實(shí)驗(yàn)一 四大基本組織的觀察課件

解剖與生理學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及學(xué)時(shí)安排考核方法1、考勤（10%）2、課前預(yù)習(xí)（10%）3、課堂表現(xiàn)：規(guī)范操作+隨堂抽查（50%）4、實(shí)驗(yàn)報(bào)告：書寫工整、畫圖及文字說明清楚、分析準(zhǔn)確（30%）

目的要求聯(lián)系功能觀察了解四種基本組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及分布。學(xué)習(xí)體腔膜或腸系膜平鋪片的制作方法。學(xué)習(xí)疏松結(jié)締組織新鮮平鋪片的制作方法及活體染色方法。材料與器械蛙，小鼠，解剖器械一套（手術(shù)剪、解剖針、眼科鑷），注射器及針頭，滴管，蓋玻片，顯微鏡;1%硝酸銀水溶液，1%臺(tái)盼藍(lán)生理鹽水溶液，甘油，蒸餾水，組織切片手術(shù)剪：彎、直、眼科剪手術(shù)剪主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。此外，也可用來分離組織，即利用剪刀的尖端，插入組織間隙，分離無大血管的結(jié)締組織等。手術(shù)剪分尖頭剪和鈍頭剪。其尖端還有直、彎之別。生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常習(xí)慣于用彎型手術(shù)剪剪毛。另外，還有一種小型手術(shù)剪，稱眼科剪，主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織。眼科剪也有直頭與彎頭之分。正確的執(zhí)剪姿勢即用拇指與環(huán)指(即無名指)持剪，示指(即食指)置于手術(shù)剪的上方。手術(shù)鑷主要用于夾持或牽拉切口處的皮膚或肌肉組織。眼科鑷用于夾持細(xì)軟組織。手術(shù)鑷有圓頭、尖頭兩種，又有直頭和彎頭、有齒和無齒之別，而且長短不一，大小不等，可根據(jù)手術(shù)需要選用。通常，有齒鑷主要用于夾持較堅(jiān)韌或較厚的組織，如皮膚、筋膜、肌腱等；無齒鑷主要用于夾持較細(xì)軟的組織，如血管、黏膜等；正確的執(zhí)鑷姿勢類似于執(zhí)筆式，較為靈活方便。止血鉗主要作用是分離組織和止血，不同類型的止血鉗又有不同的用途。執(zhí)止血鉗的姿勢均與執(zhí)剪刀的姿勢相同。常用止血鉗有以下3種：

(1)直止血鉗分長短兩種類型，又有有齒和無齒之別。無齒止血鉗主要用以夾住淺層出血點(diǎn)，以便止血，也可用于淺部的組織分離。有齒止血鉗主要用于強(qiáng)韌組織的止血，提起皮膚等。

(2)彎止血鉗與直型的大同小異，也分長短兩種，主要用于深部組織或內(nèi)臟出血點(diǎn)的止血。

(3)蚊式止血鉗(蚊嘴鉗)此種止血鉗頭端細(xì)小，又稱小止血鉗，適用于細(xì)嫩組織的止血和分離，不宜鉗夾大塊或堅(jiān)硬組織。小鼠的抓取小鼠的抓取保定：

器材：小鼠飼養(yǎng)盒+盒蓋1套。

方法步驟：

1、用右手拇指和食指捏住小鼠尾巴中部將小鼠提起，放在飼養(yǎng)盒蓋上。

2、用左手拇指和食指迅速、準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后、頸背部的皮膚，將小鼠提起。

3、翻轉(zhuǎn)左手掌，以左手掌心和中指夾小鼠背部的皮膚，使小鼠整個(gè)呈一條直線。

4、用左手無名指壓住小鼠背部的皮膚，小指壓住小鼠的尾巴根部。

5、松開捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。

皮下注射蛙類的抓取上皮組織構(gòu)成：大量形態(tài)較規(guī)則、排列緊密的細(xì)胞特點(diǎn)：無血管、有極性（游離面、基底面和側(cè)面）、有基膜分類：被覆上皮－分布于體表，體內(nèi)管、腔、囊的內(nèi)表面*腺上皮－構(gòu)成腺體功能：保護(hù)、吸收、分泌、排泄上皮組織

