免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件

1、免疫分析技術(shù)之ELISA王娟聰明出于勤奮，天才在于積累免疫分析技術(shù)之ELISA王娟聰明出于勤奮，天才在于積累弟度分祈技術(shù)之 ELISA廣東省功能蛋白質(zhì)組學(xué)重點實驗室王娟弟度分祈技術(shù)之 ELISA免疫學(xué)檢測技術(shù)細胞水平分子水平基因水平體外(或體內(nèi))測定測定各類免疫球蛋白、測定免疫應(yīng)答相關(guān)基各類細胞及其亞群的補體、細胞因子及其因的表達與調(diào)控、免數(shù)量和效應(yīng),從而受體、黏附分子的表疫分子的遺傳多態(tài)性解機體的細胞免疫水達水平和生物活性及基因型別分析從而了解機體免疫因子間的相互關(guān)系免疫學(xué)檢測技術(shù)ELISA概念酶聯(lián)免疫吸附實驗( Enzyme Linked ImmunoSorbent assay, ELIS

2、A),是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques)上發(fā)展起來的種新型免疫測定技術(shù),基礎(chǔ)是:抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的標記。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),由此進行定性或定量分析。ELISA概念酶免疫測定類型均相酶免疫測定酶免疫測定非均相酶免疫測定液相酶免疫測定這種固相酶免疫測定方法在1971年最初建立時稱為酶聯(lián)免疫吸附劑測定,簡稱 JELISA酶免疫測定類型1.1抗原抗體反應(yīng)1.1.1可逆性抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡,其反應(yīng)式為Ag+AbAg:Ab抗體的親和力( affinity),

3、可以用平衡常數(shù)K表示K=AgAb/AAb,AgAb的解離程度與K值有關(guān)。高親和力抗體的抗原結(jié)合點與抗原的決定簇在空間構(gòu)型上非常適合兩者結(jié)合牢固,不易解離。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性1.1抗原抗體反應(yīng)1.1.2特異性抗原抗體的結(jié)合發(fā)生在抗原的決定簇與抗體的結(jié)合位點之間。化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間構(gòu)型互補關(guān)系,具有高度的特異性。測定某一特定的物質(zhì),而不需先分離待檢物1.1.2特異性113敏感性化學(xué)比色法的敏感度為mg/m水平酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5-10g/ml免疫測定中凝膠擴散法和濁度法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿標記的免疫敏感度可提高數(shù)千倍,達ng/m水平例如,HBsA9,其敏感度可達01ng

4、/113敏感性1.2免疫測定在臨床檢驗中的應(yīng)用由于各種抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體,利用此抗體作為試劑就可檢測標本中相應(yīng)的抗原,因此免疫測定的應(yīng)用范圍極廣1.2免疫測定在臨床檢驗中的應(yīng)用基本原理使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性.使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的

5、比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。基本原理ELISA的類型ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑(1)固相的抗原或抗體,即免疫吸附劑( immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為結(jié)合物”( conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法ELISA的類型免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之E

6、LISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析

7、技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件

8、免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共10

9、6張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELIS

10、A共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件免疫分析技術(shù)之ELISA共106張課件謝謝！21、要知道對好事的稱頌過于夸大，也會招來人們的反感輕蔑和嫉妒。培根22、業(yè)精于勤，荒于嬉；行成