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文檔簡(jiǎn)介
第生物科學(xué)《生物化學(xué)》期末復(fù)習(xí)要點(diǎn)2022生物科學(xué)《生物化學(xué)》期末復(fù)習(xí)要點(diǎn)(僅供參考)
一、生物分子結(jié)構(gòu)與功能
(一)生物分子的組成
1、化學(xué)元素:蛋白質(zhì)—N—16%
核酸—P—9.9或9.4%
2、基本單位:蛋白質(zhì)——氨基酸(L-α氨基酸-特殊氨基酸-酸性氨基酸、堿性氨基酸-
含硫氨基酸、亞氨基酸、芳香族氨基酸、必需氨基酸)——
肽鍵、氨基酸等電點(diǎn)以及計(jì)算,除甘氨酸外都有旋光性
核酸——核苷酸(β-C-N糖苷鍵)——3,5磷酸二酯鍵
(堿基-原子定位、核糖-β-D核糖和β-D-2脫氧核糖)
基本概念:堿基、核糖、核苷、核苷酸(主要是5’P-核苷酸)
游離核苷酸(ATP、GTP、ADP、CTP等)
特殊核苷酸(cAMP-腺苷酸環(huán)化酶催化分子內(nèi)二酯鍵、cGMP)
RNA含量:rRNA最多、tRNA稀有堿基最多、mRNA代謝
最活躍
序列分析:雙脫氧核苷酸(核糖第2和第3碳原子脫氧)的
引入+聚丙烯氨酰胺凝膠電泳
脂類——重點(diǎn)脂肪(甘油+三個(gè)脂肪酸)
磷脂(甘油與磷酸結(jié)合+極性基團(tuán))
生物膜:流動(dòng)鑲嵌模型-磷脂雙分子層為主要骨架-蛋白質(zhì)決定
生物膜的功能-具有流動(dòng)性和選擇透過性
脂肪酸:飽和和不飽和之分,人體內(nèi)不能合成不飽和脂肪酸(必
需脂肪酸)
線粒體膜:外膜通透性高,內(nèi)膜通透性低,內(nèi)膜向內(nèi)突出增大
膜表面積,利于生物代謝
維生素與輔酶——分類:水溶性VB和VC-脂溶性ADEK
VB1——TPP——丙酮酸脫羧酶——腳氣病
VB2——FMN、FAD——脫氫酶
VPP——煙酸——NAD、NADP——脫氫酶
VB3——泛酸——CoA、ACP——?;d體
VB6——吡哆素——PLP、PMP——轉(zhuǎn)氨酶、氨基酸脫羧酶、
VH——生物素——羧基載體(丙酮酸、乙酰CoA羧化酶)
VB11——葉酸——一碳單位載體(磺胺類藥物競(jìng)爭(zhēng))
VB12——鈷胺素—甲基轉(zhuǎn)移
硫辛酸——?;d體(丙酮酸、戊二酸脫氫酶系)
VC——壞血病
VA——夜盲癥VD——佝僂病VE——育酚VK——凝血
3、結(jié)構(gòu):(1)一級(jí)結(jié)構(gòu)—蛋白質(zhì)——氨基酸組成和序列—肽鍵-氨基端和羧基端
肽鍵特征:具有雙鍵性質(zhì),不能自由旋轉(zhuǎn),比單鍵短,雙鍵長
肽平面:6個(gè)原子,反式排列
一級(jí)結(jié)構(gòu)—核酸——核苷酸的組成和排列順序——3,5磷酸二酯
鍵,方向5’→3’
(2)二級(jí)結(jié)構(gòu)—蛋白質(zhì)——α-螺旋、β-片層、β-轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲
各種二級(jí)結(jié)構(gòu)特征:重點(diǎn)α-螺旋:螺距、氨基酸之間距離
核酸——DNA雙螺旋特征(Z-DNA、B-DNA)-堿基配對(duì)原則-查伽
夫規(guī)則
(核糖、糖苷鍵、堿基連接、位置、堿基互補(bǔ)氫鍵、堿基結(jié)構(gòu))
