微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)導(dǎo)學(xué)案高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（課時1）一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1.明確微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵，掌握培養(yǎng)基配制的基礎(chǔ)知識。2.討論并掌握無菌技術(shù)的實驗操作方法。3.討論并掌握微生物的純培養(yǎng)的方法。預(yù)學(xué)案——教材研讀（自主學(xué)習(xí)）一、培養(yǎng)基的配制1．培養(yǎng)基：人們按照微生物對_______的不同需求，配制出供其_________的營養(yǎng)基質(zhì)。2．培養(yǎng)基的種類3．培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成：各種培養(yǎng)基一般都含有、、和無機鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還需要滿足微生物生長對、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及的需求。二、無菌技術(shù)1．獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵：防止__________。2．消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體或內(nèi)部一部分微生物使用的理化方法殺死物體內(nèi)外的微生物，包括常用方法_____消毒法、巴氏消毒法、________消毒法、紫外線消毒法______滅菌、干熱滅菌、_____滅菌適用對象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等(1)對實驗操作的、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行。(3)實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與接觸。(4)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在并在附近進(jìn)行。三、微生物的純培養(yǎng)1．純培養(yǎng)：在微生物學(xué)中，將接種于內(nèi)，在合適條件下形成的含的群體稱為培養(yǎng)物。由所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得的過程就是純培養(yǎng)。2．微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、、、分離和培養(yǎng)等步驟。3．酵母菌的純培養(yǎng)(1)菌落：分散的微生物在適宜的表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的。(2)獲得單菌落的方法：法和法。導(dǎo)學(xué)案——課堂探究（疑難點撥）探究一：培養(yǎng)基的配制標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基特點作用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物的分離與鑒定，活菌計數(shù)，保藏菌種半固體培養(yǎng)基容器放倒不致流出，劇烈震動則破散觀察微生物的運動、分類鑒定液體培養(yǎng)基不加凝固劑常用于工業(yè)生產(chǎn)功能選擇培養(yǎng)基根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求配制選擇分離鑒別培養(yǎng)基加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑鑒定來源天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基用已知的化學(xué)物質(zhì)配制分類鑒定1、培養(yǎng)基種類分類(1)瓊脂僅作為凝固劑，(“能”、“不能”)為微生物生長提供能量和碳源。(2)病毒為非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物，(“能”、“不能”)利用人工培養(yǎng)基來培養(yǎng)。2．培養(yǎng)基的成分及功能營養(yǎng)物質(zhì)作用功能主要來源碳源能為微生物的代謝提供碳元素構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機酸等氮源能為微生物的代謝提供氮元素合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無機氮源：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等水是生命活動所必需的不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定外界攝入無機鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無機化合物代表型微生物的營養(yǎng)和能量來源微生物碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌CO2NHeq\o\al(＋,4)、NOeq\o\al(－,3)等光能硝化細(xì)菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖類等有機物N2有機物大腸桿菌糖類、蛋白質(zhì)等有機物蛋白質(zhì)等有機物【基礎(chǔ)過關(guān)】(1)是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源。()(2)培養(yǎng)霉菌時一般需將培養(yǎng)基調(diào)至堿性。()(3)培養(yǎng)厭氧型微生物時，除需要提供無機碳源之外，還需要提供無氧的條件。()(4)凡碳源都提供能量。（）(5)除水以外的無機物只提供無機鹽。（）(6)培養(yǎng)基只能用于培養(yǎng)微生物。（）探究二：無菌技術(shù)1．消毒適用對象：操作的、操作者的和手等。項目主要方法應(yīng)用范圍消毒消毒法62～65℃消毒30min或80～90℃處理30s～1min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體消毒法100℃煮沸5～6min家庭餐具等生活用品消毒紫外燈照射30min(損傷細(xì)菌的DNA)接種室、接種箱或超凈工作臺化學(xué)藥劑消毒用體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的、碘酒皮膚、傷口、動植物組織表面消毒、空氣、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿2．滅菌適用對象：用于微生物培養(yǎng)的、用具和等。項目主要方法應(yīng)用范圍滅菌滅菌直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具，試管口或瓶口等滅菌干熱滅菌箱中，160～170℃的熱空氣中維持2～3h耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿等)、金屬用具等高壓蒸汽滅菌(滅菌)100kPa、121℃維持15～30min培養(yǎng)基等3.消毒和滅菌的比較項目消毒滅菌作用強度較為的物理、化學(xué)因素消滅微生物的數(shù)量物體表面或內(nèi)部微生物物體內(nèi)外的微生物能否消滅芽孢、孢子消滅芽孢能消滅芽孢和孢子適用對象操作空間、操作者的衣著和手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等常用方法消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法、、4.無菌技術(shù)可用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染?！净A(chǔ)過關(guān)】(1)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。()(2)滅菌相比消毒對微生物的殺滅更徹底。()(3)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。()提示：培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌，而接種環(huán)則采用灼燒滅菌。(4)培養(yǎng)基最常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。()(5)接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌。（）(6)在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，防止被微生物感染。（）(7)使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。（）探究三:探究·實踐——酵母菌的純培養(yǎng)原理：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是。2.實驗方法：采用法和法將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。3.實驗步驟(1)制備培養(yǎng)基：①；②；③?！局仉y強調(diào)】Ⅰ.調(diào)PH順序：如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成后，滅菌之進(jìn)行操作。Ⅱ.倒置放置目的：平板冷卻凝固后，要將平板。既可以防止水分過快蒸發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(2)接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面的操作，將聚集的菌種逐步到培養(yǎng)基表面。經(jīng)過數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。【重難強調(diào)】Ⅰ．每次灼燒接種環(huán)的時間和目的灼燒時期目的取菌種前每次劃線前殺死上次劃線時殘留菌種，使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端，從而使，直至得到單個細(xì)胞接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者Ⅱ．在第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的端開始劃線的原因是：劃線后，線條末端酵母菌的數(shù)目比線條起始處要，每次從上一次劃線的末端開始，能使酵母菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步，最終能得到由個細(xì)胞繁殖而來的菌落。Ⅲ．最后一次劃線與第一次的劃線相連。因為最后一次劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個的細(xì)胞，如果與第一次劃線相連則了細(xì)菌的數(shù)目，得不到純化的效果。(3)培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個的平板，放入℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。4．實驗結(jié)果的分析(1)培養(yǎng)未接種的培養(yǎng)基的目的是檢測(或檢查)。未接種的培養(yǎng)基表面若有菌落生長，則說明培養(yǎng)基，應(yīng)該重新制備；若無菌落生長，則說明。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。5．平板劃線法接種菌種時，可防止雜菌污染的操作(1)接種前將接種環(huán)放在。(2)劃線操作在旁進(jìn)行。(3)接種環(huán)蘸取菌液前后，要將試管口通過。(4)劃線時將培養(yǎng)皿的皿蓋打開一條，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面劃線，劃線后?！净A(chǔ)過關(guān)】(1)平板劃線操作中，劃完一個區(qū)域后要將接種環(huán)灼燒，再劃下一個區(qū)域。()(2)平板劃線法接種時，每一次劃線前都要蘸取菌種。()(3)倒平板時將培養(yǎng)皿的皿蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿。（）1微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)固學(xué)案——課后訓(xùn)練（能力提升）1.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是()A．按功能劃分培養(yǎng)基，有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基B．所有培養(yǎng)基都含有水、無機鹽、碳源和氮源C．培養(yǎng)乳酸菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素D．牛肉膏蛋白胨只能提供氮源，不能提供碳源和無機鹽2.不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要各不相同。下列有關(guān)一種以CO2為唯一碳源的自養(yǎng)微生物營養(yǎng)的描述，不正確的是()A．氮源物質(zhì)為該微生物提供必要的氮元素B．CO2既是碳源物質(zhì)也是該微生物的能源物質(zhì)C．無機鹽是該微生物不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)D．水是培養(yǎng)該微生物的培養(yǎng)基成分之一3.下列有關(guān)消毒和滅菌的說法正確的是()A．接種環(huán)、接種針、鑷子等金屬用具以及玻璃器皿只能用灼燒滅菌B．干熱滅菌法是利用高溫使蛋白質(zhì)等變性，從而使微生物喪失活性C．針對某些實驗器具、餐具、飲用水可以采用巴氏消毒法D．用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源屬于物理消毒法4.下列表述正確的是（）A.微生物的培養(yǎng)基中都必須加入碳源、氮源、無機鹽、水及特殊營養(yǎng)物質(zhì)

