原料藥的清潔驗證

FDA的清潔工藝驗證指南歐盟的附錄15中國的驗證與確認PDA的清潔驗證指南（TR29，TR70）APIC的清潔驗證指南（2014）清潔驗證究其本質(zhì)，也是一種形式的工藝驗證，是對清潔工藝的驗證。所以，和工藝驗證類似，清潔驗證也可以分為三個階段。2023/2/52023/2/56工藝設計階段a.確定清潔方法b.開發(fā)清潔驗證的分析方法c.開發(fā)清潔驗證的取樣方法清潔驗證實施實施清潔驗證，確認清潔程序能夠滿足要求持續(xù)工藝驗證階段a.清潔程序的監(jiān)控和趨勢分析b.再驗證和后續(xù)確認清潔驗證的設計階段，是清潔驗證的基礎。你不可能通過驗證，讓一個不合理的程序合理化，你只可能通過驗證，去證明一個程序是合理的。清潔驗證失敗，往往并不是清潔驗證執(zhí)行的失敗，而是來源于清潔程序設計的不合理，分析方法的錯誤或者取樣方法的錯誤。2023/2/5在清潔驗證的設計階段，需要完成三件工作：清潔程序的開發(fā)清潔驗證分析方法的確認清潔驗證取樣方法的確認2023/2/5清潔程序的開發(fā)，通常也是在研發(fā)階段，和產(chǎn)品工藝的開發(fā)共同完成的，它通常至少會分為兩個階段：2023/2/5第一階段：實驗室開發(fā)階段在實驗室開發(fā)階段，通常是由研發(fā)人員，基于產(chǎn)品的性質(zhì)，來確定初步的產(chǎn)品清潔方法，基本原則是優(yōu)先考慮不使用清潔劑進行清洗優(yōu)先考慮使用工藝步驟中的溶劑做為清潔劑優(yōu)先考慮能被后續(xù)工藝清除的清潔劑進行清洗優(yōu)先考慮除去方法簡單的清潔劑進行清洗2023/2/5第一階段：實驗室開發(fā)階段在這個階段，還需要確認的是清潔對象是什么？（對于多組分成分的原料藥）2023/2/5清潔對象的確定原則：殘留的多種化合物，哪種最難去除是否有潛在的高污染物（毒性，致敏性等），如氰化物所選擇的殘留物是否可以被檢測到？2023/2/5第二階段：清潔程序的確定階段有時，也稱為清潔確認。在該階段，確認清潔程序的各個主要參數(shù)。例如：清洗時的壓力，使用清潔劑的量，清潔時間等。如果一個步驟，不能達到清潔效果，可以考慮多個步驟的組合來達到清潔效果。問題:1.人工清潔程序如何開發(fā)？開發(fā)時需要做哪些工作？2023/2/5第二階段：清潔程序的確定階段通常會在研發(fā)的中試批或者工藝確認批進行。清潔確認時可以將設備反復清潔至清潔。2023/2/5清潔規(guī)程的要求2023/2/5手工清洗由操作人員拆洗、擦洗或用高壓水槍清洗自動清洗由自動控制進行沖洗的清洗，有的帶干燥功能半自動清洗以上兩種方式相結合的清洗過程2023/2/5參照設備說明書制定詳細的規(guī)程，規(guī)定每一臺設備的清潔程序，以期每個操作人員都能以可重復的方式對其清洗，并獲得相同的清潔效果。2023/2/5清潔規(guī)程的要點1、拆卸方法2、預洗/檢查要求3、清洗（清潔劑、方法、時間、溫度范圍）4、淋洗（用符合藥典標準的水、固定的方法和固定的時間）2023/2/5清潔規(guī)程的要點5、裝配：按說明書、示意圖要求裝配6、干燥：明確方式和參數(shù)7、檢查：符合設定標準，包括目檢8、貯存：保持設備及系統(tǒng)清潔完好狀態(tài)的方法，如倒置、放在層流罩下、在線滅菌、規(guī)定存放時間。2023/2/5清潔驗證的分析方法的要求：清潔驗證的分析方法可以檢測出主殘留物清潔驗證的分析方法具有專屬性問題：1.清潔驗證的分析方法需要驗證么？2.清潔驗證的分析方法如果用藥典方法，還需要進行分析方法驗證么？2023/2/5清潔驗證的常用的分析方法HPLCGCUVTOC僅僅是定性檢測的方法，已經(jīng)越來越不被一些檢查員所接受。所以，在開發(fā)清潔驗證的分析方法時，應盡量選擇定量的方法來判定。注意法規(guī)的變化：目視檢查是一個很重要的標準，但通常不能作為單一可接受標準使用問題：清潔驗證中，選擇目測方法進行，目測需要驗證么？2023/2/5清潔驗證取樣方法的開發(fā)解決兩個問題：1.怎么取樣？2.取哪里？2023/2/5這個階段，通常也是在中試或者工藝確認批時進行2023/2/5清潔驗證的取樣方法：棉簽擦拭淋洗水2023/2/5采用棉簽擦拭法是最常用的辦法，棉簽取樣過程的驗證實際上是對取樣棉簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到取樣棉簽、樣品溶出(萃取)過程的全面考察。使用棉簽擦拭法取樣時需要考慮到：取樣棉簽對于檢驗結果的影響，盡量選用專用棉簽取樣物品表面材質(zhì)對于檢驗結果的影響，應考察不同取樣表面樣品放置時間，對于取樣結果的影響，應考慮holdingtime測試時，取樣回收率的影響2023/2/52023/2/5對不容易接近或不能日常拆卸的系統(tǒng)可以采用使用淋洗水的方式來進行取樣，使用淋洗水取樣時，需要注意的是，不能用淋洗水的水質(zhì)符合標準，而判定清潔驗證合格，而應該用淋洗水中的殘留物的含量來判定。檢查嬰兒，而不是檢測洗澡水。