人參果膠對a一葡萄糖昔酶的抑制作用

1、人參果膠對a葡萄糖昔酶的抑制作用”葡萄椎年是種行件廠小斶紙毛粘膿細胞刷狀緣的酶類，通過水解“仁4縉桿進町凱從淀粉和覽它仃關(guān)婁韻的卑還原端水KTttmh衛(wèi)窗醤魏肯酶抑制劑墾一類能夠延綢瞞道挨水化合物吸收的口服降糖藥物，減緩愉尊諂的生成及吸收.降低餐肓師血儲覆解高議島素血癥，從血減少禺血糖對賊腺的剌淞.提奇勝關(guān)嘉的墩竊性，保護胰腺.改善井預(yù)陰躺尿病并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展.以及治療因碳水化曲代謝斎亂而引起的0EM.此外.葡慟抽仔購抑制刊還具有抗HIV、抗嗣毒慮染導(dǎo)作用0】4葡莓時昔附U制劑是比較成熟的楮尿病治療藥物.已廣泛應(yīng)用于臨床亠有文獻報道.誘加果膠的食物可以抑制4葡曹粉的活性叫丹*和茶參裁敲證實對

2、箭罰欝徉爾具有抑制柞用阿枸杞多梢和女貞子爹雅的議性多糖部分對心葡葡誥弁酶抑制機制為非竟爭性抑制作用叫1譏前期宴驗結(jié)果證實，給輔尿榔小徽口服人移參轉(zhuǎn)時.其中人塞果膠部分可以降低血前.與Ifi腔注射比較降抽件用懈強推測.人藝果腔時腸道«m鬲純仃的抑制什川町能抑制了喘曹萌昔詹的活性，本丈將探討人參果膠對"舫費鞘背稱的體外抑制作用,為人鏗呆膠泊療和預(yù)肪酣呆網(wǎng)提供更半常的理論依據(jù)6.1材料與方法644實驗材料6.1.1.1人參果膠捉取過程同匕文6動物SD人陣魂1盹2加岳吉林人學(xué)動物實臉中心，許可證號iSCXK<J)2m30001fill3試刑o術(shù)輔箭存酶sigiia時-価曜卷&

3、#174;D-侃紬U出哺朋疔(PNPG)泓卯社NftjCOj北京化【:廠NbH3PO<北京化工廠Na3HPOt北京化I：廠拜糖平穗國程耳公司儀器721分光光度計WH-85空碇渦混介機恒溫水浴鍋PES3C型酸度計忖溫空氣浴振蕩器(搖&拜誚平上海分析儀器廠上海手術(shù)器機械廠河北黃驊市齊家務(wù)五金電器雷式分析儀器廠哈爾濱市東明醫(yī)療儀器廠德國拜耳公可實驗方法試劑配制璘酸鹽緩沖液.2OJffJ-300tnl雙蒸水.配成A液。取5.m7gNHPCU溶于300ml水,配成B液。255mlA液和245mlB液混合,得500ml的50的磷酸鈉緩沖液。制作對硝基苯酚標準曲線配制hnM對硝基苯酚儲存液,稀

4、釋成0.0101mM-系列不同濃度的對硝基苯酚溶液。然肩4分比光度計上測定波長為400nm處的吸光值，以濃度為川坐標，光密度為縱坐標作曲線。6.123w爸短糖昔?；盍y定依據(jù)文獻四反應(yīng)體系為50的磷酸鈉緩沖液1ml.1U/molg伽筒楮mi50pl,37X：保溫10min：加5mMPNPG20jd,379保溫30min,再加入0.1mMNajCOj終止反應(yīng)，400nm波K處比色測定。其活力單位定義為：/!：37CpH6.S的條件F.1nun內(nèi)水解PNPG釋放1Fur.olPNP所需的爾毘.人豔果膠對酵母心爸萄楮昔誇的抑制作用測定不同濃度的人參果膠對陽的抑制作Jib璘酸鈉怨沖液配制成不同濃度(3

5、.4,0.8,1.6,326.4mml)人參果膠，分別加入0.05ml的1U/ml側(cè)液，混勻37匸保溫10min：加5mMPNPG20pl.37X：保溫30nun,再加入0.1mMNCO)終止反應(yīng)，400nm波氏處測定族吸比值。人參果膠對大肌小腸&爸萄糖昔酶的抑制作用人饑小腸o匍短抽作畫總液制備：取SD人鼠，荒債24h石，腹腔注射40mgOcg戊巴比妥鈉進行麻醉.打開腹腔，迅速取岀小腸置冰臺上，剖開小腸滋出腸粘膜,用冰冷生理鹽水沖洗后拭，用玻片刮取小腸粘膜。刮取的小腸粘膜稱重，紜冰冷生理鹽水按1：9的比例制成勻漿.用考馬斯亮蘭試劑盒測定勻漿的蛋廣I含駅.根據(jù)蛋門含址ffi，川埼酸鹽緩沖