B-DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)要點(diǎn)(反向平行、螺旋直徑2nm、螺距3.4nm、
螺旋一圈10對(duì)堿基、右手螺旋、大溝和小溝)
穩(wěn)定因素:堿基堆積力(最主要維持縱向穩(wěn)定)和氫鍵(維持橫向
穩(wěn)定)
(3)高級(jí)結(jié)構(gòu)
蛋白質(zhì)——三級(jí)結(jié)構(gòu)—非共價(jià)力(主要是疏水相互作用)—結(jié)構(gòu)域
四級(jí)結(jié)構(gòu)—多亞基(非共價(jià)力氫鍵、疏水鍵、鹽鍵)
變性(高級(jí)結(jié)構(gòu)破壞,一級(jí)結(jié)構(gòu)不變)與復(fù)性
蛋白質(zhì)穩(wěn)定的因素(水化膜與雙電層)
實(shí)例:血紅蛋白和肌紅蛋白的氧合曲線以及S型的意義。協(xié)同效
應(yīng)、別構(gòu)效應(yīng)
核酸——存在形式:染色體(超螺旋)-核小體-組蛋白(八聚體)
146長-左旋纏繞1.65圏+H1組蛋白=200bp
RNA的高級(jí)結(jié)構(gòu):tRNA(二級(jí)結(jié)構(gòu)三葉草型、三級(jí)結(jié)構(gòu)到L型)四環(huán)四臂(莖環(huán)結(jié)構(gòu)、反密碼環(huán)、氨基酸臂)、稀有堿基、3’端特征、參與氨基酸活化與轉(zhuǎn)運(yùn)
特殊核酸——核酶(起催化作用的是核酸)
4、性質(zhì):(1)光學(xué)性質(zhì):蛋白質(zhì)(三種氨基酸-名稱-摩爾吸光系數(shù))-280nm-旋光性
變性:我國吳憲提出的。影響穩(wěn)定的因素都可以引起變性。
核酸(堿基共軛雙鍵)-260nm-增色效應(yīng)(DNA或RNA變性-
粘度)-減色效應(yīng)(復(fù)性)-Tm(變性一半的溫度-GC越多越高)
DNA變性與復(fù)性:雜交DNA-RNA、退火(復(fù)性緩慢冷卻)
核酸分析方法—印跡法(Southern-DNA、N-RNA、W-蛋白質(zhì))
(2)顏色反應(yīng):蛋白質(zhì)-雙縮脲-氨基酸茚三酮反應(yīng)
(3)分離與純化:蛋白質(zhì)分離
電泳——電荷性質(zhì)(等電點(diǎn))與分子量大小
(SDS)
透析——分子量大小
層析——分配系數(shù)不一樣-親和層析(配基和配體專一性
結(jié)合)-離子交換(電荷性質(zhì))-凝膠過濾(分子量
大先洗脫出來)-紙上層析(氨基酸分離與鑒定)
鹽析——中性鹽破壞水化膜
核酸——電泳(電荷性質(zhì)和分子量大小)
層析(親和層析分離mRNA)
(二)酶——特殊的蛋白質(zhì)
1、全酶=酶蛋白+輔因子(輔基和輔酶):輔基結(jié)合牢固、輔酶結(jié)合疏松
特異性決定于酶蛋白;輔因子傳遞電子、H和化學(xué)基團(tuán)
2、必需基團(tuán):活性中心內(nèi)的必需基團(tuán)+活性中心外的必需基團(tuán)
活性中心內(nèi)的必需基團(tuán)=結(jié)合中心+催化中心
活性中心外的必需基團(tuán)=穩(wěn)定酶的分子空間構(gòu)象
3、酶的特點(diǎn):只催化熱力學(xué)允許反應(yīng)、不增加不減少、不改變平衡點(diǎn)、高效本質(zhì)降低
活化能、有專一性、活性可調(diào)
4、反應(yīng)機(jī)制:最重要的是誘導(dǎo)契合學(xué)說——酶分子具有柔性
5、酶的活力:反應(yīng)速度-測(cè)定初速度,底物濃度低于最大速度底物濃度5%.
