血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏分析

血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏分析摘要]目的對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏進(jìn)行分析。方法研究我院收治的發(fā)熱合并全身感染患者86例，在專用接種水中混摻患者的血培養(yǎng)標(biāo)本，并在鑒定板上接種，通過直接法鑒定，同時把陽性標(biāo)本轉(zhuǎn)種平板進(jìn)行分離培養(yǎng)，根據(jù)常規(guī)法對分純后的菌落實(shí)施上機(jī)鑒定及藥敏實(shí)驗(yàn)，然后進(jìn)行對比。結(jié)果在86例樣品當(dāng)中，直接法和常規(guī)法符合率：細(xì)菌鑒定總符合率為96.4%，其中革蘭陰性菌95.8%，革蘭陽性球菌97.1%；兩種方法的細(xì)菌結(jié)果均有著較高的準(zhǔn)確率，細(xì)菌鑒定準(zhǔn)確率在95.7%以上。結(jié)論血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驕?zhǔn)確的早期診斷菌血癥患者，值得推廣。

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關(guān)鍵詞 ]血培養(yǎng)；陽性標(biāo)本；細(xì)菌鑒定；藥敏實(shí)驗(yàn)

[中圖分類號]R446[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1672-5654（2024）05（c）-0001-02

Directbacterialidentificationandsusceptibilityanalysisofpositivebloodculturespecimens

LIYan

DepartmentofDonggangRizhaoCityDistrictPeople´sHospital，Rizhao276800,China

[Abstract]ObjectiveDirectlyonpositivebloodculturespecimenswereanalyzedbacterialidentificationandsusceptibility.MethodsFevercombinedstudyofsystemicinfectioninourhospital86patientsvaccinatedinspecialwaterblendingbloodculturespecimensofpatients,andintheidentificationofinoculationplate,identifiedbythedirectmethod,whilethetransferofpositivesampleswereisolatedandculturedspeciestablet,accordingtoconventionalActonthecoloniesaftertheimplementationofapuremachineidentificationandsusceptibilitytesting,andthencompared.ResultsIn86samples,methodfortheidentificationofsusceptibilitydirectlywiththerateof96.4%,thetestresultsofP[Keywords]Bloodculture;Positivesamples;Dentificationofbacteria;Drugsensitivitytest

在現(xiàn)代臨床當(dāng)中，細(xì)菌感染屬于常見的感染疾病，有著很高的發(fā)病與死亡率，對患者的日常生活造成了嚴(yán)重影響。作為微生物檢驗(yàn)當(dāng)中的重要部分，血培養(yǎng)有利于臨床上對病原菌與對抗菌藥物敏感性等進(jìn)行及早明確，使診斷疾病的時間得到縮短，并使臨床療效得到提高[1]。為了對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用價值進(jìn)行分析，本研究回顧分析了我院收治的86例發(fā)熱合并細(xì)菌感染患者的臨床資料，具體如下。

1資料與方法

1.1一般資料

資料源自2024年1月—2024年1月我院收治的發(fā)熱合并全身感染患者86例，男50例，女36例，年齡在8~82歲之間，平均年齡為（46.7±8.2）歲。

1.2檢測儀器與試劑

全自動血培養(yǎng)儀采用BACTEC9120型，血培養(yǎng)瓶為標(biāo)準(zhǔn)樹脂型，以上均由BD公司（美國）提供；采用DadeBehring公司（美國）提供的全自動微生物分析儀（MicroScanWA96）、G-菌鑒定與G+菌鑒定及藥敏復(fù)合板。運(yùn)用OXOID公司提供的巧克力平板、分離用血平板以及中國藍(lán)平板。質(zhì)控菌株：ATCC25923（金黃色葡萄球菌）、ATCC25922（大腸埃希菌）和ATCC27853（銅綠假單胞菌）。

1.3鑒定與實(shí)驗(yàn)方式

1.3.1直接細(xì)菌鑒定法在BACTEC9120陽性報警之后，把陽性瓶取出。抽取培養(yǎng)液5mL（運(yùn)用一次性注射器）并注入到試管（帶有分離膠）中，把離心機(jī)中3000rpm放置離心15min，可將其分成黃色血漿、灰白色細(xì)菌、透明分離膠和紅色血球等4層。對上清血漿運(yùn)用加樣槍吸棄，對分離膠上層的可以通過肉眼看到的灰白色菌液沉淀進(jìn)行收集，由于在離心試管時角度會傾斜，會導(dǎo)致菌液在離心后向試管一側(cè)集中，通過加樣槍把灰白色菌液吸取出來，并放入到1.5mL的無菌管當(dāng)中。如操作當(dāng)中對分離膠進(jìn)行了接觸，可通過無菌生理鹽水對混有分離膠的菌液進(jìn)行洗滌，之后再進(jìn)行離心，接著再用加樣槍把灰白色菌液吸取出來。此方式可多次反復(fù)，以保證不會有分離膠存于菌液中。與此同時，對菌液實(shí)施革蘭染色涂片，并對比陽性血培養(yǎng)液直接涂片革蘭染色結(jié)果，以對相應(yīng)鑒定卡進(jìn)行選擇。沉淀菌液通過無菌鹽水0.45%制作成0.50~0.63麥?zhǔn)蠞岫戎苯咏臃N對應(yīng)的鑒定卡以及藥敏卡實(shí)施上機(jī)實(shí)驗(yàn)。

