液的體積計算出啤酒中總酸的含量。實驗試劑0.1mol/LNaOH標準溶液實驗儀器酸度計、恒溫水浴鍋實驗步驟校正儀器：用標準緩沖溶液校正儀器，用水清洗儀器，并用濾紙吸干附著在電極

17、上的液珠。測量樣品：吸取除氣的樣品溶液50.0ml,于燒杯中。插入電極，開啟電磁攪拌器，用0.1mol/LNaOH標準溶液滴定至pH=8.2為其終點，記錄消耗NaOH準溶液的體積。消耗的NaOH標準溶液的體積記為VO困5、實驗計算樣品中的總酸量=2-C-VOh上式中：2一換算成100.0ml樣品的系數(shù)C一標準NaOH溶液的濃度ol消耗標準NaOH溶液的體積5、啤酒中雙乙酰的測定實驗原理雙乙酰(丁二酮)是賦予啤酒風味的重要物質(zhì)。但含量過大，能使啤酒有一種便飯味。輕工部部頒標推規(guī)定成品啤酒中雙乙酰含量v0.2Ppm。雙乙酰的測定方法有氣相色譜法、極譜法和比色法等等。鄰苯二胺比色法是連二酮類都能發(fā)生

18、顯色反應的方法，所以，此法測得之值為雙乙酰與戊二酮的總量，結果偏高。但此法快速簡便，是輕工部部頒標準規(guī)定的方法。用蒸汽將雙乙酰從樣品中蒸儲出來，加鄰苯二胺，形成2,3一二甲基唾喔琳，其鹽酸鹽在335nm波長下有一最大吸收峰，可進行定量測定。實驗儀器與試劑(1)紫外分光光度計。(2)雙乙酰蒸儲裝置雙乙酰蒸儲裝置示意圖1、夾套蒸儲器2、蒸汽發(fā)生器3、冷凝器4、25mL容量瓶(或量筒)5、加樣口6、電爐(1)4N鹽酸(2)1%鄰苯二胺精密稱取分析Z鄰苯二胺250.0mg,溶于4N鹽酸中，并定容至25mL,貯于棕色瓶中，限當日使用。(3)消泡劑有機硅消泡劑或甘油聚醛。實驗步驟(1)按上圖把雙乙酰蒸儲器

19、安裝好，把夾套蒸儲器下端的排氣夾子打開。(2)將內(nèi)裝2.5mL蒸儲水的容量瓶(或量筒)放于冷凝器下，使出口尖端浸沒在水面下，外加冰水冷卻。(3)加熱蒸汽發(fā)生器至沸，通汽加熱夾套，備用。(4)于100mL量筒中加入24滴消泡劑，再注入5c左右未除氣啤酒100mL。(5)待夾套蒸儲器下端冒大汽時，打開進樣口瓶塞，將啤酒迅速注入蒸儲器內(nèi)，再用約10mL蒸儲水沖洗量筒，同時倒入，迅速蓋好進樣口塞子，用水封口。(6)待夾套蒸儲器下端再次冒大汽時，將排氣夾子夾住，開始蒸儲，到儲出液接近25mL時取下容量瓶，用水定容至25mL,搖勻(蒸儲應在3分鐘內(nèi)完成)。(7)分別吸取儲出液10mL于兩支比色管中。一管作

20、為樣品管加入0.5mL鄰苯二胺溶液，另一管不加作空白，充分搖勻后，同時置于暗處放置2030分鐘，然后于樣品管中加2mL4N鹽酸溶液，于空白管中加2.5mL4N鹽酸溶掖，混勻。(8)在335nm波長處，用2cm比色皿以空白作對照測定樣品吸光度。(9)計算：雙乙酰(mg/L)=A335X1.2注意事項蒸儲時加入試樣要迅速，勿使雙乙酰損失。蒸儲要求在3分鐘內(nèi)完成。嚴格控制蒸汽量，勿使泡沫過高，被蒸汽帶走而導致蒸儲失敗。顯色反應在暗處進行，否則導致結果偏高。三、食品的衛(wèi)生指標檢測方法GB/T5009.49甲醛的測定1、甲醛的測定方法4.4甲醛原理中醛在過量乙酸鐵的存在下，與乙酰內(nèi)酮和氨離生成黃色的2.