影響酶活力的六個(gè)因素:酶量一定,底物濃度;溫度-最適溫度;酸
堿度-最適pH,不是pI;底物一定,酶濃度;激活劑和抑制劑
酶動(dòng)力學(xué)方程:米氏方程-雙倒數(shù)作圖-橫坐標(biāo)、縱坐標(biāo)
米氏常數(shù)Km:代表酶與底物親和力,越小親和力越大-最適底物
科學(xué)家:Michaelis和Menten
6、抑制劑:不可逆-與酶必需基團(tuán)共價(jià)結(jié)合
可逆-與酶非共價(jià)結(jié)合-可以除去:三種抑制的特點(diǎn)(結(jié)合位點(diǎn)、
Km的變化和計(jì)算、Vma某的變化和計(jì)算)
二、生物新陳代謝
(一)糖代謝
1、糖的消化吸收:依賴于特定載體的主動(dòng)吸收過程,需要消耗能量
2、糖的無氧分解——糖酵解——有氧和無氧都要進(jìn)行
(1)部位:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。葡萄糖→丙酮酸的過程
(2)關(guān)鍵酶:催化不可逆的酶(己糖激酶、6-P-果糖激酶、丙酮酸激酶)
和糖異生對(duì)應(yīng)起來(丙酮酸羧化酶-線粒體、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、二磷酸果糖
磷酸酶、6-P葡萄糖磷酸酶)
(3)脫氫:3-P甘油醛脫氫→1,3-2-P甘油酸——輔酶NADH(有氧,穿梭進(jìn)入線粒
體-α-磷酸甘油穿梭、蘋果酸-天冬氨酸穿梭)
(無氧,還原丙酮酸→乙醇或乳酸)——乳酸脫氫酶-同工酶
(4)放能:底物磷酸化——1,3-2-P甘油酸→3-P甘油酸(ATP)
磷酸烯醇式丙酮酸→丙酮酸
(5)能量:葡萄糖凈生成2ATP+2NADH,糖原-1-磷酸葡萄糖凈生成3ATP
3、丙酮酸有氧氧化——三羧酸循環(huán)+氧化磷酸化——丙酮酸→CO2+NADH+FADH2
(1)部位:線粒體基質(zhì)。原核在質(zhì)膜
(2)丙酮酸脫羧——乙酰CoA-酶系(丙酮酸脫羧酶、二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰酶、二氫
硫辛酸脫氫酶)第一個(gè)CO2產(chǎn)生。脫氫輔酶FADH2→NADH2
(酮戊二酸脫氫酶系相似)
(3)檸檬酸循環(huán)——關(guān)鍵酶:檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶、酮戊二酸和丙酮酸脫氫酶系
脫氫:四步(三個(gè)NAD、一個(gè)FAD)
檸檬酸→α酮戊二酸→琥珀酰CoA、蘋果酸→草酰乙酸
琥珀酸→延胡索酸(FAD)
底物磷酸化:琥珀酰COA→琥珀酸
脫羧:檸檬酸→α酮戊二酸→琥珀酰CoA
能量:乙酰輔酶A開始10個(gè)ATP(3個(gè)NADH、1個(gè)
FADH2、一次底物磷酸化)
特殊:三個(gè)羧基-檸檬酸、異檸檬酸
兩個(gè)羧基-酮戊二酸、琥珀酸、草酰乙酸、蘋果酸、延胡索酸
琥珀酸脫氫酶(線粒體特征性酶,疏水性氨基酸多,位于線
粒體內(nèi)膜上的不溶性酶)
意義:獲取能量的主要方式。
4、其他途徑——磷酸戊糖途徑
(1)部位:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)
(2)階段:氧化(脫碳轉(zhuǎn)能)和非氧化階段(基團(tuán)轉(zhuǎn)移)
