尼羅羅非魚(yú)鹽堿選育二代幼魚(yú)耐受性研究.doc

尼羅羅非魚(yú)鹽堿選育二代幼魚(yú)耐受性研究 吳俊偉1，梁從飛1，筴金華2，張艷紅2，任炳琛2，王燕1，王映1，趙金良1 （1.上海海洋大學(xué)農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海xx06；2.中捷國(guó)家級(jí)羅非魚(yú)良種場(chǎng)，河北滄州061108） 基金項(xiàng)目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專(zhuān)項(xiàng)資金（CARS-49-4B）資助；上海高校知識(shí)服務(wù)平臺(tái)項(xiàng)目（ZF1206） 作者簡(jiǎn)介：吳俊偉（1992-），男，碩士研究生，從事水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究。E-mail：735415310qq. 通訊作者：趙金良（1969-），男，博士，教授，從事水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究。E-mail：jlzhaoshou. DOI：10.3969/j.issn.1004-6755.xx.07.004 摘要：采用急性致死試驗(yàn)方法，評(píng)估了尼羅羅非魚(yú)鹽堿選育二代幼魚(yú)的半致死鹽度、半致死（碳酸鹽）堿度與半致死鹽堿度。結(jié)果表明，選育二代幼魚(yú)96h半致死鹽度為21.809g/L；96h半致死堿度為8.514g/L。10g/L鹽度條件下，96h半致死堿度為5.925g/L；15g/L鹽度條件下，96h半致死堿度為4.583g/L；20g/L鹽度條件下，96h半致死堿度為1.897g/L。該結(jié)果為羅非魚(yú)耐鹽堿選育研究與養(yǎng)殖利用提供了基礎(chǔ)資料。 關(guān)鍵詞：尼羅羅非魚(yú)；選育二代；鹽堿度；半致死濃度；急性致死試驗(yàn) 隨著我國(guó)對(duì)內(nèi)陸淡水生態(tài)環(huán)境的重視與保護(hù)加強(qiáng)，淡水養(yǎng)殖利用水域?qū)⒚媾R短缺。另一方面，我國(guó)尚存在著大量未被利用的鹽堿水域，這類(lèi)鹽堿水域具有高鹽、高堿、高pH和復(fù)雜離子組成等特點(diǎn)，常規(guī)魚(yú)類(lèi)品種基本無(wú)法進(jìn)行養(yǎng)殖1。因此，培育出耐鹽堿能力強(qiáng)的新品種，對(duì)開(kāi)發(fā)利用鹽堿水域及發(fā)展水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)具有重要現(xiàn)實(shí)意義。尼羅羅非魚(yú)（Oreochromisniloticus）生長(zhǎng)快速、極易繁殖、耐受能力強(qiáng)，是羅非魚(yú)養(yǎng)殖中的最大品種2。研究表明，未經(jīng)過(guò)馴化尼羅羅非魚(yú)的最適生長(zhǎng)鹽度為5103，直接轉(zhuǎn)入的鹽度上限為184，緩慢轉(zhuǎn)入的鹽度上限為365。堿性毒性試驗(yàn)表明，尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)在pH為9.44、總堿度為41.6mmol/L條件下96h內(nèi)全部存活，對(duì)堿度的耐受能力高于常規(guī)淡水養(yǎng)殖種類(lèi)6，因此，尼羅羅非魚(yú)可以作為耐鹽堿養(yǎng)殖品種的培育對(duì)象。本課題組自xx年始開(kāi)展了尼羅羅非魚(yú)鹽堿馴化與選育試驗(yàn)，xx年、xx年分別得到了選育一代、選育二代。本研究以尼羅羅非魚(yú)選育二代幼魚(yú)為研究對(duì)象，通過(guò)急性致死試驗(yàn)，評(píng)估選育二代幼魚(yú)的鹽堿耐受能力。 1材料與方法 1.1試驗(yàn)材料 ）選育基礎(chǔ)群體分別取自上海海洋大學(xué)羅非魚(yú)種質(zhì)資源試驗(yàn)站的新吉富羅非魚(yú)選育后代（F16）、山東省淡水水產(chǎn)研究所轉(zhuǎn)引xx年由馬來(lái)西亞引進(jìn)的吉富羅非魚(yú)后代和河北中捷國(guó)家級(jí)羅非魚(yú)良種場(chǎng)于xx年轉(zhuǎn)引國(guó)內(nèi)1994年從菲律賓直接引進(jìn)的吉富品系后代（F13）。xx年6月，將當(dāng)年繁育魚(yú)苗（基礎(chǔ)群體）運(yùn)至河北中捷國(guó)家級(jí)羅非魚(yú)良種場(chǎng)，開(kāi)展鹽堿耐受性與馴化選育試驗(yàn)；xx年6月，由基礎(chǔ)群體繁殖獲得了選育一代，重復(fù)馴化選育試驗(yàn)；xx年6月，由選育一代繁殖獲得了選育二代。 1.2試驗(yàn)用水 ）單鹽組是通過(guò)良種場(chǎng)內(nèi)的鹽鹵水和地下水一定比例配制而成。單堿組是由NaHCO3分析純和良種場(chǎng)內(nèi)地下深井水配制而成。鹽堿混合組是先通過(guò)鹽鹵水和深井水配制成不同的鹽度，再加入一定比例的NaHCO3分析純，配制成各鹽堿梯度。配好的試驗(yàn)水體沉淀2d后，取出上層清水用于試驗(yàn)。試驗(yàn)水鹽度值用WYY-I型光學(xué)折射鹽度計(jì)測(cè)量，堿度值用HI83200型多參數(shù)水質(zhì)檢測(cè)儀測(cè)量。 