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文檔簡介
幾種增加小鼠骨髓染色體中期細胞數(shù)方法的比較【摘要】目的:探索提高小鼠骨髓染色體中期分裂相的獲得的方法。方法:小鼠隨機分成3組,對照組、兩次注射秋水仙素組和酵母組秋水仙素組,每組分別用注射沖洗法、剪碎靜置法和剪碎震蕩法收集骨髓細胞。結果:與對照組相比,兩次注射秋水仙素組和酵母組秋水仙素組中期細胞有明顯增加;與注射沖洗法相比,剪碎法獲得的中期細胞數(shù)有明顯增加。【關鍵詞】小鼠染色體中期細胞染色體的結構和數(shù)目是研究生物體遺傳、變異、發(fā)育的基礎,而動物的骨髓細胞具有分裂旺盛、數(shù)量多等的特點,可以直接進行染色體標本的制備,不需體外培養(yǎng)和無菌操作,還可以真實反映完整機體所受的環(huán)境影響[1]。染色體是生物體遺傳信息的載體,在細胞分裂時期(體細胞的有絲分裂和生殖細胞的減數(shù)分裂)特定存在,對處于分裂期的細胞經秋水仙素處理,阻斷其紡錘絲微管的組裝,使細胞分裂停止于中期,此時染色體達到最大收縮,具有典型的形態(tài)。染色體制備對人類遺傳病、血液病的研究和診斷有著重要的臨床意義,在醫(yī)學細胞生物學和醫(yī)學遺傳學中是經典的實驗項目之一。在教學中用,學生可以通過實驗了解小鼠染色體的數(shù)目及形態(tài)特征,掌握中期染色體制備的實驗原理和方法。該實驗操作步驟簡單,但容易出現(xiàn)中期分裂相少、染色體過于短小、染色體分散不好、染色體邊緣發(fā)毛等情況[2],另外該實驗需要實驗前預處理,且耗時時間長,不利于在教學中推廣。本文參考比較各種改進方法,先總結如下。1材料與方法1.1實驗動物昆明種小鼠45只,體重(22±2)g,由新鄉(xiāng)醫(yī)學院實驗動物中心提供。1.2實驗儀器解剖盤;眼科剪;低速臺式離心機(上海手術器械廠);電子天平(上海衡平儀器儀表廠);雙目光學顯微鏡;電熱恒溫水浴箱(上海躍進醫(yī)療器械廠);隔水式培養(yǎng)箱(上海躍進醫(yī)療器械廠);震蕩器(常州國宇儀器制作有限公司)。1.3實驗試劑秋水仙素(上海撫生生物科技有限公司);酵母粉;葡萄糖粉;甲醇;冰醋酸(國藥集團化學試劑有限公司);低滲液(0.075mol/LKcl)、生理鹽水;Giemsa體標本制備中的失誤與對策[J].生物學通報,2003,38(6):53-54.[3]崔向清,馬鑫,李麗
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