高三一輪復(fù)習(xí)選修專題微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

1、第第2課時(shí)課時(shí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離1、培養(yǎng)基的種類、營(yíng)養(yǎng)要求及、培養(yǎng)基的種類、營(yíng)養(yǎng)要求及配制原則配制原則2、無菌技術(shù)的內(nèi)容及方法、無菌技術(shù)的內(nèi)容及方法3、分離純化微生物的研究思路、分離純化微生物的研究思路、方法方法一、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成一、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成1、微生物需要的五大類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：、微生物需要的五大類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)： 碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽和碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽和水水 另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（如特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（

2、如:生長(zhǎng)因子）以及氧生長(zhǎng)因子）以及氧氣的要求。氣的要求。培養(yǎng)乳酸菌培養(yǎng)乳酸菌添加維生素添加維生素培養(yǎng)霉菌培養(yǎng)霉菌PH調(diào)至酸性調(diào)至酸性培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)細(xì)菌PH調(diào)至中性或微堿調(diào)至中性或微堿性性培養(yǎng)厭氧微生物培養(yǎng)厭氧微生物無氧環(huán)境無氧環(huán)境【特殊要求特殊要求】 P15定義定義作用作用主要來源主要來源碳碳源源能提供能提供碳元素碳元素的物質(zhì)的物質(zhì)構(gòu)成生物體構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異的物質(zhì)，異養(yǎng)生物的養(yǎng)生物的能能源源物質(zhì)物質(zhì)無機(jī)物：無機(jī)物：CO2、NaHCO3有機(jī)物：糖類、脂有機(jī)物：糖類、脂肪酸、石油、花生肪酸、石油、花生粉餅等粉餅等 異養(yǎng)異養(yǎng)微生物的碳源是微生物的碳源是有機(jī)物有機(jī)物，最常，最常利用的是利用的是糖類糖

3、類； 自養(yǎng)自養(yǎng)微生物利用微生物利用CO2或碳酸鹽或碳酸鹽作為作為碳源（以無機(jī)碳源作為主要碳源）。碳源（以無機(jī)碳源作為主要碳源）。定義定義作用作用主要來源主要來源氮氮源源能提供能提供氮元素氮元素的物質(zhì)的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、合成蛋白質(zhì)、核酸以及含核酸以及含氮代謝產(chǎn)物氮代謝產(chǎn)物無機(jī)物：無機(jī)物：N2、NH3、氨鹽、硝酸鹽氨鹽、硝酸鹽有機(jī)物：尿素、牛肉有機(jī)物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等膏、蛋白胨等 能把能把氮?dú)獾獨(dú)庾鳛榈吹闹幌抻诠痰?、某作為氮源的只限于固氮菌、某些放線菌和藻類等。些放線菌和藻類等。 霉菌僅以無機(jī)氮素化合物為氮源；部分霉菌僅以無機(jī)氮素化合物為氮源；部分細(xì)菌不用有機(jī)氮化合物作為氮源就不能生長(zhǎng)。細(xì)

4、菌不用有機(jī)氮化合物作為氮源就不能生長(zhǎng)。 生長(zhǎng)生長(zhǎng)因子因子生長(zhǎng)不可缺生長(zhǎng)不可缺少的微量有少的微量有機(jī)物機(jī)物酶和核酸的酶和核酸的成分成分維生素、氨基維生素、氨基酸、堿基等酸、堿基等(1)微生物最常利用的碳源是糖類微生物最常利用的碳源是糖類(特別是葡萄特別是葡萄糖糖)，常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。，常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。是碳源。(3)微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限?！咎貏e提醒特別提醒】結(jié)

5、果結(jié)果常用的方法常用的方法消毒消毒僅殺死物體表面或僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物有害的微生物( (不包不包括芽孢和孢子括芽孢和孢子) )煮沸消毒法、巴氏煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法化學(xué)藥物消毒法滅菌滅菌殺死物體內(nèi)外所有殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽的微生物，包括芽孢和孢子孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌菌、高壓蒸汽滅菌二、消毒和滅菌二、消毒和滅菌培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿空空 氣氣接種環(huán)接種環(huán)雙雙 手手牛牛 奶奶巴氏消毒巴氏消毒化學(xué)消毒化學(xué)消毒紫外線消毒紫外線消毒高壓蒸氣滅菌高壓蒸氣滅菌灼燒滅菌灼燒滅菌干熱

