高中生物教材選修一必背

本文格式為Word版，下載可任意編輯——高中生物教材選修一必背高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)

專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一果酒和果醋的制作

1、果酒菌種：附在葡萄皮上的野生型酵母菌（真菌，兼性厭氧，主要出芽生殖還有孢子生殖）

2、在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。

在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。

3、制酒條件：溫度（18～25℃），發(fā)酵液缺氧呈酸性（酵母菌可以生長繁殖，而其他微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境）。

4、葡萄酒浮現(xiàn)深紅色的原因：紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液。5、果醋菌種：醋酸菌（原核生物），代謝類型異養(yǎng)需氧型。

6、有兩條途徑生成醋酸：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O

7、制醋條件：①深層發(fā)酵時，短時間不通氧，醋酸菌死亡。②溫度：30～35℃。8、流程：

挑揀葡萄→沖洗→榨汁→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵

果酒果醋

9、裝置：充氣口制酒時關(guān)閉；制醋時，連續(xù)輸入氧氣。排氣口長而彎曲的膠管目的是防止空氣中微生物的污染；開口向下的目的是排出酒精發(fā)酵時產(chǎn)生的二氧化碳。出料口是用來取樣檢測。

葡萄汁只裝2/3，留1/3空間的目的是讓酵母菌先有氧呼吸進行繁殖。

10、若用瓶子做裝置：制酒時，要每天擰松瓶蓋2～4次，目的是排二氧化碳；制醋時，將瓶口開啟，蓋上紗布。

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11、所有用具清洗后晾干或清洗后用70%的酒精消毒。

先沖洗葡萄再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污染的機遇。12、酒精檢驗：酸性（3mol/L的H2SO4）重鉻酸鉀→灰綠色。醋酸檢驗：嗅味和品嘗（比較pH）

13、從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？

榨汁機要清洗清白，并晾干。發(fā)酵瓶要清洗清白，用體積分數(shù)70%的酒精消毒，或用洗潔精洗滌。裝入葡萄汁后，封閉充氣口。

課題二腐乳的制作

1、菌種：多種微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（真菌，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。孢子生殖。）傳統(tǒng)制作毛霉來自空氣；現(xiàn)代生產(chǎn)將優(yōu)質(zhì)毛霉菌種直接接種在豆腐上。

2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。

3、試驗流程：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制（加鹽之前為前期發(fā)酵，目的是創(chuàng)造條件讓毛霉生長，使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同作用，生成腐乳的香氣。）

4、所用豆腐的含水量為70％左右，水分過多則腐乳不易成形。豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。

5、溫度：15～18℃。

6、加鹽：逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些?？刂汽}的用量（豆腐：鹽=5:1）：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味。

食鹽的作用：1.抑制微生物生長，避免腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆腐變硬3.調(diào)味7、鹵湯：由酒及各種香辛料配制而成的。

8、鹵湯中酒的含量：12%左右。作用：1.防止雜菌污染2.賦予腐乳風味3.酒精含量過高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，不足以抑制微生物生長，導致豆腐腐敗。

9、香辛料的作用：1.調(diào)味2.殺菌

10、防止雜菌污染的措施：①玻璃瓶，洗凈后用沸水消毒。②加鹵湯后，用膠條將瓶口密封。③封瓶時，將瓶口通過酒精燈的火焰。

11、影響腐乳風味的因素：鹽、酒、香辛料、豆腐含水量。

12、腐乳外部致密的“皮〞是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的毛霉菌絲，它能形成

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腐乳的“體〞，使腐乳成形。

課題三制作泡菜

1、菌種：乳酸菌（代謝類型異養(yǎng)厭氧，包括乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。

2、流程測定亞硝酸鹽含量原料加工加鹽修整、洗滌晾曬、切分配制鹽水條狀或片狀泡菜鹽水參與調(diào)味料，并裝壇發(fā)酵成品3、配制鹽水：水：鹽=4:1；煮沸冷卻（殺菌和去除溶解氧）

4、用水封閉壇口起什么作用？（保證發(fā)酵的無氧環(huán)境）不封閉有什么結(jié)果？（①有氧會抑制無氧呼吸，②雜菌污染）

5、泡菜腌制過程中，要注意控制腌制時間、溫度和食鹽用量。溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短，易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后亞硝酸鹽含量開始降低，故在10天之后食用最好。