(3)關(guān)鍵酶:6-P葡萄糖脫氫酶、6-P葡萄糖酸脫氫酶——輔酶NADPH2
(4)中間產(chǎn)物:三碳、四碳、五碳、六碳、七碳
(5)意義(還原動(dòng)力;部分能量;核酸等物質(zhì)的合成碳源;維持紅細(xì)胞和含巰基蛋白質(zhì)構(gòu)象)
(6)特殊反應(yīng):轉(zhuǎn)醛和轉(zhuǎn)酮反應(yīng)
(7)特點(diǎn):6個(gè)6-P葡萄糖→5個(gè)6-P葡萄糖+6CO2+12NADPH+H+
5、糖異生——非糖物質(zhì)(甘油、丙酮酸、乳酸、丙酸、氨基酸)→糖
(1)部位:動(dòng)物肝臟
(2)關(guān)鍵酶:催化越過酵解不可逆的三個(gè)反應(yīng):丙酮酸羧化酶-線粒體、磷酸烯醇
式丙酮酸羧激酶、二磷酸果糖磷酸酶、6-P葡萄糖磷酸酶
6、糖原合成-非還原端開始
(1)關(guān)鍵酶:糖原合成酶——磷酸化調(diào)控;UDPG焦磷酸化酶;分支酶
(2)供能:UTP——UDPG參與,直接摻入1-P-G
7、糖原分解-非還原端開始
(1)關(guān)鍵酶:糖原磷酸化酶a,轉(zhuǎn)移酶,脫支酶
(2)產(chǎn)物:1-P葡萄糖
(3)磷酸化酶的共價(jià)修飾調(diào)控:糖原磷酸化酶b磷酸化為a(有活性)
糖原合成酶a(有活性)磷酸化為b
具有激素調(diào)控的級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)
(二)脂類代謝
1、脂肪動(dòng)員:激素敏感性脂肪酶-磷酸甘油和脂肪酸(312順序)
2、甘油分解——甘油激酶-3-P甘油——脫氫——P二羥丙酮
3、脂肪酸分解——產(chǎn)物乙酰輔酶A
(1)脂肪酸活化——原核(細(xì)胞溶膠)真核(細(xì)胞質(zhì)基質(zhì))
脂肪酸→脂酰輔酶A(脂酰輔酶A合成酶或硫激酶I)-ATP→AMP
(2)脂酰輔酶A→線粒體——肉堿轉(zhuǎn)移系統(tǒng)(長鏈)短鏈直接進(jìn)入(肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶I或II)
(3)分解:脫氫-水合-脫氫-硫解——循環(huán)(發(fā)生在α-β之間。關(guān)鍵每步反應(yīng)的酶和
分子結(jié)構(gòu)特征)——乙酰輔酶A
輔酶:第一次脫氫FAD第二次脫氫NAD
(4)特殊:奇數(shù)碳原子——乙酰COA+丙酰CoA(羧化→琥珀酰COA)
不飽和碳原子——烯脂酰CoA異構(gòu)酶(一個(gè)雙鍵少一次脫氫)
ω氧化——二羧酸——β-氧化——琥珀酰CoA(分解加速)
α氧化——每次掉一個(gè)碳原子
(5)能量:一個(gè)乙酰輔酶A-10個(gè)ATP;每次循環(huán)4個(gè)ATP
4、酮體:肝臟——乙酰乙酸、丙酮、β-羥基丁酸
關(guān)鍵酶:HMG-CoA裂解酶(需要三個(gè)乙酰輔酶A參與)HMG(β羥β甲基戊二酰)
特點(diǎn):正常代謝活動(dòng),肝臟合成,肝臟不能利用,在腎臟、肌肉、腦利用
5、脂肪酸合成:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)
(1)原料:乙酰輔酶A(糖代謝、脂肪酸分解、氨基酸分解)-轉(zhuǎn)移-檸檬酸系統(tǒng)(關(guān)
鍵檸檬酸裂解酶、檸檬酸合酶、蘋果酸酶)