21、6-二甲基-35二乙戢基】，4二氫毗咤化合物，在波長415nm處有蛉大吸收，在一定濃度范圍，其吸光度值與甲姓含量成正比，與標準系列比較定量.試劑<4.2.1乙酰丙酮（GH,O”），分析純.4.4.2.2乙酸餃GHyNO力：分析純.4.4.2.3乙酸（GH,COQ：分析純4.4.2.4甲醍（CH,O）：分析純4.4.2.5硫代硫般鈉（Na,工。5乩0）：基準物質(zhì)。442.6碘（Hi分析鈍4.4.2.7淀粉（C.T053指示劑4.4.2.8硫酸（H“SOJ：分析純.4.4.2.9氫氧化鈉（NaOH），分析純.4.4.2.10磷酸（HjPOJ,分析純。4.4.2.11乙酰丙能溶液：稱取新蒸慵乙

22、帙丙胴04g和乙酸鍍252乙酸3mL溶于水中，定容至200mL備用，用時配制.4.4.2.12甲酹：36%38%.4.4.2.13硫代硫酸鈉標準溶液（0.1000mol/L）,見GB/T5009.12003的第B.15章.4.4.2.14碘標準溶液（0.1mol/L3見GB/T5009.1-2003的第B.13章.<4.2.15淀粉指示劑（5g/L）：稱取0.5N可溶性淀粉,加入5mL水,攪勻后緩緩攸入100mL沸水中,隨加麗攪拌,底沸2min放冷,備用.此指示劑應臨用時現(xiàn)配.4.4.2.16硫酸溶液Qmd/L）,量取30mL硫酸,緩緩注入適量水中，冷卻至室溫后用水稀釋至1000mL,搖

23、勻.44.2.17氫氧化結溶液（Imol/L）：吸取56mL澄清的氫氣化的飽和溶液，加適尿斯煮沸過的冷水至1000mL.輜&1_4.4.2.18硝酸溶液（200g/L）：稱取20g磷酸，加水稀群至100mL,混勾.4.4.2.19甲酹標準溶液的配制和標定.吸取36%38%甲酸溶液7.0mL,加入1n0.5mL,用水稀釋至250mL.此液為標準溶液.吸取上述標準溶液10.0mL于100mL若水桶稀定容再吸10.0mL稀釋溶液于250mL硬量瓶中，加水90mL.O.1mol/L碘溶/1mcl/L氫氧化的15mL，插勻，放置15min.再加入1mol/L硫酸溶液20mL酸化，用0.1硫代破酸

24、的標準溶液滴定至淡黃色，然后加約5g/L淀粉指示劑1mL,繼續(xù)滴定至藍色捷2同時做試劑空白試驗甲醛標疵溶液的濃度按式（3）計算.X=（匕一匕）XcX15式中，X甲醍標準溶液的濃度，單位為亳克短塞開（mg/mL>sVi空白試驗所消耗的硫代硫酸的標準溶液的體積,單位為至升（mL八V,滴定甲醛溶液所消耗的硫代硫酸鈉標準溶液的體積,單位為亳升（eL）,硫代硫酸鈉標準溶液的濃度，單位為摩爾每升（mol/L）,15與1.000mol/L硫代硫酸鈉標準溶液1.0mL相當?shù)募兹┑馁|(zhì)融，單位為亳克（n用上述已標定甲酹濃度的溶液，用水配制成含甲解1XR/mL的甲酹標準使用液。4.4.3儀器<4.3.1

