潔凈室環(huán)境監(jiān)測(cè)操作規(guī)程

1、潔凈室環(huán)境監(jiān)測(cè)操作規(guī)程青島有限公司文件文件名稱潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)操作規(guī)程文件編號(hào)SOP-ZL66-1制定人審核人審核人制定日期審核日期審核日期批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期生效日期頒發(fā)部門品管部印 數(shù)份分發(fā)部門品管部目的 建立潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)規(guī)程，規(guī)范潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的測(cè)試，保 證藥品在規(guī)定的潔凈級(jí)別內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的監(jiān)測(cè)。責(zé)任環(huán)境監(jiān)測(cè)員內(nèi)容1、檢驗(yàn)依據(jù)：1.1 GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法1.2 GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法1.3 GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測(cè)試方法

2、2、懸浮粒子的監(jiān)測(cè)2.1概述：本測(cè)試方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)測(cè)定潔凈區(qū)環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中 含大于或等于某粒徑懸浮粒子數(shù)，來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的懸浮粒子潔凈度等級(jí)。2.2儀器和設(shè)備：塵埃粒子計(jì)數(shù)器，嚴(yán)格按照塵埃粒子計(jì)數(shù)器操作、維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程 （SOP-ZL95-1 ）操作。2.3測(cè)試步驟測(cè)試條件：在測(cè)試之前，要對(duì)潔凈室（區(qū)）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測(cè)試，包括溫度 控制在18-26C、相對(duì)濕度控制在45-65%、壓差等，同時(shí)應(yīng)滿足儀器的使用范圍。測(cè)試狀態(tài)：靜態(tài)測(cè)試，人員不得多于2人。測(cè)試報(bào)告中應(yīng)明確測(cè)試時(shí)所采用的狀 態(tài)及測(cè)試人員數(shù)。測(cè)試時(shí)間：在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈 化空

3、氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 10min后開始。對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜 在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 30min開始。在靜態(tài)b測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔 凈室（區(qū)），測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過(guò)10min后開始；對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過(guò)20min自凈后開始。2.4采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置在空態(tài)或靜態(tài)測(cè)試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)力求均勻，并不得少 于最少采樣點(diǎn)數(shù)目。在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及 工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。最少采樣點(diǎn)數(shù)目如下最少采樣點(diǎn)數(shù)目面積3）潔凈級(jí)別A級(jí)C級(jí)D級(jí)V 102-322 10-V 20422 2

4、0-V 408P 22 40-V 1001642采樣點(diǎn)的布置:2.4.2采樣點(diǎn)位置:*不”般在離地0.8m高度的水平面上均勻布置,并避開回風(fēng)口。測(cè)試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)采樣次數(shù)的限定：對(duì)于任何小潔凈室或局部空氣凈化區(qū)域，采樣點(diǎn)的數(shù)目不得少于2個(gè)，總采樣次數(shù)不得少于5次。最小米樣量潔凈度級(jí)別米樣量L/次 0.5 卩 m 5卩mA級(jí)5.668.5C級(jí)2.838.5D級(jí)2.838.52.5判斷標(biāo)準(zhǔn):潔凈度級(jí)別懸浮粒子最大允許數(shù)（個(gè)/m3）（靜態(tài)） 0.5 pm 5 pmA級(jí)352020C級(jí)3520002900D級(jí)3520000290002.6監(jiān)測(cè)頻率：每季度對(duì)微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并及時(shí)填寫監(jiān)

5、測(cè)記錄（附件2）。2.6.2 D級(jí)取樣間每季度監(jiān)測(cè)所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件 1）每季度對(duì)D級(jí)潔凈區(qū)所有房間進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件 1）3、沉降菌的監(jiān)測(cè)3.1概述：本測(cè)試方法利用沉降法，即通過(guò)自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子 于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板 培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來(lái)判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。本法采用動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為不大于 4小時(shí)。3.2儀器和設(shè)備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿（已滅菌， 90mmx 15mm、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）。3.

