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鈣離子對(duì)心臟節(jié)律性的影響2012級(jí)臨床醫(yī)學(xué)五七班第三機(jī)能實(shí)驗(yàn)室第3小組報(bào)告人20125610714李小芳20125610715林佳佳20125610716林麗鋒20125610718劉世鴻20125610719劉

穎20125610720劉園夢(mèng)20125610721梅培圓專家組成員:實(shí)驗(yàn)大致流程:實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)器材和藥品實(shí)驗(yàn)步驟和觀察項(xiàng)目預(yù)期結(jié)果結(jié)果分析注意事項(xiàng)二、實(shí)驗(yàn)原理

(1)心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)必須在適宜的理化環(huán)境下才能維持,,一旦適宜的理化環(huán)境被干擾或破壞,心臟活動(dòng)就會(huì)受到影響。節(jié)律性是指心肌細(xì)胞能在沒(méi)有外來(lái)刺激情況下具有自動(dòng)發(fā)生節(jié)律性興奮的能力或特性。自律性的高低是指心肌細(xì)胞自動(dòng)興奮頻率的高低。細(xì)胞外Ca2+濃度發(fā)生變化時(shí)與Ca2+內(nèi)流與Na+內(nèi)流相關(guān)的生物電活動(dòng)都將受到影響。當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度在一定范圍內(nèi)升高,細(xì)胞膜對(duì)Ca2+通透性升高,心室肌細(xì)胞平臺(tái)期Ca2+內(nèi)流增加心肌收縮增強(qiáng)增快;當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度過(guò)高時(shí),心臟就會(huì)停搏于收縮狀態(tài),出現(xiàn)鈣僵直。

(2)用理化特性近似于蟾蜍血漿的任試液灌流離體的蟾蜍心臟,在一定時(shí)間內(nèi)可保持其節(jié)律性收縮和舒張。改變灌流液的組成成分,心臟跳動(dòng)的頻率和幅度會(huì)隨之發(fā)生改變。

三、實(shí)驗(yàn)對(duì)象:

蟾蜍

四、實(shí)驗(yàn)器材和藥品蛙類手術(shù)器械一套,生物信號(hào)采集系統(tǒng),張力換能器,鐵支架,雙凹架,試管架,蛙心插管,蛙心夾,滴管,細(xì)線。任試液,含Ca2+的溶液,1:10000去甲腎上腺。3、結(jié)扎血管

在右主動(dòng)脈下穿一根線并結(jié)扎,再在左右主動(dòng)脈下穿一根線備用。用玻璃分針將心尖向上翻至背面,以備用線將前后腔靜脈一起結(jié)扎(注意勿結(jié)扎住靜脈竇)。將心臟回復(fù)至原位。2、仔細(xì)識(shí)別心房、心室、動(dòng)脈圓錐、主動(dòng)脈、靜脈竇、前后腔靜脈等。4、蛙心插管

在左主動(dòng)脈下穿一根線結(jié)扎左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端,另一線備用。提起左主動(dòng)脈遠(yuǎn)端縛線,用眼科剪在做主動(dòng)脈上圓錐處剪一“V”形切口,將盛有少量任試液的蛙心插管由此口插入主動(dòng)脈,插至動(dòng)脈圓錐時(shí),略向后退,在心室收縮時(shí),沿心室后壁方向下插,經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)(不可插入過(guò)深,以免心室壁堵住插管下口)。若插管成功進(jìn)入心室,管內(nèi)液體會(huì)隨著心室搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用左主動(dòng)脈近心端的備用線結(jié)扎插管,并將結(jié)扎線固定于插管側(cè)面的小突起上。

5、游離蛙心提起插管,在結(jié)扎線遠(yuǎn)端分別剪斷主動(dòng)脈左右分支;剪斷左右肺動(dòng)脈和前后腔靜脈,將心臟離體。用滴管吸盡插管內(nèi)的余血,加入新鮮任試液反復(fù)沖洗數(shù)次,直至液體完全澄清。保持灌流液面高度恒定(1~2cm),即可進(jìn)行試驗(yàn)。(二)、觀察項(xiàng)目1、描記正常心臟收縮曲線并分析:

疏密:代表心跳的頻率,可根據(jù)顯速來(lái)計(jì)數(shù)。

規(guī)律:代表心跳的節(jié)律性。

幅度:代表心室收縮的強(qiáng)弱。

頂點(diǎn)水平:代表心室收縮的程度。

基線:代表心室舒張的程度。

2、不同濃度Ca2+對(duì)心臟節(jié)律性的影響:吸出插管內(nèi)全部的任試液,分別換入配置好的(1/4、1/2、1、2、4、8)倍的Ca2+濃度的任試液。每次換入新的試劑前用任試液潤(rùn)洗蟾蜍離體的心臟。六、預(yù)期結(jié)果:

當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度在一定范圍內(nèi)升高(1/4、1/2、1、2、4)倍Ca2+影響下,心跳加速,即心率會(huì)適當(dāng)加快,當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度較高時(shí)8倍Ca2+,心臟會(huì)停止跳動(dòng),心肌出現(xiàn)鈣僵直。七、結(jié)果分析:

Ca2+是一種對(duì)心臟活動(dòng)不可或缺的離子。在本次試驗(yàn)中,我們使用不同濃度鈣離子任氏液對(duì)蛙心進(jìn)行離體灌流。當(dāng)肌細(xì)胞上有動(dòng)作電位傳來(lái)時(shí),肌漿網(wǎng)(即縱管系統(tǒng))釋放Ca2+,引起肌漿中Ca2+濃度升高,作為Ca2+受體的肌鈣蛋白結(jié)合了足夠數(shù)量的Ca2+,就引起肌鈣蛋白分子構(gòu)想的某些改變,傳遞給原肌凝蛋白,是后者的構(gòu)象也發(fā)生改變,結(jié)果是原肌凝蛋白的雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生某種扭轉(zhuǎn),把安靜時(shí)阻止肌纖蛋白和橫橋相互結(jié)合的阻礙因素出去,出現(xiàn)兩者的結(jié)合。

當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度↑時(shí),對(duì)Na+的屏障作用↑,由于這種抑制作用,觸發(fā)Na+快速內(nèi)流產(chǎn)生0期去極化就比較困難,即TP上移,從而與RP的差距增大,興奮性降低;發(fā)生興奮后,Na+內(nèi)流的抑制則導(dǎo)致0期去極化速度和幅度降低,傳導(dǎo)性下降。Ca2+內(nèi)流是慢反應(yīng)細(xì)胞0期去極化和快反應(yīng)細(xì)胞2期的主要離子活動(dòng)。當(dāng)細(xì)胞外Ca2+濃度↑,使Ca2+內(nèi)流加快,慢反應(yīng)細(xì)胞0期去極化加快加強(qiáng),傳導(dǎo)性升高。細(xì)胞膜對(duì)Ca2+

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