6、亞硝酸鹽：白色粉末，易溶于水，用作食品添加劑。

膳食中的絕大部分亞硝酸鹽隨尿排出，只有在特定的條件（適合的pH、溫度和一定的微生物作用），才會轉(zhuǎn)變成致癌物――亞硝胺，它對動物還具有致畸和致突變作用。

7、測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。

提取劑：氯化鎘、氯化鋇。

氫氧化鋁乳液：吸附泡菜汁中雜質(zhì)，使泡菜汁透明澄清。氫氧化鈉：中和過多的酸，制造弱堿性環(huán)境

8、含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。9、醋瓶或啤酒瓶內(nèi)形成的白膜是醋酸菌；泡菜壇內(nèi)的白膜是酵母菌。

專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

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課題一微生物的試驗室培養(yǎng)

1、培養(yǎng)基：人們依照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

培養(yǎng)基依照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基（參與凝固劑瓊脂，在其表面可形成菌落）。

·依照用途，可分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中參與某種指示劑或化學藥品，用以鑒別不同類別的微生物。

2、培養(yǎng)基的化學成分：水、無機鹽、碳源、氮源。還要滿足微生物生長對PH、特別營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。

碳源：提供碳元素。如CO2（自養(yǎng)生物用）、糖類（異養(yǎng)微生物用）。

氮源：提供氮元素。如N2（固氮菌）、NH3（硝化細菌）、NO3、NH4（自養(yǎng)微生物）、牛肉膏、蛋白胨（異養(yǎng)微生物）等。

特例：培養(yǎng)乳酸桿菌加維生素，培養(yǎng)霉菌須將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物需提供無氧條件。

3、無菌技術(shù)——獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，有效避免操自身被微生物感染。

4、消毒指使用較為溫柔的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）。分為煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高溫的液體）、化學藥劑（如酒精、氯氣、石炭酸等）消毒、紫外線消毒。

5、滅菌是指使用猛烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。分為灼燒滅菌（接種環(huán)、接種針等金屬工具、試管口）、干熱滅菌（吸管、培養(yǎng)皿等玻璃器皿、金屬用具，所用器械是干熱滅菌箱）、高壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基、無菌水等，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋）。

滅菌時物品不能擺得太擠，目的是避免阻礙熱氣流通。

6、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基方法步驟：計算、稱量、溶化（包括定容和調(diào)pH）、滅菌、倒平板。

7、倒平板操作的步驟：拔棉塞→瓶口迅速通過火焰→將培養(yǎng)皿開啟一條縫，倒培養(yǎng)基（培養(yǎng)皿的皿蓋始終在手中）→冷卻凝固→倒置平板（此后以后一直倒置）

8、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

答：既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

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9、平板劃線法只能得到單個的菌落，不能計數(shù)。劃線時不要將最終一區(qū)的與第一區(qū)相連。

操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終止后，接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少；劃線操作終止時，依舊需要灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操。

在作其次次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

10、稀釋涂布平板法不僅能得到單個的菌落，還能計數(shù)。

稀釋涂布的所有操作都應(yīng)在火焰附近進行。涂布器浸在酒精中，然后灼燒。11、菌種保存

頻繁使用：臨時保藏（接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，4℃冰箱，每3～6個月，要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。）

長期保存：甘油管藏（－20℃的冷凍箱中）。

課題二土壤中分解尿素的細菌的分開與計數(shù)

1、尿素：只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細菌之所以能分解尿素，是由于他們能合成脲酶。

2、微生物的篩選應(yīng)用的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫3、測定微生物數(shù)量的常用方法：稀釋涂布平板法（一般設(shè)置3～5個平板，選擇菌

度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。

落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，）和顯微鏡直接計數(shù)、濾膜法。

4、流程：土壤取樣（在距地表約3～8cm的土壤層取樣，取樣用具需滅菌）→樣品的稀釋（稀釋程度細菌>放線菌>真菌）→微生物的培養(yǎng)與觀測（細菌30~37℃1~2天；放線菌25~28℃5~7天；霉菌25~28℃3~4天）

