微生態(tài)制劑和換水頻次在仿刺參幼參培育中的作用,漁業(yè)論文

微生態(tài)制劑和換水頻次在仿刺參幼參培育中的作用,漁業(yè)論文仿刺參(Apostichopusjaponicus)具有極高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值[1],隨著市場需求越來越大,養(yǎng)殖規(guī)模逐步擴(kuò)大,但是,病害頻發(fā)嚴(yán)重影響了仿刺參養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。藥物雖能治療動(dòng)物疾病,但是產(chǎn)生的藥物依靠和藥物殘留,影響人的食品安全[2-3]。微生態(tài)制劑是根據(jù)微生態(tài)學(xué)的微生態(tài)平衡、微生態(tài)失調(diào)、微生態(tài)營養(yǎng)和微生態(tài)防治等理論,利用正常微生物群成員或其促進(jìn)物質(zhì)制成的能夠調(diào)整機(jī)體微生態(tài)平衡的活體微生物制劑,因而又稱為益生素或促生素[4]。自1986年,日本的Kozasa[5]將微生態(tài)制劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖以來,微生態(tài)制劑的使用在全世界范圍內(nèi)迅速發(fā)展。微生態(tài)制劑在仿刺參養(yǎng)殖中的研究一直著重于對仿刺參生長、免疫和腸道及養(yǎng)殖水質(zhì)的影響[6-11],但有關(guān)微生態(tài)制劑對仿刺參室內(nèi)苗種培育經(jīng)過中換水頻次的影響尚未見報(bào)道。為此,筆者研究了在仿刺參幼參培育經(jīng)過中,定期投喂微生態(tài)制劑,換水頻次對仿刺參生長及氮、磷收支及養(yǎng)殖水質(zhì)的影響,以期為微生態(tài)制劑在仿刺參養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供參考。1材料與方式方法1.1材料試驗(yàn)用仿刺參幼參平均濕質(zhì)量(1.2310.0046)g,山東好當(dāng)家海洋發(fā)展股份有限公司提供。所用微生態(tài)制劑為乳酸粉,以乳酸菌為主,菌含量2.0109cfu/g。飼料由威海金牌生物科技有限公司提供,主要成分為馬尾藻(Scagassumnatans)和海泥,適用于稚參。試驗(yàn)于中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所深圳試驗(yàn)基地提供的容量500L塑料桶中進(jìn)行。波紋板40cm40cm,每組20片,共18組,由山東好當(dāng)家海洋發(fā)展股份有限公司提供。1.2方式方法1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)為6個(gè)處理組,分為未換水組、3d換水組、5d換水組、8d換水組、12d換水組、15d換水組。所有組均投喂以乳酸菌為主的微生態(tài)制劑,投喂量為2.0g/m3。每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。1.2.2日常管理500L塑料桶中水體為300L,每個(gè)桶中放入兩組附著基,每桶放400g幼參,18個(gè)桶。日投餌1次(18:00),投餌量開場為幼參體質(zhì)量的3%,之后根據(jù)幼參的攝食情況和水體溫度調(diào)整投餌率。試驗(yàn)房間內(nèi)窗戶用黑色織網(wǎng)遮住。按試驗(yàn)設(shè)計(jì)定期換水。每日定時(shí)測定溫度、pH、溶氧、鹽度,觀察幼參生活狀態(tài)。試驗(yàn)期間水溫18~24℃(圖1),鹽度30~35(圖2),連續(xù)充氣。每日測定NH+4-N和NO-2-N的含量。全部換水時(shí)測定水體中的NH+4-N、NO-2-N、NO-3-N、活性磷的含量。用靛酚亮藍(lán)法測定NH+4-N;用重氮偶氮比色法測NO-2-N;用鋅鎘復(fù)原法測定NO-3-N;用鉬藍(lán)比色法測定活性磷;氮、磷聯(lián)合消化法測定華而不實(shí)總氮、總磷含量。測定方式方法參照(養(yǎng)殖水環(huán)境化學(xué)試驗(yàn)〕[12]。1.2.3微生態(tài)制劑的使用方式方法投喂前,用海水化解微生態(tài)制劑,使之變?yōu)榫鷳乙?將菌懸液與適量海藻泥飼料攪拌均勻后(能夠稀一些),全池潑灑。每隔5d投灑一次。1.2.4幼參、飼料、底質(zhì)的測定在試驗(yàn)前、后采集幼參樣品,放入烘箱60℃烘干,研磨過200目篩,用VarioELⅢ德國元素分析儀測定總氮[13],用氫氧化鈉消解法測總磷[14]。