反相高效液相色譜梯度洗脫法測定七葉神安膠囊中人參皂苷Rb3的含

1、反相高效液相色譜梯度洗脫法測定七葉神安膠囊中人參皂苷Rb3的含【摘要】目的創(chuàng)立反相高效液相色譜梯度洗脫法測定七葉神安膠囊中人參皂苷Rb3的含量。要領(lǐng)色譜柱為Hypersil18(5，4.6200)，活動相為乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脫：014in，1933；1416in，3349，流速為1.0l/in，檢測波長為203n，柱溫為30。效果人參皂苷Rb3進樣量在1.769610.6176gr=0.9999的范疇內(nèi)線性干系精良，均勻接納率為98.22%，RSD=1.26%。結(jié)論該要領(lǐng)輕便、正確、重現(xiàn)性好，可用于七葉神安膠囊的質(zhì)量操縱。【關(guān)鍵詞】反相高效液相色譜梯度洗脫法七葉神安膠囊人參皂苷Rb3

2、Keyrds：Rp-HPLGradientElutinethd；QiyeShenanapsule；GinsensideRb3七葉神安膠囊是由三七葉提取的總皂苷制備而成的，成效益氣安神，活血止痛。臨床用于心氣不敷、心血瘀阻所致的心悸、失眠、胸痛、胸悶。本品療效明顯，且毒副作用甚微，因此，臨床應用較為普及。我們接納高效液相色譜法測定本品中所含有用身分人參皂苷Rb3的含量，以操縱成品的質(zhì)量15。1儀器與試藥島津高效液相色譜儀包羅SL-10AVP操縱器、L-10ATVP泵、SPD-10AVP檢測器、SIL-10ADVP主動進樣器、DGU-14A脫氣機、T-10ASVP柱溫箱、LASS-VP事情站；KQ

3、-250型超聲波洗濯器昆山超聲儀器；ettler3電子天平梅特勒公司；TG328A闡發(fā)天平上海天平儀器廠。人參皂苷Rb3比較品供含量測定用，購于中國藥品生物成品檢定所，批號111686-202201；七葉神安膠囊，廉價；乙腈為色譜純，水為重蒸水，別的所用試劑均為闡發(fā)純。2要領(lǐng)與效果2.1色譜條件色譜柱為Hypersil18(5，4.6200)；以乙腈為活動相A，以0.2%磷酸溶液為活動相B，按表1中的劃定舉行梯度洗脫；流速1.0l/in；檢測波長203n；柱溫30；進樣量10l。表1活動相梯度洗脫步伐略2.2供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，混勻，研細，細密稱取適量約相稱于含三七葉總

4、皂苷100g，置具塞錐形瓶中，細密參加乙醇20l，密塞，稱定重量，超聲處置懲罰功率250，頻率40kHz15in，放冷，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，用微孔濾膜0.45濾過，取續(xù)濾液，即得。2.3尺度曲線的繪制細密稱取人參皂苷Rb3比較品45g，置25l量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，從中細密汲取1，2，3，4，5，6l置10l量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，別離細密汲取10l注人液相色譜儀，記載色譜圖，測定峰面積，以峰面積A對進樣量g舉行線性回歸,得回歸方程為：A=25092+199818，r=0.9999，表白人參皂苷Rb3進樣量在1.769610.6176g范疇內(nèi)與峰面積

5、有精良的線性干系。2.4細密度實行細密汲取人參皂苷Rb3比較品溶液10l，重復進樣6次，測定峰面積，效果RSD為0.31%。2.5不變性實行取供試品溶液，別離于制備后0，2，4，6，8，12h測定，效果RSD為0.32%，表白樣品溶液在12h內(nèi)不變。2.6重復性實行取同一批號樣品6份，細密稱定，依法平行測定，效果人參皂苷Rb3均勻含量為13.990g/粒，RSD為0.88%。2.7加樣接納率實行取含量的樣品6份，細密稱定，別離細密參加人參皂苷Rb3比較品適量，依法測定，盤算接納率，效果見表2。表2加樣接納率實行效果略2.8陰性滋擾實行取陰性比較樣品按供試品溶液制備要領(lǐng)制備陰性比較溶液。別離取比

6、較品溶液、供試品溶液、陰性比較溶液各10l，注入液相色譜儀，記載色譜圖。效果在選定的色譜條件下，供試品中人參皂苷Rb3峰與其他組分色譜峰能到達基線分散，陰性比較對測定無滋擾。見圖13。2.9樣品測定取樣品3批，依法測定含量。效果見表3。表3樣品測定效果略3討論樣品前處置懲罰別離對差異提取溶劑及差異超聲處置懲罰時間舉行了比力，效果表白以乙醇為溶劑，超聲處置懲罰15in即可根本提取完全。本品雖為單方制劑，但所含身分較龐大，對分散有必然影響，本實行曾對甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.5%冰醋酸溶液，乙腈-0.2%磷酸溶液4種活動相體系別離舉行挑選優(yōu)化，末了確定以乙腈-0.2%磷酸溶液作為活動相舉行梯度洗脫，能使人參皂苷Rb3到達基線分散，且其他身分對測定無滋擾。本實行要領(lǐng)亦可用于三七葉藥材及其復方制劑的含量測定?！緟⒖嘉墨I】1何軼，范震洪，趙靜沛，等HPL測定三七花葉顆粒中人參皂苷Rb3的含量J.中國中藥雜志，2022，3122：1894.2國度藥典委員會.中國藥典，部S.北京：化學產(chǎn)業(yè)出書社,20223王隸書，程東巖，董方言三七葉的HPL指紋圖譜的研究J.中成藥，2022，252：88.4王隸書，程東巖，程東紅HPL法