生菜中色素提取分離和含量測定實用教案

1、目 錄 實驗(shyn)目的實驗實驗(shyn)器器材材 實驗實驗(shyn)原原理理 實驗步驟實驗步驟注意事項注意事項 實驗分析及結(jié)果實驗分析及結(jié)果第1頁/共19頁第一頁，共19頁。實驗(shyn)目的實驗(shyn)器材實驗材料及儀器藥品1.層析液配方：石油醚20ml +丙酮2ml +苯1ml2.天平 研缽(yn b) 燒杯 量筒 濾紙 表面皿 剪刀 95%乙醇 漏斗 滴管 尼龍布 毛細管 1.學會葉綠素的提取分離和含量的測定2.了解葉綠素的性質(zhì)第2頁/共19頁第二頁，共19頁。實驗原理 綠葉中的葉綠體含有葉綠素，葉綠素可以溶于有機溶劑乙醇，丙酮等，所以可將色素提取出來，紙層析法是分離色素

2、最簡單的方法，他的原理是利用混合(hnh)色素各個物理，化學性質(zhì)的差別，以不同的程度分布于固定相和流動相中。由于他們的移動速度不同，從而達到移動的目的。第3頁/共19頁第三頁，共19頁。實驗步驟1.稱取2g的新鮮生菜綠葉，剪碎，放在研缽中，加5ml乙醇，加入少許的石英砂一起研磨成漿，用尼龍布過濾后，該濾液即為葉綠素提取液。2.取一塊預先干燥處理過的定性濾紙，將它剪成長(chngzhng)約10cm,寬約1cm的濾紙條。將濾紙條的一段剪去兩角，在此端距頂端1cm處用鉛筆畫一條細線，線要直，要勻，要細。3.畫濾液細線 用毛細管取少量濾液，沿鉛筆線均勻畫細線。濾液干后，重復劃線一兩次。4.分離光和色

3、素，向燒杯中倒入3ml層析液，將濾紙條尖端朝下，斜靠內(nèi)壁，插入層析液，蓋上表面皿5.僅過幾分鐘后，觀察色素帶的情況，最上層的是胡蘿卜素，其次是葉黃素，再次是葉綠素a,最后是葉綠素b第4頁/共19頁第四頁，共19頁。第5頁/共19頁第五頁，共19頁。第6頁/共19頁第六頁，共19頁。第7頁/共19頁第七頁，共19頁。第8頁/共19頁第八頁，共19頁。第9頁/共19頁第九頁，共19頁。 注意事項1.畫鉛筆線時，線要細 直 勻 2.分離光合色素時，濾液細線不要浸入液面以下，接觸到層析液，這是因為色素極易溶解在層析液中，導致色帶不清晰(qngx)，影響實驗效果。3.分離光合色素時，要加蓋，減少有機溶劑

4、的揮發(fā)。4.丙酮有毒性，在使用時，要遠離。第10頁/共19頁第十頁，共19頁。 1.取5g干凈的生菜葉，沸水2min，撈出來，冷卻。 2.將冷卻后的生菜葉放在研缽中搗碎，加入等體積的 95%的乙醇，攪拌浸取30min ，過濾，濾渣按照上法再用95%的乙醇浸取3 次，合并4次的浸提液，加入等體積 的石油醚，萃取(cuq)10min,靜置，充分分層，分出醚相，下層醇相再用石油醚照上層萃取(cuq)2次，合并3次石油醚萃取(cuq)液，依次用60%，70%，80%的乙醇醇各洗滌一次最后用離子水洗滌三次。 3.水浴加熱石油醚，使石油醚揮發(fā)，得到葉綠素固體 4.葉綠素質(zhì)量=裝有葉綠素固體的燒杯的質(zhì)量-空燒杯的質(zhì)量 葉綠素含量的測定(cdng)實驗步驟第11頁/共19頁第十一頁，共19頁。第12頁/共19頁第十二頁，共19頁。第13頁/共19頁第十三頁，共19頁。第14頁/共19頁第十四頁，共19頁。第15頁/共19頁第十五頁，共19頁。第16頁/共19頁第十六頁，共19頁。實驗(shyn)分析及結(jié)果綠葉質(zhì)量(zhling)：5g 葉綠素干物質(zhì)的質(zhì)量(zhling)：0.985g葉綠素的得率：0.985/5=0.197=19.7% 同比其他方法，這種葉綠素含量(hnling)測定方法比較方便、準確、速度快、可以用來成為食用色素第17頁/共19頁第十七頁，共