1.2.5生長指標(biāo)的測定試驗(yàn)結(jié)束后,將幼參饑餓24h,稱取總質(zhì)量,并將所有試驗(yàn)桶的幼參進(jìn)行數(shù)量統(tǒng)計(jì)。計(jì)算特定生長率和成活率:成活率/%=試驗(yàn)?zāi)┯讌⒋婊顢?shù)/試驗(yàn)初試幼參總數(shù)100%特定生長率/%d-1=(lnmt-lnmo)/t100%式中,m0和mt分別為試驗(yàn)初始時(shí)和終末時(shí)幼參的平均質(zhì)量(g);t為試驗(yàn)時(shí)間(d)。1.3數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值標(biāo)準(zhǔn)差表示,用SPSS19.0軟件進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)、方差分析和LSD多重比擬,以P0.05表示有顯著性差異。2結(jié)果2.1溫度和鹽度與時(shí)間的關(guān)系試驗(yàn)自2020年3月18日至2020年4月23日止,共36d。試驗(yàn)結(jié)果見圖1。2.2水質(zhì)2.2.1NH+4-N不同換水頻次對水中NH+4-N的影響見圖2。由圖2可見,未換水組中,NH+4-N含量均比其他換水組高,且差異極顯著(P0.01),3d換水組和5d換水組差異不顯著(P0.05),由NH+4-N在水體中含量來看,水質(zhì)最好的是3d換水組?！?-2】2.2.2NO-2-N不同換水頻次對仿刺參幼參養(yǎng)殖水中NO-2-N含量影響的結(jié)果見圖3。由圖3可見,未換水組中,NO-2-N含量均極顯著高于其他各換水組(P0.01),NO-2-N含量上來看,3d換水組效果最好。華而不實(shí)3d換水頻次和5d換水頻次對水中NO-2-N含量影響不顯著(P0.05),從經(jīng)濟(jì)成本考慮,5d換水頻率較為實(shí)際?！?】2.2.3活性磷不同換水頻次對活性磷影響的結(jié)果見圖4。由圖4可見,未換水組、8d、12d和15d換水組間活性磷的差異不顯著(P0.05);3d換水組和5d換水組間差異不顯著(P0.05),但是3d換水組活性磷含量極顯著低于未換水組及8d、12d、15d換水組(P0.01)?！?】2.2.4NO-3-N不同換水頻次對硝酸鹽的影響見圖5。由硝酸鹽的測定結(jié)果可見,未換水組15d換水組12d換水組8d換水組5d換水組3d換水組,未換水組硝酸鹽含量極顯著高于其它各換水組(P0.01),3d、5d和8d各換水組間差異不顯著(P0.05),5d、8d和12d各換水組間差異不顯著(P0.05),12d和15d換水組差異不顯著(P0.05);3d換水組中硝酸鹽的含量高于12d和15d換水組,且差異極顯著(P0.01)。2.3生長指標(biāo)各試驗(yàn)組幼參成活率顯著不差異(P0.05),特定增長率各試驗(yàn)組均較未換水組差異顯著(P0.05),3d與5d換水組差異不顯著(P0.05),3d與12d及15d換水組間差異顯著(P0.05)(表1)。綜合水質(zhì)和生長指標(biāo)考慮,試驗(yàn)設(shè)定范圍內(nèi),選擇5d換水是最佳的換水頻次。【5】2.4氮、磷收支在使用微生態(tài)制劑情況下,不同換水頻次下氮、磷輸入見表2。氮輸入量依次為:飼料(66.3%~74.5%)仿刺參幼參(24.9%~28.5%)海水(0.6%~6.7%),由于換水頻次的不同,輸入氮主要的差異不同在于海水,飼料中氮占主要輸入氮。磷輸入量:飼料(95.7%~96.6%)仿刺參(3.3%~4%)海水(0~0.3%),飼料中磷輸入差異不顯著(P0.05),海水中磷含量較少,只要3d和5d換水組與其他組差異顯著?！?】不同換水頻次下氮、磷的輸出量見表3。在未換水情況下,殘餌糞便中的氮輸出61%,比其他處理組差異極顯著(P0.01),與其他處理組相比,殘餌糞便氮輸出是最主要的輸出。但是在換水的情況下,氮輸出主要集中在仿刺參上,占總氮輸出38.4%~48.1%,殘餌糞便占總氮輸出36.6%~42.3%,海水占總氮輸出13.0%~22.0%。在總磷輸出方面,殘餌糞便(82.6%~92.3%)仿刺參(5.2%~12.9%)海水(2.5%~6.6%)?！?】3討論3.1換水頻次對水質(zhì)的影響本試驗(yàn)中,1~10d,未換水組NH+4-N的含量與其他各試驗(yàn)組組差異不顯著(圖2),10d以后,不同換水頻次的試驗(yàn)組間水質(zhì)差異越來越大,由圖3可見,1~15d,未換水組NO-2-N與其他各試驗(yàn)組組間差異不顯著,15d以后,不同換水頻次的試驗(yàn)組間水質(zhì)差異越來越大。講明微生態(tài)制劑對NH+4-N的調(diào)控在10d以內(nèi),對NO-2-N的調(diào)控在15d以內(nèi),本試驗(yàn)所用的微生態(tài)制劑以乳酸菌為主,對降解水體中的NH+4-N和NO-2-N有很好的調(diào)控作用。隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長,水體中的殘餌糞便積累,15d后未換水組的水質(zhì)越來越差,NH+4-N和NO-2-N持續(xù)升高,參加微生態(tài)制劑并不能起到作用,此結(jié)果與沈南南等[15-16]的研究結(jié)果類似。本試驗(yàn)中,3d及5d換水組NH+4-N和NO-2-N比擬穩(wěn)定,8d、12d及15d換水組與3d、5d換水組差異顯著(P0.05),講明參加微生態(tài)制劑后,3d和5d換水一次能夠保持仿刺參幼參養(yǎng)殖水質(zhì)不受影響。從硝態(tài)氮和活性磷比擬能夠看出,換水頻次越低,硝態(tài)氮和活性磷的積累就越多。參加微生態(tài)制劑并未改變仿刺參幼參養(yǎng)殖水體中硝態(tài)氮和活性磷的積累。固然硝態(tài)氮和活性磷對刺參幼參無顯著影響,如長期不換水,硝態(tài)氮和活性磷累積在水體中,可分解轉(zhuǎn)化為NH+4-N和NO-2-N,間接對仿刺參幼參的生長造成影響。因而,在室內(nèi)培育刺參幼苗的時(shí)候,在定期添加微生態(tài)制劑的情況下,還需定期3d或5d更換一次育苗用水,才能保證育苗水質(zhì)維持在一個(gè)穩(wěn)定的狀態(tài),保證幼參的健康生長。3.2換水頻次對刺參幼參生長性能的影響由本試驗(yàn)的不同換水頻次對仿刺參幼參生長的影響能夠看出,參加微生態(tài)制劑并未對仿刺參幼參的成活率產(chǎn)生影響。由于微生態(tài)制劑能夠分解有機(jī)質(zhì)、提供菌體蛋白作為營養(yǎng)[17],同時(shí)本試驗(yàn)所用的乳酸菌制劑長期使用,能夠提高水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的乳酸菌含量,到達(dá)穩(wěn)定并在腸道內(nèi)定殖[18],改變腸道內(nèi)微生物環(huán)境,并影響消化酶的分泌[6],進(jìn)而提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長性能。在本試驗(yàn)中,未換水組由于后期殘餌糞便增加,水質(zhì)惡化,嚴(yán)重影響了仿刺參幼參的生長,以致出現(xiàn)負(fù)增長。其他各換水組,幼參的特定生長率3d換水組5d換水組8d換水組15d換水組12d換水組,特定生長率增加0.41%/d~1.56%/d,王國霞等[19]在使用乳酸菌制劑,樣本量為30尾的情況下凡納濱對蝦(Litopenaeovannamei)幼蝦的特定生長率為2%/d~3%/d;袁成玉等[6]使用微生態(tài)制劑,在樣本量為55頭時(shí)仿刺參幼參的特定生長率為4%/d~5%/d。本研究當(dāng)中,采用的樣本量為400g/桶,養(yǎng)殖水體為300L,相比之下特定生長率較低。養(yǎng)殖密度有所不同是最大的原因,養(yǎng)殖密度限制了仿刺參的生長。在這里情況下,3d和5d換水組特定生長率差異不顯著,考慮到生產(chǎn)經(jīng)過中換水成本的因素,故5d換水一次是最佳的換水頻次。3.3換水頻次對氮、磷輸入的影響從本試驗(yàn)?zāi)軌蚩闯?不同的微生態(tài)制劑在不同含量下,仿刺參的成活率差異不顯著(P0.05),特定生長率卻顯著差異(P0.05)。在氮、磷輸入上,由于是室內(nèi)養(yǎng)殖,系統(tǒng)比擬單一,不及養(yǎng)殖池塘的養(yǎng)殖環(huán)境復(fù)雜,故飼料中的氮、磷輸入占最大比例,分別為66.3%~74.5%,95.7%~96.6%。由于換水頻次的不同,且海水中含氮較多,含磷較少。在氮輸入比擬上,各組差異顯著(P0.05),磷輸入上差異不顯著(P0.05)。劉峰等[20]研究池塘養(yǎng)殖仿刺參時(shí)發(fā)現(xiàn),換水是氮、磷輸入的主要途徑。李玉全等[21]研究了對蝦的養(yǎng)殖密度,飼料是養(yǎng)殖系統(tǒng)氮、磷輸入的主要途徑。可見,環(huán)境不同,氮、磷的輸入有很大差異。3.4換水頻次對氮、磷輸出的影響換水頻次對氮收支的影響,從本試驗(yàn)的結(jié)果比擬得知,養(yǎng)殖系統(tǒng)中,飼料中的總氮逐步轉(zhuǎn)化為海水和仿刺參的氮,在不同的換水頻次下,氮轉(zhuǎn)化率不同,換水頻次較高時(shí),飼料中氮轉(zhuǎn)移到仿刺參中效率就較高。孟雷明等[22]研究鹽度對刺參碳、氮收支的影響,刺參攝取的氮主要消耗在糞便中,其次是代謝消耗,用于生長的氮最少。與本試驗(yàn)類似,本試驗(yàn)殘餌糞便中的輸出氮占主要比例。關(guān)于總磷的輸出奉獻(xiàn),殘餌糞便占總磷輸出最主要的部分,在未換水的情況下,殘餌糞便中含磷達(dá)92.3%,轉(zhuǎn)化到海水和仿刺參中的磷量相比各試驗(yàn)組來講要少,且差異