菊花的組織培養(yǎng)23665658

1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng) 植物的組織培養(yǎng)又叫植物的組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng)離體培養(yǎng)，指植物的組織，指植物的組織、器官或細(xì)胞等（器官或細(xì)胞等（外植體外植體課本課本34頁旁欄頁旁欄）在）在離體條件離體條件下，通過下，通過無菌無菌操作，在操作，在人工控制條件人工控制條件下（一定下（一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件）進(jìn)的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件）進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。 一、一、植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)的概念的概念原理原理概念：概念：原因：原因：應(yīng)用：應(yīng)用：（回想）植物組織培（回想）

2、植物組織培養(yǎng)養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞的全能性是指已分化已分化的細(xì)胞具有的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個體的發(fā)育成完整個體的潛能潛能。生物體的每一個細(xì)胞都是由生物體的每一個細(xì)胞都是由同一個受同一個受精卵有絲分裂精卵有絲分裂而來，都含有該物種所而來，都含有該物種所特有的特有的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì) 微型繁殖、作物脫毒、人工種子微型繁殖、作物脫毒、人工種子二、植物組織培養(yǎng)的基本過程二、植物組織培養(yǎng)的基本過程 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 脫分化（或去分化）脫分化（或去分化）：由高度分化的植物組由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。織或

3、細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。再分化再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官的過程。又可以重新分化成根或芽等器官的過程。外植體外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。細(xì)胞分化細(xì)胞分化：植物個體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、：植物個體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異。結(jié)構(gòu)和功能上會出現(xiàn)穩(wěn)定性的差異。實質(zhì)？實質(zhì)？愈傷組織愈傷組織：細(xì)胞排列疏松：細(xì)胞排列疏松而而無規(guī)則、高度液泡無規(guī)則、高度液泡化的無定形的薄壁細(xì)胞?；臒o定形的薄壁細(xì)胞。幾個概念幾個概念三、影響植物組織培養(yǎng)的因素：三、影響植物

4、組織培養(yǎng)的因素：1、材料（外植體）的選取、材料（外植體）的選?。?）不同植物的組織培養(yǎng)難度不同）不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？ （2）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同 什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？容易進(jìn)行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜容易進(jìn)行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜幼齡、保存時間短的組織幼齡、保存時間短的組織菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝2、營養(yǎng)成分（培養(yǎng)基）、營養(yǎng)成分（培

5、養(yǎng)基）（1）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？）植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基？ MS培養(yǎng)基培養(yǎng)基大量元素大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物有機(jī)物：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 （2）MS培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基的主要成分？培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么？培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各種無機(jī)大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞需要的各種無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源的同時維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、鹽；蔗糖提供碳源的同時維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿

6、足離體植物細(xì)胞的特殊營養(yǎng)維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細(xì)胞的特殊營養(yǎng)物質(zhì)需求物質(zhì)需求課本課本33頁旁欄思考：頁旁欄思考：微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主，微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)3、植物激素、植物激素（1）關(guān)鍵激素是什么？）關(guān)鍵激素是什么？（2）兩種激素的不同）兩種激素的不同使用順序使用順序出現(xiàn)不同結(jié)果出現(xiàn)不同結(jié)果（3）兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果）兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果4、pH、溫度、光照等、溫度、光照等 菊花組織培養(yǎng)的菊花組織培養(yǎng)的PH？溫度？光照？溫度？光照？生長素，細(xì)胞分裂素生長素，細(xì)胞分裂素思考：思考：胡蘿卜胡蘿卜組織培

7、養(yǎng)的光照組織培養(yǎng)的光照要求與菊花組織要求與菊花組織 培養(yǎng)相同嗎培養(yǎng)相同嗎？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？菊菊花花的的組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)再分化再分化材料性質(zhì)材料性質(zhì)：培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)環(huán)境條件環(huán)境條件：pH、溫度、光照、溫度、光照基本原理基本原理:細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性基本過程基本過程:脫分化脫分化愈傷組織愈傷組織影響因素：影響因素：操作流程：操作流程：外植體的消毒外植體的消毒接種接種配制配制MS固體培固體培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)培養(yǎng)移栽移栽栽培栽培制備制備MS固固體培養(yǎng)基體培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng)栽栽 培培四、實驗操

8、作四、實驗操作 移移 栽栽流水流水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干70%酒精酒精無無菌水菌水沖洗沖洗無菌紙吸干無菌紙吸干0.1%氯化氯化汞汞無菌水無菌水沖洗至少三次之上沖洗至少三次之上（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？（流水是為消毒嗎？能消毒的是什么？無菌水沖洗是為了干啥？）無菌水沖洗是為了干啥？）（哪（哪6步？）步？）1、配制各種母液、配制各種母液（大量元素、微量元素（大量元素、微量元素各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）2、配制培養(yǎng)基、配制培養(yǎng)基（菊花組培是否添加植物激（菊花組培是否添加植物激素？）素？）3、滅菌、滅菌（哪種滅菌方法？）（哪種滅菌方法？）注意

9、接種時的各種無菌操作。注意接種時的各種無菌操作。將菊花莖段插入培養(yǎng)基時特別應(yīng)注意什么？將菊花莖段插入培養(yǎng)基時特別應(yīng)注意什么？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？直接移栽到土壤中嗎？直接移栽到土壤中嗎？1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈、接種的無菌操作（酒精、酒精燈灼燒）灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)在整個操作過程中，是如何

10、來實現(xiàn)無菌無菌環(huán)境的？環(huán)境的？35頁旁欄思考：頁旁欄思考：至少做一組以上的重復(fù)。對照實驗用一個不接至少做一組以上的重復(fù)。對照實驗用一個不接種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一同培養(yǎng)，用種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。結(jié)果分析與評價結(jié)果分析與評價（一）對接種操作中污染情況的分析（一）對接種操作中污染情況的分析（二）是否完成了對植物組織的脫分化和再分化（二）是否完成了對植物組織的脫分化和再分化（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計、對照與記錄（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計、對照與記錄（四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格課題延伸（略）練習(xí)練習(xí)1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)生長，如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，