血液質(zhì)量控制檢查方法

血液質(zhì)量控制檢查方法F.1外觀F.1.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查F.2標(biāo)簽F.2.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查F.3容量F.3.1檢查方法F.3.1.1稱(chēng)量血袋重量F.3.1.2計(jì)算公式血液容量(mL)=血袋質(zhì)量(g)-空袋質(zhì)量(g)

血液密度(g血液容量(mL)=注：如果適用，還應(yīng)減去抗凝劑容量。F.4無(wú)菌試驗(yàn)F.4.1檢測(cè)方法無(wú)菌試驗(yàn)方法遵從中華人民共和國(guó)藥典(2010年版)三部“無(wú)菌檢查法”要求。使用細(xì)菌培養(yǎng)儀進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.4.2注意事項(xiàng)留取血液樣本前，應(yīng)當(dāng)將血袋中的血液充分混勻，混勻時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，不能產(chǎn)生泡沫，也不能使其溶血。F.5Hb測(cè)定檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)〃血紅蛋白測(cè)定”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.6游離Hb測(cè)定檢測(cè)方法參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程:》第3版)〃血漿游離紅蛋白測(cè)定”F.7血細(xì)胞比容檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)"紅細(xì)胞比容”。使用血細(xì)胞計(jì)

數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.8儲(chǔ)存期末溶血率F.8.1檢測(cè)方法在血液儲(chǔ)存期的最后一周內(nèi)取樣，按F.5、F.6和F.7測(cè)定總血紅蛋白、上清游離血紅蛋白、血細(xì)胞比容。F.8.2計(jì)算公式溶血率（%）=X100%（1溶血率（%）=X100%F.9白細(xì)胞殘留量F.9.1檢測(cè)方法用留取的去白細(xì)胞血液標(biāo)本進(jìn)行殘余白細(xì)胞檢測(cè)。材料：大容量Nageotte血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)、顯微鏡、結(jié)晶紫染色液。結(jié)晶紫染色液配制儲(chǔ)存液配制：250mg結(jié)晶紫溶于250mL的50%醋酸溶液中。室溫放置可保存6個(gè)月。使用液配制：1份儲(chǔ)存液加9份3%的醋酸溶液，最終濃度為：結(jié)晶紫0.01mg%（W/V）,醋酸7.7%（V/V）。然后使用0.22p過(guò)濾器過(guò)濾。計(jì)數(shù)方法：50皿血液標(biāo)本加入450Ml使用液中，充分混勻。在Nageotte計(jì)數(shù)池中加入上述混合液，將計(jì)數(shù)池置于帶蓋潮濕容器中，于室溫放置10~15分鐘。在200倍顯微鏡下對(duì)計(jì)數(shù)池中兩個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)（每區(qū)有20個(gè)長(zhǎng)方形格）的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，40行相當(dāng)于50plo計(jì)算：（I區(qū)白細(xì)胞計(jì)數(shù)值+2區(qū)白細(xì)胞計(jì)數(shù)值）X10白細(xì)胞數(shù) —1 Nageotte計(jì)數(shù)盤(pán)公式中：10為稀釋倍數(shù)，50m為計(jì)數(shù)池2個(gè)區(qū)的容積每袋中殘余白細(xì)胞數(shù)按下列公式計(jì)算：殘余白細(xì)胞數(shù)/袋=白細(xì)胞數(shù)/mLx去白細(xì)胞血液容量（mL）/袋或使用其它經(jīng)驗(yàn)證可使用的方法。F.10紅細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）〃紅細(xì)胞計(jì)數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.11血小板計(jì)數(shù)檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）〃血小板計(jì)數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.12血漿蛋白測(cè)定檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版“血清總蛋白的測(cè)定”。F.13上清液蛋白含量檢測(cè)方法參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版“腦脊液總蛋白測(cè)定”。F.14pH測(cè)定F.14.1測(cè)定方法測(cè)定方法見(jiàn)《中華人民共和國(guó)藥典（2010年版）三部附錄’PH值測(cè)定法”。F.14.2注意事項(xiàng)使用國(guó)家計(jì)量部門(mén)檢定合格的pH儀。樣品從血袋中移出后應(yīng)立即進(jìn)行檢測(cè)，以防標(biāo)本在空氣中暴露時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而CO2逸出，導(dǎo)致pH測(cè)定值比實(shí)際值偏高。