被覆上皮：排列成膜狀、被覆在身體和某些器官的外表面，或襯附于體內(nèi)各管、腔、囊的內(nèi)表面。被覆上皮的種類如下：被覆上皮單層上皮單層扁平上皮單層立方上皮單層柱狀上皮假復(fù)層纖毛柱狀上皮復(fù)層上皮復(fù)層扁平上皮復(fù)層變移上皮蛙體腔膜或腸系膜平鋪片的制作和觀察：①將蛙雙毀髓處死，取體腔膜或腸系膜放于載玻片上，以解剖針將其挑開展平，稍晾干；②加1%硝酸銀水溶液數(shù)滴于標(biāo)本上，將標(biāo)本浸蓋；③立即放在日光下曬3~5min（或在日光燈下10~15min）；④至標(biāo)本變?yōu)闇\褐色時(shí)，傾去載玻片上的溶液，用蒸餾水洗凈，加上1~2滴甘油，蓋上蓋玻片，即可用于顯微鏡觀察。上皮組織單層立方上皮取甲狀腺切片（HE染色）觀察：表面觀：細(xì)胞呈六角形垂直觀：細(xì)胞立方形，核圓居于細(xì)胞中央甲狀腺H-E染色3.5×40

濾泡濾泡旁細(xì)胞濾泡上皮細(xì)胞

上皮組織分布:腎小管甲狀腺假復(fù)層纖毛柱狀上皮由柱狀細(xì)胞、梭形細(xì)胞、錐體形細(xì)胞和杯狀細(xì)胞構(gòu)成

游離面常見有纖毛基細(xì)胞一種腺細(xì)胞假復(fù)層纖毛柱狀上皮人氣管H-E染色3.5×40

纖毛杯狀細(xì)胞基膜上皮組織分布：呼吸道

復(fù)層扁平上皮復(fù)層扁平上皮(stratifiedsquamousepithelium)由基底面向游離面依次是：基底細(xì)胞多邊形細(xì)胞扁平細(xì)胞分布：皮膚的表皮口腔、食管、陰道角化未角化

復(fù)層扁平上皮H-E染色3.5×40A未角化型人食管表皮細(xì)胞B角化型人手指表皮真皮乳頭上皮組織復(fù)層扁平上皮上皮組織淺層細(xì)胞扁平中部細(xì)胞多邊形基底層細(xì)胞立方或矮柱狀結(jié)締組織疏松結(jié)締組織1、疏松結(jié)締組織活體染色標(biāo)本的制作與觀察：①取小鼠一只，皮下注射1%臺(tái)盼藍(lán)生理鹽水溶液少許，30~60min后，頸椎脫臼法處死；②剪開皮膚，在注射處附近剪取一小塊皮下結(jié)締組織，置于載玻片上；③雙手各持一解剖針將組織平鋪于載玻片上；④待標(biāo)本稍干后，加1~2滴甘油，蓋上蓋玻片即可觀察。結(jié)締組織疏松結(jié)締組織切片的觀察：

兔皮下組織鋪片（A）和腹膜鋪片（B）5×20A活體注射錐蟲藍(lán)+醛復(fù)紅染色+偶氮洋紅染色紫藍(lán)色細(xì)絲為彈性纖維，粉紅色條帶為膠原纖維B活體注射鋰卡紅+鐵蘇木精染色成纖維細(xì)胞巨噬細(xì)胞結(jié)締組織致密結(jié)締組織取跟踺縱切片（HE染色）觀察：致密結(jié)締組織人肌腱HE染色5×20

腱細(xì)胞成行排列膠原纖維成束排列結(jié)締組織特點(diǎn):細(xì)胞和基質(zhì)相對(duì)較少,纖維成分較多分類：1.規(guī)則致密結(jié)締組織：大量密集平行排列的粗大膠原纖維，其間有成行排列的成纖維（腱）細(xì)胞；主要構(gòu)成肌腱、腱膜2.不規(guī)則致密結(jié)締組織：粗大膠原纖維縱橫交錯(cuò)，形成致密板層結(jié)構(gòu)，其間有成纖維細(xì)胞，小血管和神經(jīng)等。構(gòu)成真皮、腦硬膜、器官的被膜等處；3、彈性組織：粗大的彈性纖維或平行排列，或編織成膜狀，其間有膠原纖維和成纖維細(xì)胞分布；構(gòu)成韌帶、聲帶、大動(dòng)脈彈性膜等。脂肪組織取小腸切片（HE染色）觀察：特點(diǎn)：HE染色標(biāo)本中，脂滴被溶解，細(xì)胞呈空泡狀，胞核和胞質(zhì)被擠向細(xì)胞的一側(cè)（寶石戒指狀）