1.3.2常規(guī)檢測在BACTEC9120陽性報警之后，把陽性瓶取出。對0.2mL培養(yǎng)液通過一次性注射器無菌抽取并接種于巧克力平板、分離用血平板以及中國藍(lán)平板上。在35℃的溫度中培養(yǎng)18~24h，在生成菌落之后實(shí)施革蘭染色，在用相應(yīng)的鑒定卡以及藥敏卡實(shí)施上機(jī)實(shí)驗(yàn)。

1.4統(tǒng)計學(xué)方式

通過spss15.0軟件對以上數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，以χ2檢驗(yàn)計數(shù)資料比較，P＜0.05說明具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩種方式鑒定藥敏結(jié)果符合率

在86份血培養(yǎng)陽性標(biāo)本當(dāng)中，有83株細(xì)菌是常規(guī)法鑒定出的，其中48株為革蘭陰性桿菌，35株為革蘭陽性球菌，另3株是兩種方式都無法鑒定出來的細(xì)菌。兩種方法達(dá)到了96.4%的細(xì)菌鑒定總一致率（77/83），其中革蘭陰性桿菌為95.8%（46/48）的一致率、革蘭陽性球菌為97.1%（34/35）的一致率。見表1。

2.2兩種檢測方式細(xì)菌鑒定結(jié)果準(zhǔn)確率

把86株細(xì)菌藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對比，兩種方法的細(xì)菌結(jié)果均有著較高的準(zhǔn)確率，細(xì)菌鑒定準(zhǔn)確率在95.7%以上。見表2。

3討論

臨床上在診斷與治療敗血癥和菌血癥上，血培養(yǎng)是關(guān)鍵所在。盡管許多醫(yī)院都通過全自動血培養(yǎng)系統(tǒng)來使血培養(yǎng)陽性率得到提高，然而如何快速準(zhǔn)確的菌種鑒定以及藥敏實(shí)驗(yàn)血培養(yǎng)標(biāo)本，是相關(guān)部門需要解決的課題。

依照常規(guī)方式對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本實(shí)施細(xì)菌鑒定以及藥敏實(shí)驗(yàn)，通常要花費(fèi)2~3d的時間。對病原菌進(jìn)行明確，并早診斷和早治療是成功治療菌血癥的關(guān)鍵。本研究通過直接法對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本實(shí)施細(xì)菌鑒定以及藥敏實(shí)驗(yàn)，把常規(guī)分離的培養(yǎng)步驟有效省去，藥敏結(jié)果可提前24h獲得[4]，并且在對86例血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌鑒定結(jié)果上，相比傳統(tǒng)方式均達(dá)到了96.4%的藥敏鑒定總一致率（80/83），其中革蘭陰性桿菌為95.8%（46/48）的一致率、革蘭陽性球菌為97.1%（34/35）的一致率，同時，在藥敏實(shí)驗(yàn)符合率上，兩種檢測方式的符合率也均在96.4%以上，這與相關(guān)文獻(xiàn)[5-6]所報道的總一致率86.7%的結(jié)果要高，這可能和細(xì)菌自身對培養(yǎng)環(huán)境有著較高要求，在鑒定板當(dāng)中緩慢生長抑或生長不充分有著一定關(guān)系；同時血培養(yǎng)液當(dāng)中少量血液細(xì)胞以及纖維成分也會對測試板的生化反應(yīng)結(jié)果造成影響。對于菌種鑒定結(jié)果來說，臨床醫(yī)生更相對藥敏結(jié)果。本研究在對血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌鑒定一致性進(jìn)行比較的同時，還對兩種方式的藥敏檢測結(jié)果準(zhǔn)確率做了對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者的準(zhǔn)確率達(dá)到了97.1%。根據(jù)相應(yīng)要求，一種新方式的建立要和參考方式作對比，準(zhǔn)確率要在90%以上。結(jié)果證實(shí)采用直接法藥敏試驗(yàn)陽性血培養(yǎng)標(biāo)本，檢測結(jié)果較為滿意。

在細(xì)菌檢測以及藥敏試驗(yàn)血培養(yǎng)陽性標(biāo)本時，相比常規(guī)法，直接法的診斷符合率與之差異不顯著，而血培養(yǎng)陽性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)?zāi)軌驕?zhǔn)確的早期診斷菌血癥患者，值得推廣。

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參考文獻(xiàn)]

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[6]劉