1.3急性致死試驗(yàn) ）試驗(yàn)在室內(nèi)玻璃水族缸（0.3m0.7m0?5m）中進(jìn)行。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，各實(shí)驗(yàn)組濃度梯度設(shè)置如下：（1）單鹽組設(shè)5個(gè)濃度梯度（18、20、22、24、26g/L）；（2）單堿組設(shè)6個(gè)濃度梯度（2、4、6、8、10、12g/L）；（3）鹽堿混合組設(shè)9個(gè)濃度梯度（鹽度10、15、20g/L，堿度2、4、6g/L組合）。試驗(yàn)開(kāi)始前一天停止喂食，挑選體質(zhì)健康、規(guī)格相近的幼魚(yú)（0.60.7g），直接放入各試驗(yàn)組中，每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)放置50尾幼魚(yú)，設(shè)置3個(gè)重復(fù)組。采取微充氧方式保證水體中溶氧充足，試驗(yàn)期間不換水，注意觀(guān)察，及時(shí)撈出死魚(yú)。記錄放養(yǎng)后24h、48h、72h、96h幼魚(yú)死亡尾數(shù)。 1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 ）數(shù)據(jù)，并用SPSS22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)算在不同鹽度、堿度及鹽堿混合濃度下特定時(shí)間（24h，48h，72h，96h）的半致死濃度。不同處理間用單因素方差分析和Duncans多重比較進(jìn)行分析。 2結(jié)果與分析 2.1鹽度試驗(yàn) ）由表1可知，尼羅羅非魚(yú)選育二代幼魚(yú)在18g/L鹽度下96h內(nèi)全部存活；在20g/L鹽度下48h開(kāi)始死亡，96h死亡率約1/6；在22g/L鹽度下，24h內(nèi)開(kāi)始死亡，96h時(shí)死亡率超過(guò)一半；在24g/L鹽度下，24h內(nèi)就有大量幼魚(yú)死亡；在26g/L鹽度下，幼魚(yú)基本無(wú)法適應(yīng)。根據(jù)幼魚(yú)的致死情況，計(jì)算出選育二代24h，48h，72h，96h的半致死鹽度分別為23.078g/L，22.618g/L，22.203g/L，21.809g/L。 2.2堿度試驗(yàn) ）由表2可見(jiàn)，尼羅羅非魚(yú)選育二代幼魚(yú)在2、4、6g/L堿度下96h內(nèi)全部存活；在8g/L堿度下，24h內(nèi)有近1/3死亡，96h死亡率為2/5；在10g/L堿度下，24h內(nèi)已有近半數(shù)死亡，到96h死亡率為4/5；在12g/L堿度下，幼魚(yú)基本無(wú)法適應(yīng)。選育二代24h，48h，72h，96h的半致死堿度分別是9.541g/L，9.112g/L，8.824g/L，8.514g/L。 2.3鹽堿混合試驗(yàn) 2.3.110g/L鹽度下的鹽堿混合組由表3可見(jiàn)，在10g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)在堿度為2，4g/L時(shí)96h內(nèi)都不死亡；當(dāng)堿度為6g/L時(shí)，24h開(kāi)始死亡，96h死亡數(shù)目已超過(guò)試驗(yàn)魚(yú)總數(shù)的1/2。10g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)的96h半致死堿度為5.925g/L。 2.3.215g/L鹽度下的鹽堿混合組在15g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)在堿度為2g/L時(shí)96h內(nèi)都不死亡；當(dāng)堿度為4g/L時(shí)，幼魚(yú)24h后開(kāi)始死亡，96h死亡一半；堿度為6g/L時(shí)，12h內(nèi)就有死亡，96h死亡率約為4/5。15g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)的96h半致死堿度為4.583g/L。 2.3.320g/L鹽度下的鹽堿混合組在20g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)在堿度2g/L時(shí)12h內(nèi)就有死亡，96h死亡數(shù)目達(dá)到總數(shù)的3/5；在堿度4g/L時(shí)，12h內(nèi)就有大量幼魚(yú)死亡，24h幾乎全部死亡；堿度6g/L時(shí)，幼魚(yú)基本無(wú)法適應(yīng)。20g/L鹽度條件下，選育二代幼魚(yú)的96h半致死堿濃度為1.897g/L。 3結(jié)論與討論 ）鹽度急性致死試驗(yàn)表明，隨著鹽度升高，選育二代幼魚(yú)耐受性能表現(xiàn)下降，96h半致死鹽度為21.809g/L。與基礎(chǔ)群體幼魚(yú)和選育一代幼魚(yú)相比，選育二代幼魚(yú)比基礎(chǔ)群體（18.584g/L）、選育一代（21.691g/L）都有一定提高7-9，選育二代幼魚(yú)與選育一代半致死鹽度間差異不顯著，但與基礎(chǔ)群體幼魚(yú)的半致死鹽度間差異顯著。