6、滅菌干熱滅菌常用的消毒方法和滅菌方法常用的消毒方法和滅菌方法無菌技術(shù)主要操作要求無菌技術(shù)主要操作要求: P15: P15 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人實(shí)驗(yàn)前應(yīng)對(duì)操作空間、操作人員消毒，對(duì)所有器具和培養(yǎng)基滅菌。員消毒，對(duì)所有器具和培養(yǎng)基滅菌。 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周實(shí)驗(yàn)進(jìn)行時(shí)需在酒精燈火焰周圍無菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌圍無菌區(qū)操作，另外要避免已滅菌處理材料再次污染。處理材料再次污染。三、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)三、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基步驟：、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基步驟： 計(jì)算計(jì)算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板倒平板2、微生物接種最常用的方法中的是：、微生物接種最常用的方

7、法中的是： 平板劃線法平板劃線法和和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法如果如果未接種的培養(yǎng)基未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保在恒溫箱中保溫溫12天后無菌落生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基天后無菌落生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制的制備是成功的，否則需要重新制備。備。培養(yǎng)基的制作是否合格？培養(yǎng)基的制作是否合格？平板劃線法：平板劃線法： 通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面表面連續(xù)劃線連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子一個(gè)細(xì)胞繁殖而來

8、的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。細(xì)胞群體，這就是菌落。平板劃線的操作方法為什么在操作的第一步以及每為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？第一步：第一步：避免接種環(huán)上可能存在的微生物避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；污染培養(yǎng)物；每次劃線前：每次劃線前：殺死上次劃線結(jié)束后殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。的數(shù)目

9、逐漸減少，以便得到菌落。在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？灼燒接種環(huán)嗎？為什么？劃線結(jié)束后劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。染操作者。 將菌液進(jìn)行一系列的梯度將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別然后將不同稀釋度的菌液分別涂布涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基

10、表面形成單細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的個(gè)的菌落菌落。1、根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為、根據(jù)培養(yǎng)基的用途可分為:四、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)四、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，將將允許特定種類允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)同時(shí)抑制或阻止其他抑制或阻止其他種類微生物種類微生物生長(zhǎng)。生長(zhǎng)。選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基Q3:培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入中加入_以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，可以分離分解纖維素的微生物。基，可以分離分解纖維素的微生物。 Q1:分離利用石蠟

11、油的微生物，用分離利用石蠟油的微生物，用_的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基Q2:分離產(chǎn)生蛋白酶的微生物，用分離產(chǎn)生蛋白酶的微生物，用_的培養(yǎng)基的培養(yǎng)基Q4:分離固氮微生物用分離固氮微生物用_的培養(yǎng)基。的培養(yǎng)基。以石蠟油作為唯一碳源以石蠟油作為唯一碳源以蛋白質(zhì)作為唯一氮源以蛋白質(zhì)作為唯一氮源青霉素青霉素缺氮缺氮鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某種指示在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的微生物。的微生物。2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)一定容積的胞計(jì)數(shù)板，在

12、顯微鏡下計(jì)一定容積的樣品中微生物數(shù)量。樣品中微生物數(shù)量。用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。不能區(qū)分死菌與活菌。不能區(qū)分死菌與活菌。四、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)四、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(2)間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法(活菌計(jì)數(shù)法活菌計(jì)數(shù)法)原理：原理： 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在數(shù)

13、在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算公式：計(jì)算公式：C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)M代表稀釋倍數(shù)代表稀釋倍數(shù)3、細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程、細(xì)菌分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程 在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的細(xì)菌合成的_將尿素分解成了將尿素分解成了_。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性。氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性_，PH_。因此，我們可以通過檢。因此，我們可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基測(cè)培養(yǎng)基_變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。是否發(fā)生。 脲酶脲酶 氨氨 增強(qiáng)