脂肪細(xì)胞H-E染色3.5×40

細(xì)胞核骨組織

取骨橫磨片觀察：特點(diǎn)：由于骨組織內(nèi)的軟組織（神經(jīng)、血管、淋巴管、結(jié)締組織）及細(xì)胞都已腐爛，僅剩下空腔和管道。長骨骨干部的橫斷面，在低鏡下可見3~4層外環(huán)骨板、1~2層內(nèi)環(huán)骨板、內(nèi)外環(huán)骨板之間的骨單位和間骨板。骨單位是由中央管和其周圍呈同心圓排列的多層骨板構(gòu)成。高倍鏡下觀察可見骨板內(nèi)或骨板間的卵圓形骨陷窩及骨陷窩向四周發(fā)出的骨小管。長骨磨片5×40黏合線血液采血、涂片、染色制作血液涂片：①取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持載玻片，右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴，使推片與載片夾角保持30~40度平穩(wěn)地向前移動(dòng)，載片上保留下一薄層血膜。②手持玻片在空氣中揮動(dòng)，使血膜迅速干燥，以免血細(xì)胞皺縮。③加瑞氏染液2~3滴，覆蓋整個(gè)血膜，固定0.5~1.0min，滴加等量或稍多的新鮮蒸餾水，與染料混勻染色5~10min。④用清水沖去染液，待干燥后即可置于顯微鏡下進(jìn)行觀察。鏡下觀察血涂片。低倍鏡下分辨白細(xì)胞和紅細(xì)胞，高倍鏡觀察、辨別各種血細(xì)胞和血小板。人血液涂片Wright染色3.3×1001、紅細(xì)胞質(zhì)2、中性粒細(xì)胞（桿狀核）3、中性粒細(xì)胞（分葉核）4、嗜酸性粒細(xì)胞5、嗜堿性粒細(xì)胞6、單核細(xì)胞7、淋巴細(xì)胞肌組織

組成：肌組織

肌細(xì)胞（肌纖維）結(jié)締組織……分類：肌組織橫紋肌平滑肌骨骼肌心肌不隨意肌隨意肌肌組織骨骼肌取骨骼肌縱、橫切片（HE染色）觀察：觀察肌纖維的形態(tài)、胞核的形狀，縱切片上還可見明顯的橫紋，比較縱切和橫切面上的細(xì)胞核的位置和結(jié)構(gòu)差異。骨骼肌縱橫切片3.3×40肌細(xì)胞核肌原纖維

骨骼肌纖維光鏡圖心肌取心室肌縱、橫切片（HE染色）觀察：鏡下可見縱切片上，心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀，卵圓形胞核位于中央。縮小顯微鏡虹彩光圈可見心肌纖維的橫紋，但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見深藍(lán)色的梯形閏盤。橫切片上，心肌纖維為不規(guī)則的圓形，有或無胞核，注意細(xì)胞核的形態(tài)和位置。人心肌纖維縱切片HE染色3.3×40閏盤脂褐素

分布：心臟，收縮具自動(dòng)節(jié)律性，無肌衛(wèi)星細(xì)胞心肌心肌光鏡結(jié)構(gòu)模式圖平滑肌

取小腸縱、橫切片（HE染色）觀察：觀察平滑肌纖維的形態(tài)、胞核的形狀，比較縱切和橫切面上的結(jié)構(gòu)差異。平滑肌縱橫切片HE染色3.3×40分布：廣泛分布于中空性器官管壁內(nèi)形態(tài)：①長梭形，大小和形狀因所在部位和器官的功能狀態(tài)而異；②無橫紋，胞質(zhì)嗜酸性；③單核，棒狀或橢圓形三種肌纖維光鏡比較三種肌纖維電鏡比較神經(jīng)組織取神經(jīng)細(xì)胞分離裝片（Cajal銀染色）觀察：觀察神經(jīng)細(xì)胞的胞體、胞核、突起的形態(tài)。神經(jīng)細(xì)胞分離裝片Cajal銀染色3.3×40實(shí)驗(yàn)報(bào)告四種基本組織標(biāo)本的制備、觀察與繪圖（高倍鏡×40物鏡），要求標(biāo)注出重點(diǎn)結(jié)構(gòu)，并作簡要的文字說明。附一切片清單單層扁平上皮正面觀單層扁平上皮側(cè)面觀單層柱狀上皮假復(fù)層扁平上皮單層立方上皮變移上皮（擴(kuò)張）變移上皮（空虛）復(fù)層扁平上皮疏松結(jié)締組織致密結(jié)締組織脂肪組織心肌切片骨骼肌縱橫切片平滑肌縱橫切