直接原料:丙二酸單酰CoA(乙酰輔酶A羧化酶-生物素-限速酶)
(2)部位:細(xì)胞質(zhì)ACP(酰基載體蛋白)
(3)過程:?jiǎn)?dòng)和裝載-連接到ACP巰基上
縮合(脫羧)-還原-脫水-還原-循環(huán)-釋放(硫酯酶)
(4)特點(diǎn):還原動(dòng)力:NADPH(磷酸戊糖、蘋果酸酶)每次循環(huán)需要2個(gè)NADPH
直接碳源:丙二酰ACP
產(chǎn)物:最長16碳軟脂酸
延長:線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(載體CoA不是ACP),原料乙酰CoA
不飽和酸:脂酰CoA去飽和酶
6、三酰甘油合成:三磷酸甘油(甘油磷酸化、磷酸二羥丙酮脫氫)+脂酰輔酶A
(三)蛋白質(zhì)代謝——氨基酸分解
1、蛋白質(zhì)降解——胞外(消化酶)胞內(nèi)(溶酶體降解和泛素降解-泛素活化酶、泛
素轉(zhuǎn)移酶、泛素連接酶)
胞內(nèi):氨基酸去路(蛋白質(zhì)、分解、糖和脂肪)
2、氨基酸分解——脫羧和脫氨
(1)脫氨:轉(zhuǎn)氨(轉(zhuǎn)氨酶:谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶-吡哆醛或吡哆胺為輔酶)
-轉(zhuǎn)氨酶氨基受體(主要α-酮戊二酸→谷氨酸)
脫氨:谷氨酸脫氫酶→α-酮戊二酸
聯(lián)合脫氨基:轉(zhuǎn)氨+脫氨(轉(zhuǎn)氨酶+谷氨酸脫氫酶)
(2)尿素:部位:線粒體(2步)+細(xì)胞基質(zhì)(3步)
過程:N(氨+天冬氨酸)、C(碳酸)
氨甲酰磷酸→氨甲酰磷酸合成酶I(尿素)II(嘧啶)
氨甲酰磷酸+鳥氨酸→瓜氨酸+天冬氨酸→精氨酸代琥珀酸→
精氨酸(+延胡索酸)→尿素+鳥氨酸——循環(huán)
特征:能量-4個(gè)高能鍵(氨甲酰磷酸合成2個(gè)、谷氨酸+天冬氨酸2
個(gè)ATP2個(gè)高能鍵)
聯(lián)系糖代謝——延胡索酸
關(guān)鍵酶:氨甲酰磷酸合成酶I(N-乙酰谷氨酸激活)
意義:消除氨的毒性
(3)碳骨架——脫羧→胺、→三羧酸循環(huán)
組氨酸→組胺色氨酸→5’羥色胺絲氨酸→乙醇胺
半胱氨酸→?;撬峁劝彼帷?氨基丁酸
3、一碳單位:亞胺甲基、甲?;?、羥甲基、亞甲基、次甲基、甲基(一碳單位載
體四氫葉酸轉(zhuǎn)移)
(四)氧化磷酸化——電子傳遞(氧化過程)+ATP生成(磷酸化至少需要30.5KJ/mol能量)
1、發(fā)生部位:線粒體內(nèi)膜
2、氧化磷酸化途徑:
NADH→FMNH2→COQH2→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2P/O=2.5
組成(復(fù)合體Ⅰ-Ⅲ-Ⅳ)——泵質(zhì)子(4-4-2)磷酸化偶聯(lián)(Ⅰ-Ⅲ-Ⅳ)
釋放能量-220KJ,2.5ATP,其余能量(熱能、體溫、參與有關(guān)分子或離子跨膜,如
ATP外移、ADP內(nèi)移)
琥珀酸→FADH2→COQH2→Cytb→Cytc1→Cytc→Cytaa3→O2P/O=1.5
組成(復(fù)合體Ⅱ-Ⅲ-Ⅳ)——泵質(zhì)子(4-2)磷酸化偶聯(lián)(Ⅲ-Ⅳ)
釋放能量-150KJ
3、磷酸化機(jī)制:化學(xué)滲透學(xué)說
ATP合成酶復(fù)合體:F0(質(zhì)子回流通道)+F1(可溶性,ATP合成酶-ATP合成)