25、分光光度計。<4.3.2水蒸氣蒸餌裝置.4.<3.3500mL蒸飾瓶試樣業(yè)理銀取已除去二氧化碳的啤酒25eL移入500ibL塞蟠瓶中，加200f?/L硝酸溶液2。mL于蒸譚接水蒸氣蒸慵鍛置中蒸恒,收集慵出液于100mL容最瓶中（駒100mL）冷卻后加水稀弗至刻度.4.4.4.?測定精密吸取1M«/mL的甲醛標準溶液各0.00mL、650mL.1.00mL.2.00mL,3.00n4,00mL.8h00mL于25mL比色管中，加水至10eL.吸取樣品愉出液lamL移入25mL比色管中.標選系列和樣跖的比色管中，各加入乙瓶丙雨/2O1L,搖勻后在沸水浴中加熱10m括，取出冷卻

26、，于分光卷度計被長415nni處第定唳光度，繪制標P線.從標準曲線上交出試樣的含址.果計算試擇中甲戢的含量按式（外計算.vm,XosV（式中：X成樣中甲醛的含量，隼位為毫克每升（mWL）.游一從標準曲線上查出的相當?shù)募柞母顾?單位為微克印外；V測定樣液中相當?shù)脑嚇芋w模，單位為毫升（mU.計算結果保留兩5有效數(shù)字.2、鉛的測定方法GB5009.12-2010食品中鉛的測定：石墨爐原子吸收光譜法.1原理試樣經(jīng)灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度計石墨爐中，電熱原子化后吸收283.3nm共振線，在一定濃度范圍，其吸收值與鉛含量成正比，與標準系列比較定量。2試劑和材料除非另有規(guī)定，本方法所使用試劑均

27、為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。硝酸：優(yōu)級純。過硫酸俊。過氧化氫（30%）。高氯酸：優(yōu)級純。硝酸（1+1）：取50mL硝酸慢慢加入50mL水中。硝酸（0.5mol/L）：取3.2mL硝酸加入50mL水中，稀釋至100mL。硝酸（lmo1/L）：取6.4mL硝酸加入50mL水中，稀釋至100mL。磷酸二氫錢溶液（20g/L）：稱取2.0g磷酸二氫錢，以水溶解稀釋至100mL?；旌纤幔合跛崾呗人幔?+1）。取9份硝酸與1份高氯酸混合。鉛標準儲備液：準確稱取1.000g金屬鉛（99.99%）,分次加少量硝酸（4.5）,加熱溶解，總量不超過37mL,移入1000mL容量瓶，加水至刻度?；?/p>

28、勻。此溶液每毫升含1.0mg鉛。鉛標準使用液：每次吸取鉛標準儲備液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸（4.6）至刻度。如此經(jīng)多次稀釋成每毫升含10.0ng,20.0ng,40.0ng,60.0ng,80.0ng鉛的標準使用液。3儀器和設備原子吸收光譜儀，附石墨爐及鉛空心陰極燈。馬弗爐。天平：感量為1mg。干燥恒溫箱。瓷塔蝸。壓力消解器、壓力消解罐或壓力溶彈。可調(diào)式電熱板、可調(diào)式電爐。.4分析步驟A試樣預處理在采樣和制備過程中，應注意不使試樣污染。糧食、豆類去雜物后，磨碎，過20目篩，儲于塑料瓶中，保存?zhèn)溆谩Ｊ卟?、水果、魚類、肉類及蛋類等水分含量高的鮮樣，用食品加工機或勻漿機打成勻漿，儲于塑

29、料瓶中，保存?zhèn)溆谩試樣消解（可根據(jù)實驗室條件選用以下任何一種方法消解）壓力消解罐消解法：稱取1g2g試樣（精確到0.001g,干樣、含脂肪高白試樣v1g,鮮樣v2g或按壓力消解罐使用說明書稱取試樣）于聚四氟乙烯內(nèi)罐，加硝酸2mlr-4mL浸泡過夜。再加過氧化氫2mL3mL（總量不能超過罐容積的1/3）。蓋好內(nèi)蓋，旋緊不銹鋼外套，放入恒溫干燥箱，120C140C保持3h4h,在箱內(nèi)自然冷卻至室溫，用滴管將消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時作試劑空白。干法灰化：稱取1g5g試樣（精確到0.001