問題：回收率可以取平均值么？2023/2/5在進行清潔確認時，就需要對清潔的最差點進行研究，初步確定最難清潔點。最差點：理論上最難清潔位置，如：CIP時的人孔，攪拌槳的底部；淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。實際研究中的位置，如：核黃素測試，清潔確認中，測試的殘留最多的位置。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第三十八條為確認與產(chǎn)品直接接觸設備的清潔操作規(guī)程的有效性，應當進行清潔驗證。應當根據(jù)所涉及的物料，合理地確定活性物質(zhì)殘留、清潔劑和微生物污染的限度標準。第三十九條在清潔驗證中，不能采用反復清洗至清潔的方法。目視檢查是一個很重要的標準，但通常不能作為單一可接受標準使用。第四十條清潔驗證的次數(shù)應當根據(jù)風險評估確定，通常應當至少進行連續(xù)三次。清潔驗證計劃完成需要一定的時間，驗證過程中每個批次后的清潔效果需及時進行確認。必要時，企業(yè)在清潔驗證后應當對設備的清潔效果進行持續(xù)確認。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第四十一條驗證應當考慮清潔方法的自動化程度。當采用自動化清潔方法時，應當對所用清潔設備設定的正常操作范圍進行驗證；當使用人工清潔程序時，應當評估影響清潔效果的各種因素，如操作人員、清潔規(guī)程詳細程度（如淋洗時間等），對于人工操作而言，如果明確了可變因素，在清潔驗證過程中應當考慮相應的最差條件。第四十二條活性物質(zhì)殘留限度標準應當基于毒理試驗數(shù)據(jù)或毒理學文獻資料的評估建立。如使用清潔劑，其去除方法及殘留量應當進行確認。可接受標準應當考慮工藝設備鏈中多個設備潛在的累積效應。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第四十三條應當在清潔驗證過程中對潛在的微生物污染進行評價，如需要，還應當評價細菌內(nèi)毒素污染。應當考慮設備使用后至清潔前的間隔時間以及設備清潔后的保存時限對清潔驗證的影響。第四十四條當采用階段性生產(chǎn)組織方式時，應當綜合考慮階段性生產(chǎn)的最長時間和最大批次數(shù)量，以作為清潔驗證的評價依據(jù)。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第四十五條當采用最差條件產(chǎn)品的方法進行清潔驗證模式時，應當對最差條件產(chǎn)品的選擇依據(jù)進行評價，當生產(chǎn)線引入新產(chǎn)品時，需再次進行評價。如多用途設備沒有單一的最差條件產(chǎn)品時，最差條件的確定應當考慮產(chǎn)品毒性、允許日接觸劑量和溶解度等。每個使用的清潔方法都應當進行最差條件驗證。在同一個工藝步驟中，使用多臺同型設備生產(chǎn)，企業(yè)可在評估后選擇有代表性的設備進行清潔驗證。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第四十五條當采用最差條件產(chǎn)品的方法進行清潔驗證模式時，應當對最差條件產(chǎn)品的選擇依據(jù)進行評價，當生產(chǎn)線引入新產(chǎn)品時，需再次進行評價。如多用途設備沒有單一的最差條件產(chǎn)品時，最差條件的確定應當考慮產(chǎn)品毒性、允許日接觸劑量和溶解度等。每個使用的清潔方法都應當進行最差條件驗證。在同一個工藝步驟中，使用多臺同型設備生產(chǎn)，企業(yè)可在評估后選擇有代表性的設備進行清潔驗證。2023/2/5確認和驗證附錄對清潔驗證的要求第四十六條清潔驗證方案應當詳細描述取樣的位置、所選取的取樣位置的理由以及可接受標準。第四十七條應當采用擦拭取樣和（或）對清潔最后階段的淋洗液取樣，或者根據(jù)取樣位置確定的其他取樣方法取樣。擦拭用的材料不應當對結果有影響。如果采用淋洗的方法，應當在清潔程序的最后淋洗時進行取樣。企業(yè)應當評估取樣的方法有效性。第四十八條對于處于研發(fā)階段的藥物或不經(jīng)常生產(chǎn)的產(chǎn)品，可采用每批生產(chǎn)后確認清潔效果的方式替代清潔驗證。每批生產(chǎn)后的清潔確認應當根據(jù)本附錄的相關要求進行。第四十九條如無法采用清潔驗證的方式來評價設備清潔效果，則產(chǎn)品應當采用專用設備生產(chǎn)。2023/2/5清潔驗證通常會和工藝驗證同步實施，當然，也可以在工藝驗證前的工藝確認批實施，如果工藝確認批的規(guī)模和工藝與最終的工藝驗證批完全一致的前提下。清潔驗證至少需要進行三批連續(xù)的驗證，才能算是成功的驗證。2023/2/5驗證方案的關鍵點1、選定清潔的參照物（最難清潔的物質(zhì)）2、最難清潔部位和最難取樣部位3、殘留物允許限度4、Holdingtime的研究2023/2/5確定最難清潔的物質(zhì)（參照物）