B.無菌技術(shù)包括對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行滅菌

C.微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受pH、氧、滲透壓的影響

D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行消毒，以免污染環(huán)境5.下列有關(guān)固體培養(yǎng)基的敘述，不正確的是（）A.純化微生物和植物組織培養(yǎng)時常用的是固體培養(yǎng)基

B.在固體培養(yǎng)基中加入水稀釋直接用于擴大化培養(yǎng)細(xì)菌

C.利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來初步判斷和鑒別細(xì)菌的類型

D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時，可以形成肉眼可見的單個菌落6.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次是①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥ C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤7.微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進(jìn)行無菌操作，防止雜菌污染，請分析下列操作中錯誤的是（）①煮沸消毒可以殺死微生物的細(xì)胞和部分芽孢

②接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行

③進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時，對所取植物的器官組織要進(jìn)行消毒

④家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進(jìn)行滅菌

⑤培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A.①③ B.②④ C.③⑤ D.④⑥8.下列關(guān)于微生物實驗操作的敘述，錯誤的是（）A.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.接種前后，接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進(jìn)行灼燒

C.接種后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染

D.菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基9.下列有關(guān)平板劃線操作的描述，錯誤的是()A．將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．接種環(huán)在平板上劃線的位置是隨機的C．在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D．最后一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連10.如圖為實驗室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是（）A.①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