6、液柿籽誡2pg蛋門/pl的勻漿，作為粗騎浪"】測定詡活.測定人參果膠對大取小腸一匍甜衲仟斷的抑制仆川：璘酸鈉緩沖液配制成不司濃度0.4.0.8,1.6,3.2mg/ml）人參果膠，分別加入0.4ml的粗葩液，混勻379保溫10nun：加5mMPNPG20pl.379保溫1h.再加入0.1mMN®CO）終止反應(yīng)，400nm波K處測定各吸光值。數(shù)據(jù)分析HMp陰性對照組平均爾活力劑制劑組平均葩陰性對照組平均酚活力6.2結(jié)果與討論對硝基苯酚標準曲線應(yīng)川系列不同濃度的對確基苯酚洛液.在分光光度計匕測定波K為400nm處的吸光值，以濃度為橫坐標.光密度為縱坐標，繪制標準曲線,見圖61得

7、回歸方程:y=6,0882x.R2-0.9939.6IT=0.9956I0.06008Hitrophenol(mmol)5432圖6-1對硝基苯酚標準曲線622人參果膠對酵母a匍簡抽仟鹽活力的影響人參果膠對酵母a.簡萄楮昔誨活力影晌結(jié)果見表64。結(jié)果顯示,0.8-6.4mg/ml均顯示一定的抑制作用.但沒仃劑駅依賴趨勢。?<6-1人婁果膠對活力形響*.Eliminatedtlieimpactoflnlibitorsontheabsorbance.GroupConeentiatian(m"ml)OD4Inhibition<%)Eiizyineactivity0.52Acai

8、bose0.50.2650.09VW3PA0.80.3435.291.60.3435.263.20.3043.036.40.3238.87人參果膠對大軌小腸a爸短榊肯鹽活力的夠響人參果膠対人亂小腸a.匍前糖仟師活力影響結(jié)果見農(nóng)6-2結(jié)果顯示，0.832mg/m1均顯示一定的抑制作Hl，M.現(xiàn)劑就依賴趨如其中3.2mg/mlIbt，WGPA的抑制率達到46.46%,址非島于陽性藥物片抽丫的抑制效果。衣6-2人參果膠對人甌小腸a匍簡納什佈活力影響*.Eliminatedtlieimpactofinhibitorsailtheabsorbance.GroupConeentration(mgml)OD

9、aInhibition<%)Eiizyineactivity0.16Acaibose0.50.1041.54WUPA0.40.16-0.31O.S0.155.541.60.1320.003.20.0946.46o匍雋抽件閘抑制劑是通過抑制小腸刷狀緣I：仙命抽疔胡活件.調(diào)肖控制碳水化介物在腸道的吸收，達到防治程后髙血抽癥和緩解鬲腿島索血癥的II的英作用機制為:競爭性抑制位于小腸的各種心仙曲抽仟爾，減慢淀粉類分解為荷舖柚的速度.從而減緩腸道內(nèi)匍短納的吸收，降低餐后髙血抽。-仙萄糖仟畫抑制別不刺激卩細胞分泌胰島素但對降低餐后胰島素水平，說明a-flmmriw抑制劑可增加臍島索的壇感性。因此，y

10、前對軸仟劭抑制劑的研究越來越受到聯(lián)視。由于其獨特的優(yōu)勢,窗簡抽仔陽抑制劑已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床w木實驗以拜糖平為陽性對照，體外建比葩的抑制劑?？諄砟M動物體的環(huán)境。拜衲半.主要成分為阿卡波抽<Acarbose),圧種對逆的、競爭件的心抽仟兩抑制劑.是從放線超培養(yǎng)液屮分離得到的糖仟類藥物四本實驗中山抑制劑木少仃-定的吸比作川，從吸光的效果f1Wfr抑制劑濃度的升高而增強.為此.我們金實驗的同時做相應(yīng)濃度的空門對照.來消除抑制劑木Q對吸比度的形響.結(jié)果顯気WGPA對酵母e爸鬭楮昔醫(yī)具有顯著的料制作用,不具有刑量依賴性,但對大取小腸的心爸萄糖昔爾活性呈現(xiàn)劑雖依賴性的抑制作用.有文獻證實，丹皮多期,茶多!ft,枸杞多旃和女貞作轄等均有心爸荀楮甘酶的抑制作用，其中的枸杞多箱和女貞子多糖也是酸性多糖，二者的作用機制都是竟爭性抑制作用pui.木研究證實WGP