30、g,根據(jù)鉛含量而定）于瓷塔期中，先小火在可調(diào)式電熱板上炭化至無煙，移入馬弗爐500c±25C灰化6h8h,冷卻。若個別試樣灰化不徹底，則加1mL混合酸在可調(diào)式電爐上小火加熱，反復多次直到消化完全，放冷，用硝酸將灰分溶解，用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10mL-25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌瓷塔期，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時作試劑空白。過硫酸鏤灰化法：稱取1g5g試樣（精確到0.001g）于瓷塔期中，加2mL4mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷卻后加2.00g3.00g過硫酸鏤蓋于上面，繼續(xù)炭化至不冒煙，轉入馬弗爐，500C±

31、;25C恒溫2h,再升至800C,保持20min,冷卻，加2mL3mL硝酸，用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌瓷塔期，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時作試劑空白。濕式消解法：稱取試樣1g5g（精確到0.001g）于錐形瓶或高腳燒杯中，放數(shù)粒玻璃珠，加10mL混合酸，加蓋浸泡過夜，加一小漏斗于電爐上消解，若變棕黑色，再加混合酸，直至冒白煙，消化液呈無色透明或略帶黃色，放冷，用滴管將試樣消化液洗入或過濾入（視消化后試樣的鹽分而定）10mL25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌錐形瓶或高腳燒杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，

32、混勻備用；同時作試劑空白。5測定A儀器條件根據(jù)各自儀器性能調(diào)至最佳狀態(tài)。參考條件為波長283.3nm,狹縫0.2nm1.0nm,燈電流5mA-7mA干燥溫度120C,20s；灰化溫度450C,持續(xù)15s20s,原子化溫度：1700C2300C,持續(xù)4s5s,背景校正為笊燈或塞曼效應。B標準曲線繪制吸取上面配制的鉛標準使用液10.0ng/mL（或科g/L）,20.0ng/mL（或科g/L）,40.0ng/mL（或g/L）,60.0ng/mL（或科g/L）,80.0ng/mL（或g/L）各10科L,注入石墨爐，測得其吸光值并求得吸光值與濃度關系的一元線性回歸方程。C試樣測定分別吸取樣液和試劑空白液

33、各10L,注入石墨爐，測得其吸光值，代入標準系列的一元線性回歸方程中求得樣液中鉛含量。D基體改進劑的使用對有干擾試樣，則注入適量的基體改進劑磷酸二氫錢溶液（一般為5科L或與試樣同量）消除干擾。繪制鉛標準曲線時也要加入與試樣測定時等量的基體改進劑磷酸二氫錢溶液。6分析結果的表述試樣中鉛含量按式進行計算：X=（C1-C0）V1000m10001000式中：X試樣中鉛含量，單位為毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/L）;c1測定樣液中鉛含量，單位為納克每毫升（ng/mL）;C0空白液中鉛含量，單位為納克每毫升（ng/mL）;V試樣消化液定量總體積，單位為毫升（mD;m試樣質(zhì)量或體積，單位為克或毫

34、升（g或mD。以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留兩位有效數(shù)字。3、沙門氏菌的檢驗GB/T4789.25沙門氏菌檢驗。A前增菌稱取25g（ml.）樣品放入盛有225mLBPW的無菌均質(zhì)杯中，以8000r/min10000r/min均質(zhì)1min2min,或置于盛有225mLBPW的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min。若樣品為液態(tài)，不需要均質(zhì)，振蕩混勻。如需測定pH值，用1mol/mL無菌NaOH或HCl調(diào)pH至6.8±0.2。無菌操作將樣品轉至500mL錐形瓶中，如使用均質(zhì)袋，可直接進行培養(yǎng)，于36±1C培養(yǎng)8h18h。如為冷凍產(chǎn)品，應