表明經(jīng)鹽堿馴化選育，尼羅羅非魚(yú)選育世代鹽度耐受性能有所提高。 ）堿度急性致死試驗(yàn)中，當(dāng)堿度達(dá)到8g/L時(shí)，選育二代幼魚(yú)才會(huì)開(kāi)始死亡，隨著堿度的升高，耐受值也在不斷下降。選育二代幼魚(yú)96h半致死堿度（8.514g/L）明顯高于基礎(chǔ)群體幼魚(yú)的半致死堿度（7.705g/L），略高于選育一代幼魚(yú)的半致死堿度（8.238g/L）8-9。選育二代幼魚(yú)和選育一代幼魚(yú)的堿度耐受性能間差異不顯著，與基礎(chǔ)群體幼魚(yú)的堿度耐受性能間差異顯著。 ）在鹽堿混合試驗(yàn)中，幼魚(yú)死亡率隨鹽堿度的升高而增大。當(dāng)鹽度從10g/L提高到15、20g/L時(shí)，選育二代幼魚(yú)96h半致死堿度分別為5?925g/L，4.583g/L，1.897g/L，堿度耐受值會(huì)隨鹽度的升高而迅速下降。相較于選育一代幼魚(yú)的96h半致死堿度（5.766g/L，4.311g/L，1?872g/L）有一定的提高，較基礎(chǔ)群體幼魚(yú)的96h半致死堿度（鹽度為10、15g/L時(shí)，半致死堿度為4.435g/L，2.930g/L）則有較大的提高9。有研究認(rèn)為，鹽堿混合對(duì)魚(yú)類(lèi)的毒理作用并不是單個(gè)因子的作用，而是幾個(gè)方面共同作用的結(jié)果10-13。在本試驗(yàn)中，同一鹽度下，幼魚(yú)死亡率隨堿度升高增加；同一堿度下，鹽度越高，幼魚(yú)死亡尾數(shù)越多，這也說(shuō)明了鹽度和堿度之間對(duì)尼羅羅非魚(yú)存活率存在著協(xié)同作用。 參考文獻(xiàn)： 1 王慧，耿隆坤，房文紅，等.中國(guó)對(duì)蝦往西北內(nèi)陸咸水水域移植的生產(chǎn)性試養(yǎng)研究J.海洋漁業(yè)，1997，19（1）：9-12 2葉婉初，陳大剛，馬琳.尼羅羅非魚(yú)（OreochromisniloticaLinn.）幼魚(yú)滲透壓調(diào)節(jié)的初步研究J.青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，1989，19（2）：88-98 3AlfredoMH，HectorSL.Bloodgasometrictrendsinhybrid-redtilapiaOreochromisniloticus（Linnaeus）O.mossambicus（Peters）whileadaptingtoincreasingsalinityJ.JournalofAquacultureintheTropics，xx，2：101-112 4Al-AmoudiMM.AlimationofmerciallyculturedOreochromisspeciestoseawateranexperimentalstudyJ.Aquaculture，1987，65：333-342 5PayneAI，CollinsonRI.AparisonofthebiologicalcharacteristicsofSarotherodonniloticus（L.）withthoseofSarotherodonaureus（Steindachner）andothertilapiaofthedeltaandlowerNileRiverJ.Aquaculture，1983，30（1）：335-351 6雷衍之，董雙林，沈成鋼.碳酸鹽堿度對(duì)魚(yú)類(lèi)毒性作用的研究J.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1985，9（2）：171-183. 7趙麗慧，筴金華，張艷紅，等.不同鹽、堿度下3品系尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)網(wǎng)箱養(yǎng)殖的生長(zhǎng)比較J.南方水產(chǎn)科學(xué)，xx，9（4）：1-7 8梁從飛，趙麗慧，筴金華，等.尼羅羅非魚(yú)基礎(chǔ)群體與選育一代幼魚(yú)鹽堿度耐受性比較J.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，xx，42（8）：227-231 9趙麗慧，筴金華，張艷紅，等.3種品系尼羅羅非魚(yú)（Oreochromisniloticus）鹽堿耐受性和生長(zhǎng)比較J.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，xx，35（5）：26-32 10尤琦，尤洋，胡庚東.運(yùn)用正交設(shè)計(jì)法檢驗(yàn)鹽度和堿度對(duì)大銀魚(yú)的聯(lián)合毒性J.西南民族大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2000，26（2）：192-194 11LeeCL，F(xiàn)ielderDR.Theeffectofsalinityandtemperatureonthelarvaldevelopmentofthefreshwaterprawn，MacrobrachumaustralienseHolthus，1950fromSouth-easternQueensland，AustraliaJ.Aquaculture，1981，26（1/2）：167-172 12DeSilvaCD，Prema