4、特別知識(shí)點(diǎn):(1)排列順序:低還原電位→高還原電位
(2)電子傳遞途徑:Fe3++e→Fe2+Cu+→Cu2+
(3)不溶性酶:琥珀酸脫氫酶(線粒體標(biāo)志性酶)
(4)脂溶性遞氫體:CoQ
(5)Cytc:膜外側(cè),不屬于哪一個(gè)復(fù)合體,水溶性
(6)Cyt只傳遞電子,不傳遞氫
5、解偶聯(lián):2,4-二硝基苯酚(酸性不解離,脂溶性能透過線粒體膜,同時(shí)帶質(zhì)子回流,而不
經(jīng)過F0通道)→繼續(xù)傳遞電子,釋放能量(產(chǎn)熱不產(chǎn)ATP)
抑制劑:安密妥——復(fù)合體Ⅰ;抗霉素A-Ⅲ;氰化物,硫化物-Ⅳ
(四)核酸代謝:
1、核酸分解:核酸酶-3,5磷酸二酯鍵;核苷酸酶-核苷酸→核苷+磷酸;核苷磷酸化
酶-核苷→1-P核戊糖+堿基
2、核酸酶:內(nèi)切酶+外切酶
3、堿基分解:腺核苷酸(脫氨)→次黃嘌呤核苷酸→次黃嘌呤(氧化)→黃嘌呤
鳥嘌呤(脫氨)→黃嘌呤(氧化酶)→尿酸(人體)—痛風(fēng)(別嘌呤醇可減緩)
嘧啶:胞嘧啶、尿嘧啶→β-丙氨酸;胸腺嘧啶→氨基異丁酸
4、核苷酸合成:
(1)嘌呤核苷酸合成:起始物——5-磷酸核糖焦磷酸開始
順序——(3.9-谷氨酰胺;2,8-一碳單位;457-
甘氨酸、6-碳酸;1-天冬氨酸)
一碳單位載體:四氫葉酸
特點(diǎn):先糖后環(huán)化
第一產(chǎn)物:次黃嘌呤核苷酸
腺嘌呤——次黃嘌呤核苷酸+天冬氨酸(GTP)
鳥嘌呤——次黃嘌呤核苷酸+谷氨酰胺(ATP)
(2)嘧啶核苷酸合成:起始物——氨甲酰磷酸(氨甲酰磷酸合成酶II區(qū)別尿素形成)
順序——23-4561(23-氨甲酰;4561-天冬氨酸)
特點(diǎn)——先環(huán)化后糖
先合成環(huán)+5-磷酸核糖→乳清核苷酸(脫羧)
第一產(chǎn)物:乳清苷酸(脫羧)→尿嘧啶核苷酸
UTP+谷氨酰胺→CTP
(3)脫氧核苷酸合成:核苷酸二磷酸水平還原(NADPH)→脫氧核苷二磷酸
5、DNA合成——復(fù)制+逆轉(zhuǎn)錄(cDNA)
(1)DNA生物合成——復(fù)制——基礎(chǔ)(堿基互補(bǔ)配對(duì)原則)
原料:四種脫氧核苷三磷酸(dNTP)
場(chǎng)所:真核(細(xì)胞核)
合成酶:聚合酶—形成3’5’-磷酸二酯鍵和氫鍵
原核三種(DNA-PolⅠ(修復(fù)、矯正、切引物)、Ⅱ、
Ⅲ-真正的聚合酶)
真核五種(α、β、γ、δ-真正聚合酶、ε)
拓?fù)洚悩?gòu)酶-解開或松弛超螺旋(剪斷-連接)
解鏈酶-打開雙鍵(耗能-一對(duì)堿基2個(gè)ATP)
連接酶-連接DNA切口(相鄰5-P和3-OH,另一條鏈完整)
-3’5’-磷酸二酯鍵
方向:5’→3’(模板3’→5’)
特點(diǎn):半保留-半不連續(xù)(前導(dǎo)鏈連續(xù)、后隨鏈不連續(xù))
真核-多起點(diǎn)同時(shí)雙向?qū)ΨQ復(fù)制-多復(fù)制子
原核-單起點(diǎn)(對(duì)稱θ、不對(duì)稱-滾環(huán)、不同起點(diǎn)D
環(huán))—單復(fù)制子
半不連續(xù):岡崎片段(方向相同)
半保留:證明(同位素標(biāo)記+SeCl密度梯度離心)
引物:引發(fā)體G蛋白(RNA聚合酶)-本質(zhì)RNA-模板-DNA
起點(diǎn):富含AT