35、在45C以下不超過15min,或2C5C不超過18h解凍。B增菌輕輕搖動培養(yǎng)過的樣品混合物，移取1mL,轉種于10mLTTB內(nèi)，于42C±1C培養(yǎng)18h24h。同時，另取1mL,轉種于10mLSC內(nèi)，于36±1C培養(yǎng)18h24h。C分離分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán)，劃線接種于一個BS瓊脂平板和一個XLD瓊脂平板（或HE瓊脂平板或沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）。于36c±1C分別培養(yǎng)18h24h（XLD瓊脂平板、HE瓊脂平板、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板）或40h48h（BS瓊脂平板），觀察各個平板上生長的菌落，各個平板上的菌落特征見表5。表5沙門氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的

36、菌落特征選擇性瓊脂平板沙門氏菌BS瓊脂菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變。HE瓊脂藍綠色或藍色，多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色；有些菌株為黃色，中心黑色或幾乎全黑色.XLD瓊脂菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落；后些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。沙門氏菌屬顯色培加基按照顯色培養(yǎng)基的說明進行判定D生化試驗自選擇性瓊脂平板上分別挑取2個以上典型或可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂，先在斜面劃線，再于底層穿刺；接種針不要滅菌，直接接種賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基和營養(yǎng)瓊脂平板，于36C&#

37、177;1C培養(yǎng)18h24h,必要時可延長至48h。在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基內(nèi)，沙門氏菌屬的反應結果見表6。表6沙門氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基內(nèi)的反應結果三糖鐵瓊脂賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基初步判斷斜面底層產(chǎn)氣硫化氫KA十（一）十（一）十可疑沙門氏菌屬KA十（一）十（一）一可疑沙門氏菌屬AA十（一）十（一）十可疑沙門氏菌屬AA+/一+/一一非沙門氏菌KK+/一+/一+/一非沙門氏菌注：K：產(chǎn)堿，A產(chǎn)酸；+:陽性，一：陰性；+（一）:多數(shù)陽性，少數(shù)陰性；+/:陽性或陰性。接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫竣酶試驗培養(yǎng)基的同時，可直接接種蛋白月東水（供做靛基質(zhì)試驗）、尿素瓊脂（pH7

38、.2）、氧化鉀（KCN培養(yǎng)基，也可在初步判斷結果后從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落接種。于36c±1C培養(yǎng)18h24h,必要時可延長至48h,按表7判定結果。將已挑菌落的平板儲存于2c5C或室溫至少保留24h,以備必要時復查。表7沙門氏菌屬生化反應初步鑒別表反應序號硫化氫（H2S）靛基質(zhì)pH7.2尿素氧化鉀賴氨酸脫竣酶A1十一一一十A2+十一一十A3一一一一+/一注：+陽性；一陰性；+/陽性或陰性。反應序號A1:典型反應判定為沙門氏菌屬。如尿素、KCN和賴氨酸脫竣酶3項中有1項異常，按表8可判定為沙門氏菌。如有2項異常為非沙門氏菌。表8沙門氏菌屬生化反應初步鑒別表pH7.2尿素氧化鉀（K

39、CN賴氨酸脫竣酶判定結果一一一甲型副傷寒沙門氏菌（要求血清學鑒定結果）一十十沙門氏菌IV或V（要求符合本群生化特性）十一十沙門氏菌個別變體（要求血清學鑒定結果）注：+表示陽性；+表示陰性。反應序號A2:補做甘露醇和山梨醇試驗，沙門氏菌靛基質(zhì)陽性變體兩項試驗結果均為陽性，但需要結合血清學鑒定結果進行判定。反應序號A3:補做ONPGONPG陰性為沙門氏菌，同時賴氨酸脫竣酶陽性,甲型副傷寒沙門氏菌為賴氨酸脫竣酶陰性。如選擇生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)，可根據(jù)初步判斷結果，從營養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落，用生理鹽水制備成濁度適當?shù)木鷳乙?，使用生化鑒定試劑盒或全自動微生物生化鑒定系統(tǒng)進行鑒定。