5、菌落特征：形狀、大小、隆起程度、顏色。6、計算公式：

每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數(shù)

7、鑒別方法：加酚紅指示劑，變紅（細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，pH升高）

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課題三分解纖維素的微生物的分開

1、棉花是自然界中纖維素含量最高的自然產(chǎn)物，商品纖維素：水溶性的羧甲基纖維素鈉（CMC—Na）、不溶于水的微晶纖維素（Avicel）。

2、纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。

3、篩選方法——剛果紅（CR）染色法。

剛果紅與纖維素等多糖物質(zhì)形成紅色復合物，但并不和纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅－纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

一種是先培養(yǎng)微生物，再參與剛果紅進行顏色反應(yīng)（先加CR，倒去CR后再加Nacl，目的是洗去結(jié)合不牢的CR）；另一種是在倒平板時就參與剛果紅（在培養(yǎng)基中參與CR，混勻后倒平板）。

方法一缺點是操作繁瑣，參與剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點是顯示出的顏色反應(yīng)的就是纖維素分解菌。方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是顯示出的顏色反應(yīng)的可能是纖維素分解菌或淀粉分解菌；另一缺點是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，使纖維素分解菌不易區(qū)分。

4、分開分解纖維素的微生物的試驗流程

土壤取樣（可將濾紙埋在土壤）→選擇培養(yǎng)（此步可省略）→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑揀產(chǎn)生透明圈的菌落

5、對分解纖維素的微生物進行了初步的篩選后，只是分開純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的試驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量的測定。

專題三植物的組織培養(yǎng)技術(shù)課題一菊花的組織培養(yǎng)

1、愈傷組織：細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。

2、脫分化：由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，也叫去分化。3、再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官

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的過程。

4、植物組織培養(yǎng)的基本過程體的植物組離織、器官或細胞

人為使用植物激素控制

移植

——→試管苗———→完整的植物體5、影響植物組織培養(yǎng)的因素

①材料：植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響試驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝。培育無病毒作物，選莖尖分生區(qū)細胞。

②營養(yǎng)：MS培養(yǎng)基（含有大量元素、微量元素、有機物）③激素：使用順序先生長素，后細胞分裂素先細胞分裂素，后生長素同時使用試驗結(jié)果有利于分裂但不分化細胞既分裂也分化分化頻率提高

生長素／細胞分裂素比值與結(jié)果比值高時比值低時比值適中促根分化，抑芽形成促芽分化，抑根形成促進愈傷組織生長組織培養(yǎng)脫分化愈傷組織組織培養(yǎng)再分化根、芽等器官④環(huán)境條件：PH、溫度、光等。菊花的組織培養(yǎng)，pH5.8，溫度18~22℃，并且每日用日光燈照射12h。.

6、菊花組織培養(yǎng)的操作流程

①配制MS固體培養(yǎng)基（配制各種母液4℃保存，大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù)，計算用量；配制培養(yǎng)基，可以不添加植物激素；高壓蒸汽滅菌）→②外植體的消毒（流水沖洗→洗衣粉+軟刷刷洗→流水沖洗20min→無菌吸水紙吸干外植體表面→體積分數(shù)為70%的酒精中搖動2～3次，持續(xù)6~7s→無菌水清洗→無菌吸水紙吸干外植體表面→質(zhì)量分數(shù)為0.1﹪的氯化汞溶液中1～2min→無菌水中至少清洗3次；既要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力）→③接種（無菌操作，形態(tài)學上端朝上）→④培養(yǎng)（無菌箱，18~22℃，光照12h）→⑤移栽（先開啟培養(yǎng)瓶的封口膜，生長幾日；然后用流水清洗根部培養(yǎng)基，移植到消過毒的蛭石或珍珠巖中進行壯苗。最終露天栽培）→⑥栽培

7、微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。

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專題二月季的花藥培養(yǎng)

1、花粉發(fā)育過程：小孢子母細胞（2n）減數(shù)分裂小孢子四分體時期（n）單核居中期（n）單核靠邊期（n）2個精子(n)有絲分裂生殖細胞（n）生殖細胞核（n）有絲分裂營養(yǎng)細胞（n）花粉管細胞核（n）雙核期2、產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物，另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織，再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。①先誘導生芽，再誘導生根；②胚狀體又稱為細胞胚。

