DB22-T 3646-2024 長(zhǎng)白山林蛙油鑒別高效液相色譜蛋白質(zhì)特征圖譜法

22AuthentificationofChangbaimountainRanaeOviductus-highDB22/T3646—2024I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的GB/T20001.4—2015《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件主要起草人：王詩(shī)涵、王志寒、王永生、王道君DB22/T3646—20241長(zhǎng)白山林蛙油鑒別高效液相色譜蛋白質(zhì)特征圖譜法GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和3.1長(zhǎng)白山林蛙油ChangbaimountainRana蛙科動(dòng)物中國(guó)林蛙（RanatemporariachensinensisDavid）雌中藥特征圖譜可采用特征峰保留時(shí)間評(píng)價(jià)，供試品特征圖譜的相關(guān)色譜峰應(yīng)與相應(yīng)的參照物色譜峰保留時(shí)間相同。特征峰相對(duì)保留時(shí)間規(guī)定值范圍一般應(yīng)不超過(guò)±10%。實(shí)驗(yàn)以溶菌酶作參照物，通過(guò)分析林蛙油蛋白質(zhì)特征峰與參照峰的相對(duì)保留時(shí)間確定目標(biāo)峰，根據(jù)指紋圖譜軟件提取長(zhǎng)白山林蛙油中蛋白質(zhì)組成成分的特征峰，建立蛋白質(zhì)對(duì)照特征圖譜，進(jìn)行警示——使用本文件的人員應(yīng)有正規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本文件并未指出所有可能的安全問(wèn)題。使用者有責(zé)任采取適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證5.2乙腈（C2H3N）:色譜純。5.5溶菌酶：純度＞98%。DB22/T3646—202425.9鹽酸胍（CH5N3.HCl）。）：）：7.2冷凍離心機(jī)：0rpm～12000rpm，0℃~4℃。7,4旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。7.5粉碎機(jī)：頻率：50Hz～60Hz。7.6磁力攪拌器。7.7天平：感量：0.001g和0.007.16微孔濾膜：0.45μm。應(yīng)符合《中華人民共和國(guó)藥典》（2020年版）一部中哈DB22/T3646—202439.2.1取試樣0.5g，稱定，置于具塞錐形瓶中，加磷酸鹽緩沖9.2.4上清液（9.2.3）在50℃下使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收9.2.5取濃縮液（9.2.4）緩慢加入30mL60%飽和度的硫酸9.2.6混合物（9.2.5）在0℃~4℃靜置1h后，以8000r/min離心29.2.8取溶液（9.2.7），使用濾9.3參照物溶液的制備9.3.1對(duì)照品儲(chǔ)備液配制充分搖勻，配置成濃度為1.3mg/mL的對(duì)照品儲(chǔ)備液，0℃~4℃冰箱保存，保存期30天。9.3.2對(duì)照品工作溶液配制的參照物溶液，吸取參照物溶液，使用濾膜過(guò)濾至樣品瓶，于0℃~4℃冰箱保存，作為參照物溶液9.4試驗(yàn)條件高效液相色譜儀，色譜柱，流動(dòng)相：含0.085%三氟乙酸（v/v）的乙腈（A）-含0.1%三氟乙酸），min0DB22/T3646—202449.5試樣測(cè)定9.6數(shù)據(jù)處理10.2以樣品相對(duì)保留時(shí)間均值（n≥6）標(biāo)定共有特征峰，以參照物溶菌酶保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)的峰為SDB