14、增強(qiáng) 升高升高 PH 4、對(duì)分離的菌種的鑒定、對(duì)分離的菌種的鑒定 在以在以_為唯一氮源的培養(yǎng)基中為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入加入_指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果如果PH升高，指示劑將變升高，指示劑將變_ ，說明，說明該細(xì)菌能夠該細(xì)菌能夠_ 。 尿素尿素 酚紅酚紅 紅紅 分解尿素分解尿素4、對(duì)分離的菌種的鑒定、對(duì)分離的菌種的鑒定1、纖維素酶、纖維素酶五、分解纖維素的微生物的分離五、分解纖維素的微生物的分離纖維素酶是一種纖維素酶是一種復(fù)合酶復(fù)合酶，至少包括三種，至少包括三種組分，即組分，即C1酶、酶、 CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶。纖維素纖維素纖維纖維二糖二糖葡萄糖葡萄糖C1

15、酶酶Cx酶酶葡萄糖葡萄糖苷酶苷酶(1)篩選纖維素分解菌的方法是篩選纖維素分解菌的方法是_ 該方法可以通過該方法可以通過_反應(yīng)直接篩選。反應(yīng)直接篩選。剛果紅染色法剛果紅染色法顏色顏色2、纖維素分解菌的篩選原理、纖維素分解菌的篩選原理(2)其原理是：剛果紅可以與纖維素形成其原理是：剛果紅可以與纖維素形成_，當(dāng)纖維素被，當(dāng)纖維素被_分解后，分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以_為中心的為中心的_，我們可以，我們可以通過通過_來篩選纖維素分解菌。來篩選纖維素分解菌。紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物纖維素酶纖維素酶纖維素分解菌纖維素分解菌 透明圈透明圈是否產(chǎn)生透明圈是否產(chǎn)生透明圈土壤取樣選擇

16、培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落3、分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程、分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)染色法染色法染色法染色法富含纖維素土壤富含纖維素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鑒別染色鑒別分離出分解菌分離出分解菌分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過程中操作有誤的分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過程中操作有誤的是是()A經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上分解菌的培養(yǎng)基上B富集培養(yǎng)這一步可省略；但培養(yǎng)纖維素富集培養(yǎng)這一步可省略；但培養(yǎng)纖維素分解菌少分解菌少C經(jīng)

17、稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色D對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上纖維素的培養(yǎng)基上A【解析解析】經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋，才能將經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋，才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；養(yǎng)基上；富集培養(yǎng)可省略；富集培養(yǎng)可省略；經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色，設(shè)經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色，設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。了欲分離的微生物。生物生物柴油柴油油料油料作物作物植物油植物油甲甲 醇醇微生物微生物M M提取提取脂肪酶脂肪酶（2010山東）生

18、物柴油是一種可再生清潔山東）生物柴油是一種可再生清潔能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠緩人類對(duì)化能源，其應(yīng)用在一定程度上能夠緩人類對(duì)化石燃料的消耗?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物石燃料的消耗。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，在微生物M產(chǎn)產(chǎn)生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠生的脂肪酶作用下，植物油與甲醇反應(yīng)能夠合成生物柴油。合成生物柴油。（1）篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物）篩選產(chǎn)脂肪酶的微生物M時(shí)，選時(shí)，選擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生擇培養(yǎng)基中添加的植物油為微生物生長(zhǎng)提供長(zhǎng)提供_，培養(yǎng)基滅菌采用的，培養(yǎng)基滅菌采用的最適方法是最適方法是_法。法。（2）測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選）測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用用_法直接計(jì)數(shù)；法直接

19、計(jì)數(shù)；（3）若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐）若需克隆脂肪酶基因，可應(yīng)用耐熱熱DNA聚合酶催化的聚合酶催化的_技技術(shù)。術(shù)。碳源碳源高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌顯微鏡直接計(jì)數(shù)顯微鏡直接計(jì)數(shù)PCR2、某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)、某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題?；缇?、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計(jì)數(shù)。請(qǐng)回答與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的問題。（1）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了）培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了_和和_。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是除

20、此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是_和和_。（2）為了使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還）為了使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種_作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。氮源氮源碳源碳源水水無機(jī)鹽無機(jī)鹽無菌水無菌水（3）培養(yǎng)）培養(yǎng)20小時(shí)后，觀察到平板上小時(shí)后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有水樣品中有_種細(xì)菌。一般種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越污染的程度越_。（4）如果要檢測(cè)水中是否含有大腸桿）如果要檢測(cè)水中是否含有大腸桿菌，培養(yǎng)基中還應(yīng)加入菌，培養(yǎng)基中還