3、影響花藥培養(yǎng)的因素：材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素。親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種密度等對誘導成功率都有一定影響

選初花期、完全未開放的花蕾、單核(靠邊)期花粉。

4、月季的花藥培養(yǎng)過程：材料的選取→材料的消毒→接種和培養(yǎng)

①選擇花藥用鏡檢法。最常用醋酸洋紅法（紫紅色）、焙花青-鉻礬法（藍黑色）。②材料的消毒：花蕾照。

在剝離花藥時，要盡量不損傷花藥（否則接種后簡單從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織），同時還要完全去除花絲，由于與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。

花藥開裂,若是長出愈傷組織，要將愈傷組織及時轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上，以便進一步分化出再生植株。若是胚狀體，則一個花藥內(nèi)就會產(chǎn)生大量幼小植株，須盡快將其分開，分別移植到新的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。

無菌水無菌吸水紙0.1%氯化汞無菌水清洗吸干水分2～4min沖洗清洗③每瓶接種花藥7～10個,溫度25℃,pH5.8，不需要光照.幼小植株形成后才需要光

70%酒精30s專題四酶的研究與應(yīng)用

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課題一果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用

1、果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。不溶于水，化學本質(zhì)是半乳糖醛酸聚合而成的高分子化合物。

2、果膠酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶。果膠酶的作用是能夠?qū)⒐z分解成半乳糖醛酸。

3、植物、霉菌、酵母菌、細菌均能產(chǎn)生果膠酶。霉菌發(fā)酵產(chǎn)生的果膠酶是食品工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一。

課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果

1、加酶洗衣粉是指含酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四類。應(yīng)用最廣泛的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2、脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸；蛋白酶可以將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸。

課題3酵母細胞的固定化

1、酶：對環(huán)境條件敏感，易失活；溶液中的酶很難回收，不能再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應(yīng)后的酶會混合在產(chǎn)物中，影響產(chǎn)品質(zhì)量。

2、固定化酶優(yōu)點：使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分開；固定在載體上的酶還可以被反復利用。

3、固定化細胞優(yōu)點：成本低，操作更簡單，對酶影響小，能同時進行一系列反應(yīng)。4、固定化酶的應(yīng)用實例

①高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿。能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。

②固定化酶技術(shù)：將酶固定在一種載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi)，柱子底端裝上分布著大量小孔的篩板。酶顆粒無法通小孔，而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。5、固定化酶及固定化細胞技術(shù)

①固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法，將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法（對固定酶的作用影響?。Ｃ父m合采用后兩種方法固定，而細胞多采用包埋法固定化。這是由于細胞個大，而酶分子很??；

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個大的細胞難以被吸附或結(jié)合，而個小的酶簡單從包埋材料中漏出。

②包埋法固定化細胞即將微生物細胞均勻包埋在不溶于水的多孔性載體中。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。

6、固定化酵母細胞的流程：制備固定化酵母細胞→用固定化酵母細胞發(fā)酵①制備固定化酵母細胞的試驗步驟

酵母菌的活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸鈉溶液（小火休止加熱并不斷攪拌，防止焦糊，是制作成功的關(guān)鍵步驟）→海藻酸鈉溶液與酵母菌細胞混合（冷卻后）→固定化酵母細胞（凝膠珠應(yīng)黃色，若白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數(shù)目較少；若凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高。）②用固定化酵母細胞發(fā)酵

固定好的凝膠珠用蒸餾水沖洗2-3次→凝膠珠參與葡萄糖溶液，溫度25℃，時間24h。

專題五ＤＮＡ和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈式反應(yīng)擴增DNA片段

1、PCR：（多聚酶鏈式反應(yīng)）。PCR儀實質(zhì)上是一臺能夠自動調(diào)控溫度的儀器（可用3個恒溫水浴鍋替代）。

2、原理：DNA的熱變性、DNA復制。3、PCR與體內(nèi)復制的區(qū)別

①無解旋酶；②需耐高溫（Taq）DNA聚合酶；③用加熱代替ATP。4、PCR的反應(yīng)過程：變性（90℃）→復性（50℃）→延伸（72℃）5、引物：

DNA的羥基（—OH）末端稱為3’，而磷酸集團的末端稱為5’。引物總是以自己的5’端與模板的3’端配對，DNA的合成方向是從子鏈的5’端向3’端延伸（即脫氧核苷酸從引物的3’端連接）。