40、E血清學鑒定抗原的準備：一般采用1.2%1.5%瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗用的抗原。O血清不凝集時，將菌株接種在瓊脂量較高的（如2%3%）培養(yǎng)基上再檢查；如果是由于Vi抗原的存在而阻止了O凝集反應時，可挑取菌苔于1mL生理鹽水中做成濃菌液，于酒精燈火焰上煮沸后再檢查。H抗原發(fā)育不良時，將菌株接種在0.55%-0.65%半固體瓊脂平板的中央，俟菌落蔓延生長時，在其邊緣部分取菌檢查；或?qū)⒕晖ㄟ^裝有0.3%0.4%半固體瓊脂的小玻管1次2次，自遠端取菌培養(yǎng)后再檢查。多價菌體抗原（O）鑒定：在玻片上劃出2個約1cmX2cm的區(qū)域，挑取1環(huán)待測菌，各放1/2環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上部，在其中一個區(qū)域下部

41、加1滴多價菌體（O）抗血清，在另一區(qū)域下部加入1滴生理鹽水，作為對照。再用無菌的接種環(huán)或針分別將兩個區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動混合1min,并對著黑暗背景進行觀察，任何程度的凝集現(xiàn)象皆為陽性反應。多價鞭毛抗原（H）鑒定：同多價菌體抗原（。鑒定。F結果與報告綜合以上生化試驗和血清學鑒定的結果，報告25g（mD樣品中檢出或未檢出沙門氏菌4、金黃色葡萄球菌的檢驗GB/T4789.10金黃色葡萄球菌檢驗。A樣品的處理稱取25g樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min10000r/min均質(zhì)1min2min,或放入盛有225mL7

42、.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min2min。若樣品為液態(tài)，吸取25mL樣品至盛有225mL7.5%氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)可預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠）中，振蕩混勻。B增菌和分離培養(yǎng)將上述樣品勻液于36C±1C培養(yǎng)18h24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長，污染嚴重時在10%氯化鈉胰酪月東大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長。將上述培養(yǎng)物，分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板，血平板36±1C培養(yǎng)18h24h。Baird-Parker平板36C±1C培養(yǎng)18h24

43、h或45h48h。金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直徑為2mm-3mm,顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落有似奶油至樹膠樣的硬度，偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈。長期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些，外觀可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落較大，圓形、光滑凸起、濕潤、金黃色（有時為白色），菌落周圍可見完全透明溶血圈。挑取上述菌落進行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。C鑒定染色鏡檢：金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性球菌，排列呈葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，直徑約為0.5m-1ni血漿凝固酶試

44、驗：挑取、Baird-Parker平板或血平板上可疑菌落1個或以上，分別接種到5mLBHI和營養(yǎng)瓊脂小斜面，36±1C培養(yǎng)18h24h。取新鮮配置兔血漿0.5mL,放入小試管中，再加入BHI培養(yǎng)物0.2mL0.3mL,振蕩搖勻，置36C±1C溫箱或水浴箱內(nèi)，每半小時觀察一次，觀察6h,如呈現(xiàn)凝固（即將試管傾斜或倒置時，呈現(xiàn)凝塊）或凝固體積大于原體積的一半，被判定為陽性結果。同時以血漿凝固酶試驗陽性和陰性葡萄球菌菌株的肉湯培養(yǎng)物作為對照。也可用商品化的試劑，按說明書操作，進行血漿凝固酶試驗。結果如可疑，挑取營養(yǎng)瓊脂小斜面的菌落到5mLBHI,36C±1C培養(yǎng)18h4

45、8h,重復試驗。D葡萄球菌腸毒素的檢驗可疑食物中毒樣品或產(chǎn)生葡萄球菌腸毒素的金黃色葡萄球菌菌株的鑒定，應按附錄B僉測葡萄球菌腸毒素。E結果與報告結果判定：符合上述鑒定，可判定為金黃色葡萄球菌。結果報告：在25g（ml.）樣品中檢出或未檢出金黃色葡萄球菌。5、納他霉素的測定GBT21915-2008食品中納他霉素的測定液相色譜法本標準規(guī)定了食品中納他霉素的液相色譜測定方法.本標準適用于食品中納他霄素的測定.本標準定量檢出限為0.5mg/kg（固體和半固體樣品）,0.5mg/L（液體樣品）.2原理樣品經(jīng)甲醇提取,采用加水冷凍去除樣品中的脂肪成分或離心的方式凈化，反相液相色譜-紫外檢測器測定,外標法