B.步驟①中待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋

C.步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理

D.劃線接種結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)11.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)過程的說法正確的是（）A.培養(yǎng)基中同一種物質(zhì)可能既做碳源又做氮源

B.配制培養(yǎng)基時應(yīng)先滅菌再調(diào)PH

C.倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放在一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

D.只有平板劃線法接種培養(yǎng)后可獲得單菌落12.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,錯誤的是（）A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染

B.培養(yǎng)基必須含有碳源、氮源、水、無機鹽及生長因子

C.平板劃線法和稀釋涂布平板法都可對微生物進(jìn)行分離

D.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落,造成污染13．下表是對四種生物的能源、碳源、氮源、代謝類型的描述，正確的是()選項項目硝化細(xì)菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO2糖類等糖類等CO2C氮源NH3N2N2NOeq\o\al(\s\up1(－),\s\do1(3))D代謝類型自養(yǎng)好氧型異養(yǎng)厭氧型自養(yǎng)好氧型自養(yǎng)好氧型14.酵母菌純培養(yǎng)過程中，關(guān)于接種操作的敘述不正確的是（

）A.取下培養(yǎng)液試管棉塞后需將試管口通過火焰

B.接種環(huán)在火焰上燒紅后應(yīng)盡快蘸取菌液

C.在火焰附近打開培養(yǎng)皿，迅速完成劃線

D.每兩次劃線之間均需灼燒接種環(huán)15.有關(guān)純化酵母菌實驗操作的敘述，錯誤的是()A.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于菌液C.每次劃線前，灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種D.劃線結(jié)束后，灼燒接種環(huán)能及時殺死接種環(huán)上的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者16.下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細(xì)菌B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長C．向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長D．在半固體培養(yǎng)基中接種細(xì)菌培養(yǎng)后可以觀察其運動17.某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述不正確的是()18．(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、________和無機鹽。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進(jìn)行________處理。(2)在配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進(jìn)行清洗和________；空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)________，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。(4)分離純化微生物最常使用的接種方法是_____________和____________。(5)在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_____________________________________________________________________________。19.下表為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的成分列表，請據(jù)此回答下列問題。成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5g1g0.5g100mL(1)蛋白胨在培養(yǎng)基中提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)是____________________________。(2)上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是____________________。要用此材料配制觀察細(xì)菌菌落狀況的培養(yǎng)基，還需添加的成分是_______________。(3)表中各成分含量確定的原則是_______________________。(4)培養(yǎng)基配制好后，分裝前應(yīng)進(jìn)行的工作是__________________。(5)從配制培養(yǎng)基直到培養(yǎng)完成，所采用的預(yù)防雜菌污染的方法是___________________________________________________________。20.生物技術(shù)在日常生活中應(yīng)用非常廣泛，請回答下列問題：(1)微生物的培養(yǎng)基為微生物生長提供的營養(yǎng)成分往往包括______________________和特殊營養(yǎng)物質(zhì)五大類，制作果酒時，酵母菌的培養(yǎng)基是____________________。(2)接種時接種環(huán)在使用前要先灼燒，其目的是_______________________，平板劃線操作中，每次劃線之間也要灼燒接種環(huán)，其目的是_____________________________________，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，其原因是_____________________________________________________________________________________________________________________。(3)嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵，直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物，通常所指的發(fā)酵條件包括_______________________。在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是________________________________。1.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（課時1）答案預(yù)學(xué)案——教材研讀（自主學(xué)習(xí)）一、培養(yǎng)基的配制1．營養(yǎng)物質(zhì)生長繁殖3．水、碳源、氮源PHO2二、無菌技術(shù)1．雜菌污染2．消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括_芽孢和孢子常用方法__煮沸消毒法、巴氏消毒法、_化學(xué)藥物消毒法、紫外線消毒法_濕熱滅菌、干熱滅菌、_灼燒_滅菌適用對象操作空間、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等(1)空間消毒(2)滅菌(3)周圍的物品(4)超凈工作臺酒精燈火焰三、微生物的純培養(yǎng)1．培養(yǎng)基特定種類微生物單一個體繁殖純培養(yǎng)物2．滅菌接種3．(1)固體培養(yǎng)基子細(xì)胞群體(2)平板劃線法稀釋涂布平板法導(dǎo)學(xué)案——課堂探究（疑難點撥）探究一：(1)不能(2)不能【基礎(chǔ)過關(guān)】××××××探究二：1.空間衣著巴氏煮沸紫外線酒精2．器皿、接種培養(yǎng)基灼燒干熱濕熱3.溫和強烈一部分所有部分全部煮沸灼燒滅菌干熱滅菌濕熱滅菌【基礎(chǔ)過關(guān)】√√×√×√√探究三：1.菌落2.平板劃線稀釋涂布平板3.(1)①配制培養(yǎng)基②滅菌③倒平板【重難強調(diào)】Ⅰ.前Ⅱ.倒置(2)連續(xù)