2023/2/5對于單一品種，清潔驗證時的參照物為該品種或其降解物。2023/2/5對于共線產(chǎn)品，需要綜合考慮其：毒性在清洗溶劑中的溶解度已知難于清洗，如對設備表面材質(zhì)有一定附著力2023/2/52023/2/5在A組中的綜合值最大，應選擇為參照產(chǎn)品。B因為清潔難度大，也需要驗證。確定最難清潔部位和取樣點清洗的方法手工清洗：機械摩擦，效果較好一般沖洗：溶解、沖擊法去污，有些部位不容易清潔。2023/2/5最難清潔的部位：死角清潔劑不易接觸到的部位壓力小、流速很低的部位容易吸附殘留物的部位2023/2/5如果在清潔確認中，對最難清潔部位進行了充分的研究，那么這個取樣點的選擇可以直接引用清潔確認的結論。

確定合格標準（殘留量限度）根據(jù)生產(chǎn)設備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學合理的，能夠?qū)崿F(xiàn)并能通過適當?shù)姆椒z驗的限度標準。標準通常由企業(yè)自己確定2023/2/5

“FDA不打算為清潔驗證設定一個通用方法或限度標準。那是不切實際的，因為原料和制劑生產(chǎn)企業(yè)使用的設備和生產(chǎn)的產(chǎn)品千差萬別，確立殘留物限度不僅必須對所有有關物質(zhì)有足夠的了解，而且所定的限度必須是現(xiàn)實的、能達到和可被驗證的。”

2023/2/5換言之企業(yè)應根據(jù)其生產(chǎn)設備和產(chǎn)品的實際情況，制定科學合理的，能實現(xiàn)并能通過適當?shù)姆椒z驗的限度標準。從保證用藥安全出發(fā)，由企業(yè)自確定合格標準2023/2/5目前制藥業(yè)普遍接受的限度標準：1.分析方法客觀能達到的靈敏度，如濃度限度--10ppm(1/1000000)2.生物活性的限度，治療劑量的1/10003.以目檢為依據(jù)的限度，如不得有可見的殘留物。2023/2/5可見，清潔驗證合格的執(zhí)行標準是從三個方面來確定的；

檢測方法的靈敏度（10ppm）藥品的生物活性（1/1000）檢查的方便性及可行性。2023/2/5在實施清潔驗證時，還需要根據(jù)產(chǎn)品的不同，制定微生物限度的標準，微生物限度的標準擦拭取樣可以參照對等的潔凈區(qū)的表面微生物標準，淋洗水的標準可以對應使用的清洗水的標準。對于注射劑使用的原料藥，還需要考慮細菌內(nèi)毒素的測試，標準也為對等的清洗水的標準。2023/2/51.概述闡述待驗證的設備、系統(tǒng)和清潔方法2.驗證人員3.文件：設備清潔SOP清潔程序（二個可能寫在一起）取樣方法分析方法2023/2/5確定殘留參照物確定合格標準（限度）取樣要求（取樣點位置、編號、數(shù)量等）HoldingTime的研究驗證結果及綜合評估2023/2/5HoldingTime的研究HoldingTime的研究包括兩部分的內(nèi)容：DirtyHoldingTime（臟的保留時限）CleaningHoldingTime（清潔后的保留時限）小清潔的驗證如何做？1.再驗證2.定期的再驗證3.持續(xù)的驗證階段2023/2/5所有對于清潔程序的關鍵參數(shù)有影響的變更，都需