單鏈結(jié)合蛋白:SSB(維持單鏈構(gòu)象,防止DNA酶解)-再使用
端粒:端粒酶(蛋白質(zhì)+RNA)修復(fù)
(2)RNA生物合成——轉(zhuǎn)錄+復(fù)制
原料:四種核糖核苷酸(NTP)
場(chǎng)所:核內(nèi)
合成酶:RNA聚合酶
原核六聚體(α2ββ’σω)-σ(識(shí)別啟動(dòng)子)
ββ’-聚合活性;α-轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合
真核(RNA-PolⅠ-rRNA;Ⅱ-mRNA;Ⅲ-tRNA等)
方向:5’→3’
引物:不需要
特點(diǎn):非對(duì)稱轉(zhuǎn)錄
啟動(dòng)子:原核—-10區(qū)(PribnowBo某)-TATAAT-雙鏈打開容易
-35區(qū)-聚合酶識(shí)別
真核—順式作用元件+反式作用因子(識(shí)別起始部位)
起始復(fù)合物:DNA+RNA聚合酶+RNA+起始因子
終止子:原核-ρ因子識(shí)別終止序列+莖環(huán)終止(回文對(duì)稱序列)
轉(zhuǎn)錄加工:原核mRNA不需要加工——邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯,壽命3min
真核mRNA加工(加帽+加尾+切除內(nèi)含子+可變剪
接)
hnRNA→mRNA(比原DNA短4-5倍)
帽子:5’7mGpppN尾:Pol(A)-親和層析分離
內(nèi)含子:插入序列(需要切除)-1981,Cech-核酶
外顯子:編碼序列(需要保留)
tRNA加工:剪接+3’(CCA-OH)+稀有堿基(甲基化、
脫氨、還原、轉(zhuǎn)換→假尿嘧啶、甲基化腺嘌呤
和鳥嘌呤、二氫尿嘧啶、次黃嘌呤)
(五)蛋白質(zhì)的生物合成——mRNA為模板+tRNA(翻譯者)+活化氨基酸
部位:細(xì)胞質(zhì)核糖體(核糖蛋白體)-80%RNA
多聚核糖體-幾十到100個(gè)核糖體集在一起-提高合成效率
三個(gè)重要位點(diǎn):A位-氨基酰tRNA結(jié)合部位(肽鍵
形成部位)
P位-肽酰tRNA部位
E位:空載tRNA離開部位
模板:mRNA-代謝最活躍,含量5%RNA
原核-多順反子;真核-單順反子
方向:N端→C端(氨基端→羧基端)
過程:氨基酸活化-氨酰-tRNA形成(兩個(gè)高能磷脂鍵-ATP)
(氨基酸羧基連在tRNA的最后A的核糖3-OH→
tRNA-A[3-Aa])
起始tRNA:原核起始甲硫氨酸→甲酰化-fMet-tRNAifMet
真核不甲?;?tRNAiMet
起始復(fù)合物:30S→mRNA→fMet-tRNAf→50S
起始tRNA進(jìn)入P位(起始密碼在此),A位
被IF-1占據(jù)——GTP供能
真核起始:起始因子多。40S→Met-tRNAi→
mRNA→60S(GTP供能)
多肽延伸:(1)氨酰-tRNA進(jìn)入A位。mRNA密碼與
tRNA反密碼配對(duì)。
(2)P位tRNA轉(zhuǎn)位到A位的氨酰-tRNA的
氨基上,轉(zhuǎn)肽后形成肽鍵。
(3)mRNA由5’→3’移動(dòng)一個(gè)密碼子
(GTP供能)
(4)循環(huán):方向N→C延伸
多肽終止:RF識(shí)別終止密碼子。
折疊加工:邊合成
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