46、定量.3試劑和材料水去離子水或相當純度的水.甲靜:分析純、色譜純.3納他霉索（natamycin）1純度295%.標準儲備液：準確稱取適量的納他霍素標準品（精確至0.1mg）,用甲醇溶解，配成濃度為100Rg/mL的標準儲備液.冰乙酸:優(yōu)級純.0.45Dm、0.22'm針頭式過濾器（水性）.4儀舞高效液相色譜儀:配紫外檢測器.超聲波清洗器.電子天平:感量0.1mg.注射器,一次性,10mL.漏斗:直徑大約7cm.冰箱：-20C-15,C.<7離心機.5樣品制備s2果汗飲料棒品掂地量取果汁飲料祥晶】0.匚mL,加入30mL用尊招料崔取30;而提取液依次過0,45um和5*re升頭式

47、近湮器.收集濾液妁2nL上機副定.柳汁祥晶回收率圖參見圖A.6.5色調(diào)規(guī)定61色翳柱iC,”柱凈Mn3tSmmXlSQmm（或相當暨號色港柱兀6.2海勃相r甲辭一水+乙酸/G+E+5）.6.3漉速工0niL/min.6.4根靄眨袋：制5f.5,5薩祥信JQ產(chǎn)L.><安式口）開算而體、于|噌購（乳酪、我點、火褪J14國2申納他海素電量，按式（2）計算液體樣品中型他霜素的含XVXI000式中rX一就祥中£由吊準y一樣品麻Q%體積，單力為毒#向二、二弟：|m_祥品為克計算結果保&則用效數(shù)字.l3V.jx試樣中解套黑的含置：單位為微克年睪q-6g/mL）；：/£

48、市桁花曲線時圖產(chǎn)品溶步中納他毒素的含再,單位為微克每型開4.nlj；%樣品溶液上賽長,單傍!為享手/稼!/匕一樣品量取悔奘卷曾某mLJ.，/計算結果保留三位癡炊家/6、焦糖色的測定GB8817-2001食品添加劑-焦糖色的測定4試峽方法法驗中所用試劑和儀器設備除特別注明外，均采用分析純試劑、蒸憎水或去離干水及實驗室常用儀器設備.4.1感官檢腺4JJ色澤和外觀形態(tài)將樣品（液狀、.粉狀）分別吸入或倒入無色玻璃燒杯中，觀察其色澤和外觀形狀。4L2氣味泗樣品腌釋成5g/L-20口/L的水溶液，嗔其氣味"4.1.3澄明度將樣品稀釋成2r/L-4e/L的水搟液,普人50aL比色管中，在明亮處由上

49、到下觀痕&42吸光度的測定稱取樣品0.3孤精確至。,O02g）,用水定容于500mL容鼠根中,用1cm出色UL,在610nm處用分光光度計測定其吸光度.4.3干廉失章的測定43.1測定方詼用已恒重過的歙量瓶稱取樣品2妙準確至&0002g）,于1加C干爆2人冷卻，稱重°4.32分析結果的表述式中：出干蝶失重,%:此一“拱干前稱童版和樣品的質(zhì)量，J的1一雄干后稱2瓶和樣品的質(zhì)置噌;M樣品版量日7、三氯蔗糖的測定GBT22255-2008食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定試樣的制備'-低曲,無謂及非青色類試樣的制備1.11準確稱取均勻試樣】其精】。.0。1g）,置于5QmL的離心管中，加入5mL蒸愉水.漩濟振蕩器上振蕩3min后加入15mL甲薛，繼續(xù)振蕩30的超聲波提取2。min后，以3000r/min離心5而n,仔期將上清液移入50mL玻璃蒸發(fā)皿內(nèi).