中藥提取物抗菌防腐課件

對三種食物腐敗抑制效果研究中草藥提取物Contents小組成員組長：莫達(dá)康

組員：溫影珍陳宏偉袁浩彬黃偉華指導(dǎo)老師：鮑波許碧蓮Contents研究目的添加食品防腐劑益于人體健康，有一定的營養(yǎng)價值，消費者認(rèn)可度高天然防腐劑化學(xué)防腐劑

民以食為天，食以安為先。近年來食品安全問題一次又一次的進(jìn)入公眾的視野，其中食品安全又以食品腐敗問題尤為嚴(yán)重，全世界農(nóng)副產(chǎn)品、果蔬等食品因腐爛變質(zhì)而引起的經(jīng)濟(jì)損失十分巨大。所以延長保存期限、防止食品腐敗變質(zhì)是食品工業(yè)的重要任務(wù)。傳統(tǒng)方法如干制、鹽腌、加熱、罐藏冷凍干燥、氣調(diào)貯藏輻射保藏、微波殺菌工藝程序復(fù)雜耗能大、投資成本高價格低廉，但若超過安全劑量存在致癌性、致畸性、易引起食物中毒等問題Contents研究內(nèi)容1.比較八種中藥提取物體外抗三種食物腐敗菌的能力，選擇抗菌效果最好的一種中藥進(jìn)行下一步研究。2.研究1中所選中藥提取物在不同濃度下的抑菌效果及該中藥的MIC。Contents實驗選材中草藥的選取八種具有廣譜、高效、低毒的抗菌中藥：五倍子、白花蛇舌草、金銀花、肉桂、黃連、羅漢果、梔子、魚腥草細(xì)菌的選取中國食品微生物限量規(guī)定不得含有的致病致腐菌：沙門氏菌、志賀菌、金色葡萄球菌Contents實驗步驟中藥藥液的提?。ㄋ峒逯蠓ǎ?/p>

各取50g進(jìn)行粗粉碎后,通過球磨機再進(jìn)行球磨,過篩得到各中草藥的細(xì)粉碎樣品。取粉碎后中藥各50g，分別加水500ml，將中藥浸泡在水中，加熱至沸騰，改用文火加熱20分鐘，將濾液濾出，在將濾渣加水至200ml，二次煎煮，后將兩次煎煮所得濾液加在一起，水浴濃縮至100ml，高壓滅菌后放涼至室溫，備用。所得中藥水煎煮液濃度為0.5g/ml。Contents實驗步驟三、藥敏試驗

用無菌棉拭子取菌液涂布在以打孔的90MM直徑的MH藥敏平板上，每平板打4個孔，待干后，分別加入中藥水煎液50UL。在培養(yǎng)箱中37攝氏度培養(yǎng)24小時后，用游標(biāo)卡尺量取抑菌環(huán)直徑。利用瓊脂擴散法,分別取濃度為10^6cfu/mL的菌液各0.2mL,分別加入LB瓊脂培養(yǎng)基中,凝固后用無菌打孔器在瓊脂培養(yǎng)基上打孔。將各中藥提取物加入孔中每組分別做三個平行實驗;另外做兩組對照實驗,在一個平皿中加入蒸餾水作CK;在另一個平皿中加入濃度為3.4mg/ml苯甲酸鈉作CK-。然后再將平皿置于37℃恒溫箱中培養(yǎng),24h后取出觀察。用卡尺十字交叉法測量抑菌圈直徑,計算抑制生長率。抑制生長率=處理凈生長量/CK-凈生長量×100%Contents實驗步驟中草藥水提物顯著性P<0.05P<0.01抑菌圈直徑（cm）五倍子白花蛇舌草金銀花肉桂黃連梔子魚腥草羅漢果苯甲酸鈉蒸餾水沙門氏菌志賀氏菌金黃色葡萄球菌八種中草藥水提物抗菌譜（抑菌環(huán)）Contents實驗步驟四、不同濃度的中草藥提取物抑菌效果

選取各細(xì)菌抑菌生長率最高的一種中藥水提物,分別設(shè)置提取物濃度分別為：重復(fù)上一步做藥敏實驗。0.5g/ml,0.25g/ml,0.125g/ml,0.0625g/ml,0.0313g/mlContents實驗步驟五、MIC的測定

選取效果平均抑菌生長率最好的一種中藥水提物，測定對三種致病菌的最小抑菌濃度，并與常用化學(xué)防腐劑苯甲酸鈉的最小抑菌濃度作對比。采用試管2倍稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC)。實驗中每種藥均用肉湯培養(yǎng)基2倍系列稀釋10個梯度,第11支試管作陽性對照,第12管作陰性對照,各管稀釋后的最終體積為10mL。每管加接種菌液100μL,置37℃培養(yǎng)18～24h,觀察是否有菌生長,每種藥物做3組重復(fù)。Contents實驗步驟沙門氏菌志賀氏菌金黃色葡萄球菌中草藥水提物0.50.250.1250.06250.0313濃度(g/ml)目標(biāo)細(xì)菌MICA中藥C中藥B中藥中草藥對