生物選修三第一章復習課件

1、基因工程的概念（又叫做DNA重組技術）操作：

DNA分子水平

優(yōu)點：目的性強，定向改造生物的性狀。專題1基因工程2、基因工程的原理：基因重組3、基因工程的基本工具限制酶

DNA連接酶載體①分子手術刀”——限制性核酸內切酶（限制酶）來源：主要是從原核生物中分離功能：識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。結果：黏性末端和平末端。一種限制酶識別一種序列，不同的限制酶識別不同序列。②.“分子縫合針”——DNA連接酶

E·coliDNA連接酶來源：大腸桿菌作用：黏性末端之間的磷酸二酯鍵T4DNA連接酶

來源：T4噬菌體作用：能縫合兩種末端，但連接平末端的效率較低。DNA聚合酶：只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶：是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。4、基因工程的基本操作程序（1）目的基因的獲取目的基因是指：編碼蛋白質的結構基因。基因文庫中獲?。ɑ蚪M文庫，cDNA文庫）目的基因轉錄的mRNA----單鏈DNA----雙鏈DNA反轉錄酶蛋白質的氨基酸序列----mRNA序列-----結構基因的核苷酸序列------目的基因推測化學合成推測PCR技術擴增——原理：雙鏈DNA復制條件：引物模板DNA四種脫氧核苷酸熱穩(wěn)定DNA聚合酶過程：第一步：加熱90～95℃氫鍵斷裂，DNA解鏈；第二步：冷卻55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱70～75℃，DNA聚合酶從引物起合成互補鏈?；瘜W合成法（基因小、核酸序列已知）（2）基因表達載體的構建（核心）目的：使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。組成：目的基因＋啟動子＋終止子＋標記基因

啟動子：DNA片段，能驅動基因轉錄出mRNA終止子：DNA片段，位于基因的尾端。標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因常用的標記基因是抗生素基因。（4）目的基因的檢測和表達轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法DNA分子雜交技術。

目的基因是否轉錄出了mRNA，分子雜交技術.

目的基因是否翻譯成蛋白質，

抗原－抗體雜交。

有時還需進行個體生物學水平的鑒定。如：是否出現(xiàn)抗蟲，抗病性狀。5、基因工程的應用植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉基因植物，利用轉基因改良植物的品質。動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物?；蛑委煟喊颜５耐庠椿驅氩∪梭w內，使該基因表達產物發(fā)揮作用6、蛋白質工程①概念

對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質

②蛋白質工程崛起的緣由：基因工程只能生產自然界已存在的蛋白質③蛋白質工程的基本原理：它可以根據人的需求來設計蛋白質的結構，又稱為第二代的基因工程。④基本途徑：從預期的蛋白質功能出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列（基因人工合成法

）三、（1）將含有目的基因的DNA與質粒分別用__限制酶___切割，酶切產物需用__DNA連接酶____進行連接，其作用部位是_磷酸二酯鍵_____其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有

目的基因—載體連接物、載體--載體連接物、目的基因--目的基因連接物三種。若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行

分離純化

。（2）培養(yǎng)轉基因植物時，常用

質粒

做運載體。它具備運載體的哪些條件？①

；②

③

。人的干擾素基因在酵母菌體內合成了人的干擾素，說明了__不同生物共用一套密碼子