21、應(yīng)加入_。多多大大( (或嚴(yán)重或嚴(yán)重) )伊紅伊紅美藍(lán)美藍(lán) (2010年青島市模擬年青島市模擬)啤酒是我們?nèi)粘Ｉ钪凶畛Ｒ姷娘嬃现?。生產(chǎn)過程大啤酒是我們?nèi)粘Ｉ钪凶畛Ｒ姷娘嬃现弧Ｉa(chǎn)過程大致如下：將經(jīng)過滅菌的麥芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌種后輸入發(fā)酵罐。初期，致如下：將經(jīng)過滅菌的麥芽汁充氧，接入啤酒酵母菌菌種后輸入發(fā)酵罐。初期，酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精濃度漸漸上升，泡沫不斷增多；當(dāng)糖度下降到酵母菌迅速繁殖，糖度下降，酒精濃度漸漸上升，泡沫不斷增多；當(dāng)糖度下降到一定程度后，結(jié)束發(fā)酵；最后分別輸出有形物質(zhì)和啤酒。根據(jù)上述過程，回答以一定程度后，結(jié)束發(fā)酵；最后分別輸出有形物質(zhì)和啤酒。根據(jù)上述

22、過程，回答以下問題：下問題：(1)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對(duì)野生酵母菌進(jìn)行誘具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精發(fā)酵菌種，對(duì)野生酵母菌進(jìn)行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：步驟步驟1：野生菌液體培養(yǎng)一段時(shí)間后接受紫外線照射誘變處理。：野生菌液體培養(yǎng)一段時(shí)間后接受紫外線照射誘變處理。步驟步驟2：制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意添加：制備選擇培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意添加_和調(diào)低和調(diào)低pH，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。高濃度蔗糖高

23、濃度蔗糖( (葡萄糖葡萄糖) )步驟步驟3：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。：將紫外線照射后的菌液稀釋涂布平板。步驟步驟4：根據(jù)：根據(jù)_篩選出突變菌。篩選出突變菌。(2)上述步驟上述步驟2、3的目的分別是的目的分別是_、_。(3)釀酒過程中，經(jīng)檢測(cè)活菌數(shù)量適宜但卻不產(chǎn)生酒精，應(yīng)采取的措施是釀酒過程中，經(jīng)檢測(cè)活菌數(shù)量適宜但卻不產(chǎn)生酒精，應(yīng)采取的措施是_。是否能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)是否能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)提供高糖和酸性篩選環(huán)境提供高糖和酸性篩選環(huán)境獲得單菌落獲得單菌落隔絕空氣隔絕空氣(4)秸稈的主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素，但是酵母菌卻無法直接利用，秸稈的主要成分為木質(zhì)素、纖維素和半纖維素，

24、但是酵母菌卻無法直接利用，原因是其原因是其_。缺乏相應(yīng)分解酶系缺乏相應(yīng)分解酶系( (或缺乏纖維素酶和或缺乏纖維素酶和半纖維素酶半纖維素酶) ) (2009年寧夏年寧夏)(1)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_(消毒、滅菌消毒、滅菌)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷損傷_。(2)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近

25、實(shí)際若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。滅菌滅菌消毒消毒DNA的結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)比例合適比例合適(3)通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的初步的_。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是采用的檢測(cè)方法是_。鑒定鑒定將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置

26、適將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(5)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。滅菌滅菌生長(zhǎng)生長(zhǎng)因子因子生長(zhǎng)不可缺生長(zhǎng)不可缺少的微量有少的微量有機(jī)物機(jī)物酶和核酸的酶和核酸的成分成分維生素、氨基維生素、氨基酸、堿基等酸、堿基等(1)微生物最常利用的碳源是糖類微生物最常利用的碳源是糖類(特別是葡萄特別是葡萄糖糖)，常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。，常利用的氮源是氨鹽、硝酸鹽。(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源。是碳源。(3)微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，是由于微生物之