6、3測(cè)試步驟：測(cè)試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。將已于 30 35C恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 小時(shí)且無(wú)菌落生長(zhǎng)的培養(yǎng)皿按照采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿 蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在3035C下培養(yǎng)，時(shí)間不 少于2天。采用沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在2025C下培養(yǎng)，時(shí) 間不少于5天。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定 3只培 養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。菌落計(jì)數(shù)：用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用510咅放大鏡檢查有否遺漏。若培養(yǎng)皿上 有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重

7、疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置：參照懸浮粒子的采樣點(diǎn)數(shù)目。最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時(shí)，還應(yīng)滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級(jí)別最少培養(yǎng)皿數(shù)（ 90mm）A級(jí)2C級(jí)2D級(jí)2采樣次數(shù)：每個(gè)采樣點(diǎn)采樣一次評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)：潔凈度級(jí)別浮游菌cfu/m3沉降菌（ 90mn）cfu/4小、時(shí)接觸蝶cfu/蝶手套 cfU手套A級(jí)小于1小于1小于1小于1C級(jí)1005025D級(jí)20010050監(jiān)測(cè)頻率：微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室凈化臺(tái)樣品每次實(shí)驗(yàn)時(shí)監(jiān)測(cè)，其他房間每周一次并及時(shí) 填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件4）03.3.7.2 D級(jí)取樣間每季度監(jiān)測(cè)所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件3）o3.3.

8、7.3 D級(jí)潔凈區(qū)每季度監(jiān)測(cè)所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件3）o陽(yáng)性對(duì)照間生物安全柜每次實(shí)驗(yàn)時(shí)監(jiān)測(cè)，其他房間每季度測(cè)一次并及時(shí)填 寫監(jiān)測(cè)記錄（附件4）微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室表面微生物（手套及操作服）每周測(cè)一次，并及時(shí)填寫 監(jiān)測(cè)記錄（附件4）。4、浮游菌的監(jiān)測(cè)4.1概述本方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過(guò)收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門 的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判 定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來(lái)評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。本法采用動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。4.2儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基：FKC-1型浮游菌采樣器，嚴(yán)格按照浮游菌采樣器操作 及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程（SOP-

9、ZL96-1 ）操作。培養(yǎng)皿（已滅菌， 90mmK 15mr）i、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊脂 培養(yǎng)基（ SDA ）、恒溫培養(yǎng)箱。4.3測(cè)試步驟測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先的消毒劑 滅菌，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜一直放在被測(cè)房間內(nèi)。先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。采樣 口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動(dòng)

10、真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸 發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子 后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。培養(yǎng)全部米樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在30 C35C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。 可每批選定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。菌落計(jì)數(shù) 用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用 510倍 放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有 2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以 2個(gè)或 2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。4.4采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置浮游

11、菌測(cè)試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置參照懸浮粒子的采樣點(diǎn)數(shù)目。4.5監(jiān)測(cè)頻率：微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室每季度監(jiān)測(cè)一次，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件6）。級(jí)取樣間每季度監(jiān)測(cè)所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄（附件 5）。4.5.3 D級(jí)潔凈區(qū)每季度監(jiān)測(cè)所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測(cè)記錄(附件 5)。5、注意事項(xiàng)5.1使用前仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不 能使用。5.2采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對(duì)樣本的污染。5.3對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。5.4由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì) 觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或

12、培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。6年度回顧審核與數(shù)據(jù)趨勢(shì)分析6.1品管部每年對(duì)通過(guò)質(zhì)量回顧對(duì)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)收集并經(jīng)評(píng)價(jià)，用統(tǒng)計(jì)分析圖將趨勢(shì)直 觀地反映出來(lái)，在圖中標(biāo)出警戒限度及糾偏限度。6.2根據(jù)趨勢(shì)分析結(jié)果可對(duì)環(huán)境控制區(qū)的微生物學(xué)質(zhì)量做出評(píng)估，并對(duì)警戒和糾偏限度做出相應(yīng)調(diào)整，并通知相關(guān)部門。7、警戒限度與糾偏限度的確定原則7.1警戒限度：用以指示環(huán)境中的微生物水平是否有偏離正常水平的可能性如超 過(guò)，至少應(yīng)予以調(diào)查。7.2糾偏限度：一旦超出，表示環(huán)境中微生物污染水平已嚴(yán)重偏離正常水平，對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量造成高度的污染風(fēng)險(xiǎn)必須立即采取糾偏措施。7.3制定依據(jù)：警戒限、糾偏限以正常監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并賦與

13、一定的安全系數(shù)。 即：警戒限度二平均值+ 2 c,糾偏限度二平均值+ 3(78、附件1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-01 )附件2微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-02 )附件3潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-03 )附件4微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室沉降菌監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-04)附件5潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-05 )附件6微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室浮游菌監(jiān)測(cè)記錄(R-SOP-ZL66-1-06 )附件7監(jiān)測(cè)點(diǎn)分布圖9、修訂歷史文件修訂、變更歷史原文件編號(hào)現(xiàn)文件編號(hào)生效日期修訂變更原因潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄監(jiān)測(cè)狀