6、為避免污染，使用的儀器和試劑必需進行高壓滅菌。

7、PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分成小份，在—20℃儲存。在冰塊上緩慢溶化。8、DNA在260nm的紫外線波段有一猛烈的吸收峰。

計算公式：DNA含量（μL/mL）=50×（260nm的讀數(shù)）×稀釋倍數(shù)

課題3血紅蛋白的提取和分開

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1、凝膠色譜法（分派色譜法）：相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)簡單進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外內(nèi)部移動，路程較短，移動速度較快，從而使相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分開。

2、凝膠：多糖類化合物構(gòu)成的微小的多孔球體，如葡聚糖、瓊脂糖。

3、緩沖液：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變。H2CO3—NaHCO3、NaH2PO4—Na2HPO4、醋酸—醋酸鈉。

4、電泳：利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子本身的的大小、形狀的不同，使帶電分子遷移速度不同，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分開。

5、常用的電泳方法有瓊脂糖凝膠電泳法和聚丙烯酰胺凝膠電泳。測定蛋白質(zhì)分子量時尋常使用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS所帶負電荷量大，掩蓋了蛋白質(zhì)的電荷區(qū)別，使電泳遷移率只取決分子大?。?。

6、蛋白質(zhì)的提取和分開流程：樣品處理→粗分開→純化→純度鑒定。

7、樣品處理：紅細胞的洗滌（①目的：去除雜蛋白；②方法：血液＋生理鹽水低速短時離心）→血紅蛋白的釋放（加蒸餾水和40%體積的甲苯，攪拌）→分開血紅蛋白溶液（離心后，試管分4層：從上向下第1層無色透明甲苯層，第2層為白色薄層固體——脂溶性物質(zhì)的沉淀層，第3層是紅色透明液體——血紅蛋白，第4層為其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。濾紙過濾，濾液于分液漏斗中靜置，分出下層的紅色透明液體）8、粗分開：即透析，目的除去小分子雜質(zhì)9、純化：即凝膠色譜法分開蛋白質(zhì)

10、純度鑒定：常用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法。

11、交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG—75）。G表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分開范圍，75表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水7.5g。

12、商品凝膠使用前需直接放在洗脫液中膨脹，并可用沸水浴加熱；裝填凝膠柱時不能有氣泡存在；操作過程中不能發(fā)生洗脫液流干露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。

13、加樣前，開啟流出口，使緩沖液下降到與凝膠面平齊，關(guān)閉出口。用吸管環(huán)繞管壁加樣，不要破壞凝膠面。

專題六植物有效成分的提取課題一植物芳香油的提取

自然香料的來源：植物、動物（麝、靈貓、海貍、抹香鯨）、真菌。植物芳香油的組成：萜類化合物及其衍生物。芳香油的提取方法：蒸餾、壓榨、萃取等。水蒸氣蒸餾法：（玫瑰精油）

原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物，冷卻后水油分層。方法：水中蒸餾：原料放在沸水中加熱蒸餾。（最簡便易行）

水上蒸餾：原料隔放在沸水上加熱蒸餾。水汽蒸餾：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。

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試驗流程：

采集玫瑰花（盛花期），清水清洗瀝干→水蒸氣蒸餾（花：水=1:4）→油水混合

無水Na2SO4過濾

NaCl分開油層除水玫瑰油物

蒸餾裝置：安裝依照從左向右、自下到上次序；蒸餾完畢，先撤熱源，然后中止通水，最終拆卸蒸餾裝置，拆卸的順序與安裝時相反。

整套裝置左邊：加熱蒸餾，中部將蒸餾物冷凝，右邊接收。

安裝順序：酒

精燈→蒸餾瓶（加沸石，防止過度沸騰）→蒸餾頭→冷凝管→接液管→