F.15VIII因子活性測(cè)定測(cè)定方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版“凝血因子V皿的活性測(cè)定（一期法）〃。使用血凝儀測(cè)定時(shí)參照廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.16纖維蛋白原測(cè)定測(cè)定方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版“血漿纖維蛋白原含量測(cè)定〃使用血凝儀測(cè)定應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明書(shū)。根據(jù)冷沉淀的容量計(jì)算出每袋纖維蛋白原含量。F.17甘油殘留量F.17.1過(guò)碘酸鈉法原理：根據(jù)過(guò)碘酸鈉能氧化有機(jī)化合物中的羥基、胺基，使甘油氧化成酸和醛，以漠甲酚紫作指示劑；并用氫氧化鈉進(jìn)行滴定。從消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)，即可算出樣品中所含甘油的量。試劑：16.5%鎢酸鈉溶液：稱(chēng)取16.5克鎢酸鈉，用蒸餾水溶解，再加蒸餾水稀釋至100mL。0.5mol/LH2SO4:吸30mL濃硫酸緩緩注入水中，令卻至室溫，加水稀釋至1000mL。0.1mol/LNaOH：配制方法見(jiàn)《中華人民共和國(guó)藥典（2010年版）二部附錄’滴定液〃0.1%漠甲酚紫溶液：0.1g漠甲酚紫溶入20mL0.02mol/LNaOH溶液中，再加入蒸餾水稀釋至100mL。14%過(guò)碘酸鈉：14g過(guò)碘酸鈉先加入少量蒸餾水中溶解，加入2mL濃硫酸使其完全溶解，用蒸餾水稀釋至100mL。操作方法：按下表操作步驟制備血濾液血濾液制備試劑mL備注測(cè)定樣品15.0蒸餾水75.016.5%Na2WO46.00.5mol/LH2SO47.5用力振搖，進(jìn)行過(guò)濾注：實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)在三角燒瓶中進(jìn)行分析測(cè)定的步驟如下表:試劑空白(mL)樣品（mL）備注過(guò)濾后的上清液蒸餾水0.1%漠甲酚紫溶液100.010.015100.010.02滴0.1mol/LNaOH溶液14%過(guò)碘酸鈉38。。恒溫0.1%漠甲酚紫溶液0.1mol/LNaOH溶液滴定至藍(lán)色15分鐘2滴滴定至藍(lán)色計(jì)算：甘油含量（g/ml）=NaOHml數(shù)（樣品-空白）x0.0921乂滴定N^°H濃度；血濾液ml數(shù)x'。危0.1 150.1mol/LNaOH溶液相當(dāng)于0.00921g甘油F.17.2滲透壓測(cè)定法正常血清的滲克分子濃度為289mmol（289mOsm）,甘油含量為1%（10g/L）時(shí)，其滲克分子濃度為420mmol（420mOsm），因此滲透壓測(cè)定法可作為一種檢測(cè)去甘油紅細(xì)胞甘油殘存量的參考方法，操作方法應(yīng)參照滲透壓儀器生產(chǎn)廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.17.3折射儀測(cè)定法使用折射儀是測(cè)定滲克分子濃度的一種篩選方法。折射儀讀數(shù)到28（如折射儀型號(hào)為10401，折射指數(shù)或比S<1.3384T.S.）與甘油水平不高于1%（90g/L）相關(guān)。折射儀測(cè)定法可作為一種檢測(cè)甘油含量的參考方法。方法見(jiàn)生產(chǎn)廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.17.4由于不同方法的準(zhǔn)確性和精密度存在差異，可根據(jù)要求選擇以上相應(yīng)方法或其它方法（如：GPO-PAP二步法）。若采用商品化試劑盒，操作應(yīng)按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。F.18中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)方法見(jiàn)《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版）〃白細(xì)胞計(jì)數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.19亞甲藍(lán)殘留量F.19.1測(cè)試樣品準(zhǔn)備取3mLWatersOasis小柱，置于真空萃取裝置上，用6mL甲醇活化，加入6mL供試血漿，萃取亞甲藍(lán)；用30%甲醇6mL清洗，隨后用含1%乙酸的甲醇溶液2mL洗脫，洗脫液離心(3500rpm/10min),取上清液作為樣品溶液。F.19.2標(biāo)準(zhǔn)品的制備取亞甲藍(lán)粉末約38mg，精密稱(chēng)定，置100mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。精密量取50pl置50mL容量瓶中，用血漿稀釋至刻度，配成最終濃度為約1.0Mmol/L的亞甲藍(lán)對(duì)照血漿。檢測(cè)過(guò)濾前后樣品溶液時(shí)，必須用同樣的方法萃取檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。F.19.3測(cè)定用含1%乙酸的甲醇溶液作試劑空白，在654nm±2nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。按以下公式計(jì)算亞甲藍(lán)