14、態(tài)靜態(tài)監(jiān)測(cè)日期年月日D 級(jí)：0.5卩 m 3520000/m3; 5 卩 m29000 /m3監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告日期年月日監(jiān)測(cè)依據(jù)GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室(區(qū))懸浮粒子的測(cè)試方法監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)房間名稱平均值房間名稱平均值0.5 卩 m5卩m0.5 卩 m5卩m男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室*男二更潔具間*女二更物料氣閘室*緩沖間內(nèi)包材室*潔凈走廊潔凈走廊*中控室暫存室*模具室顆粒填充室*暫存室產(chǎn)氣劑前室1*物料緩沖間模具室*器具存放室預(yù)留間*器具清洗室配料室*潔具間器具存放室*噴干室器具清洗室*內(nèi)包裝室機(jī)械間取樣緩沖間取樣間備注：帶J”為一樓

15、潔凈區(qū)復(fù)核人:監(jiān)測(cè)人:微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)A 級(jí)：0.5 卩 m 3520/m3; 5 卩 m20/ m3監(jiān)測(cè)狀態(tài)靜態(tài)C 級(jí)：0.5卩 m 352000/m3 ; 5 卩 m2900/ m3監(jiān)測(cè)依據(jù)GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室(區(qū))懸浮粒子的測(cè)試方法監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)年區(qū)域名稱平均值年區(qū)域名稱平均值月日0.5 卩 m5卩m月日0.5 卩 m5卩m監(jiān)測(cè)人：復(fù)核人:潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測(cè)記錄監(jiān)測(cè)狀態(tài)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)日期年月日監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)D 級(jí)：v 100cfu/4小時(shí)， 90mm 平皿報(bào)告日期年月日監(jiān)測(cè)依據(jù)GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)菌落數(shù)平菌落數(shù)區(qū)域名

16、稱均 菌 落 數(shù)區(qū)域名 稱平均 菌落 數(shù)1#采 樣點(diǎn)（累 計(jì)）2#采樣點(diǎn) （累計(jì)）1#采 樣點(diǎn)（累 計(jì)）2#采樣點(diǎn) （累計(jì)）男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整 衣間配漿室稱量室制粒烘 干室備料室*男二 更潔具間*女二 更物料氣 閘室*緩沖 間內(nèi)包材*潔凈室走廊潔凈走 廊控中室*暫存室*模具 室顆粒填 充室*暫存 室產(chǎn)氣劑 前室1*物料 緩沖間模具室*器具 存放室預(yù)留間*器具 清洗室配料室*潔具 間器具存 放室*噴干 室器具清 洗室*內(nèi)包 裝室機(jī)械間取樣緩 沖間取樣間備注：帶“*”為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測(cè)人：復(fù)核人:沉降菌、溫濕度、壓差監(jiān)測(cè)記錄年二更c(diǎn)fu/皿操作 間cfu/皿操作 臺(tái)cf

17、u/皿相對(duì) 濕度%溫 度C壓差Pa備注月日121212復(fù)核人:監(jiān)測(cè)人:潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測(cè)記錄監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)D 級(jí)：w 200cfu/m3監(jiān)測(cè)日期年月日監(jiān)測(cè)狀態(tài)動(dòng)態(tài)報(bào)告日期年月日采樣點(diǎn)2個(gè)（面積w 100m2）采樣量200L/ 次監(jiān)測(cè)依據(jù)GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)區(qū)域名 稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m3區(qū)域名 稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m31#采 樣 占 八、2#采 樣 占八、1#采 樣 占 八、2#采 樣 占 八、1#采 樣 占 八、2#采 樣 占 八、1#采 樣 占 八、2#采 樣 占 八、男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整 衣間配漿室稱量室制粒烘 干室備料室*男二 更潔具間*女二 更物料氣*緩沖閘室間內(nèi)包材 室*潔凈 走廊潔凈走 廊控中室*暫存室*模具 室顆粒填 充室*暫存 室產(chǎn)氣劑前室1*物料 緩沖間模具室*器具 存放室預(yù)留間*器具 清洗室配料室*潔具 間器具存 放室*噴干 室器具清 洗室*內(nèi)包 裝室機(jī)械間取樣緩沖間取樣間備注：帶“*”為一樓潔凈區(qū)檢驗(yàn)人：復(fù)核人:附件6微生物潔凈實(shí)