2013中圖版選修1第六章第2節(jié)《DNA片段的擴(kuò)增-PCR技術(shù)》課件

第2節(jié)DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)第2節(jié)DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.理解PCR擴(kuò)增DNA片段的原理。[重點(diǎn)]2.嘗試PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。

[難點(diǎn)]學(xué)習(xí)導(dǎo)航新知初探思維啟動(dòng)一、DNA在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制1.所需的酶：___________酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶等。2.引物：___________。3.原料：__________________。4.原則：___________________。DNA解旋一段RNA四種脫氧核苷酸堿基互補(bǔ)配對原則新知初探思維啟動(dòng)一、DNA在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制DNA解旋一段RNA二、PCR及其過程1.概念：PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，實(shí)際上是在_____模擬細(xì)胞內(nèi)的_______________，形成大量__________的DNA片段。體外DNA復(fù)制過程特異性二、PCR及其過程體外DNA復(fù)制過程特異性2.過程條件過程加樣室溫把PCR緩沖液、_________、一對引物、四種脫氧核苷酸、DNA聚合酶、Mg2＋等成分加入到微量離心管中DNA模板2.過程條件過程加樣室溫把PCR緩沖液、_________、氫鍵一對引物DNA聚合脫氧核苷酸氫鍵一對引物DNA聚合脫氧核苷酸判一判(1)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制和PCR技術(shù)所需的引物一樣，都是RNA。(×)(2)經(jīng)PCR技術(shù)合成的DNA分子中，每條單鏈都含有引物。(×)(3)PCR實(shí)驗(yàn)的原理和操作都十分復(fù)雜，不易于操作。(×)(4)經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸三步操作，DNA片段可呈指數(shù)增長。(√)判一判三、實(shí)驗(yàn)操作1.準(zhǔn)備(1)為了避免__________等因素的污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_________。(2)如果沒有PCR儀，可以設(shè)置3個(gè)恒溫水浴鍋，溫度分別為______、______和______，然后按要求在3個(gè)水浴鍋中來回轉(zhuǎn)移PCR的微量離心管即可。外源DNA高壓滅菌95

℃55

℃72

℃三、實(shí)驗(yàn)操作外源DNA高壓滅菌95℃55℃72℃PCR熱循環(huán)260

nmPCR熱循環(huán)260nm想一想決定PCR反應(yīng)特異性的原因有哪些？【提示】

待擴(kuò)增DNA片段的特異性。想一想要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的比較細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)解旋在解旋酶作用下,細(xì)胞提供能量，部分解開加熱至90℃以上時(shí)，雙鏈全部解開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶引物一小段RNA單鏈DNA要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的比較細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)能量ATP不加循環(huán)次數(shù)生物自身控制30多次子鏈合成一條鏈連續(xù)合成,另一條鏈不連續(xù)合成兩條子鏈為連續(xù)合成,溫度為72℃產(chǎn)物完整DNADNA片段相同點(diǎn)①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸為原料③堿基互補(bǔ)配對原則④子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)能量ATP不加循環(huán)次數(shù)生物自身控制30多特別提醒①PCR反應(yīng)需要可變的溫度，而體內(nèi)DNA復(fù)制需要穩(wěn)定的溫度。②DNA解旋酶的作用是使DNA兩條鏈的氫鍵斷開；DNA聚合酶的作用是將單個(gè)脫氧核苷酸加到已有的單鏈片段的3′端上，需要模板;DNA連接酶連接的是兩條DNA片段的缺口，不需要模板。特別提醒①PCR反應(yīng)需要可變的溫度，而體內(nèi)DNA復(fù)制需要穩(wěn)PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比，主要有兩點(diǎn)不同，它們是(

)①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA②PCR過程不需要DNA聚合酶③PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實(shí)現(xiàn)的④PCR過程中，DNA不需要解旋，直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制例1PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相A．③④

B．①②C．①③

D．②④【解析】

PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比較，主要有兩點(diǎn)不同：①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA，長度通常為15～40個(gè)核苷酸。②PCR過程中，DNA解旋不依賴解旋酶，而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實(shí)現(xiàn)的?！敬鸢浮?/p>

CA．③④B．①②變式訓(xùn)練(2012·成都七中高二檢測)下列關(guān)于DNA復(fù)制和PCR的描述中，正確的是(

)A．DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從5′端延伸DNA鏈B．DNA復(fù)制不需要引物C．引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行結(jié)合D．PCR擴(kuò)增的對象是氨基酸序列變式訓(xùn)練解析：選C。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈，故DNA復(fù)制需要引物，而且它與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對結(jié)合。PCR擴(kuò)增的對象是DNA，而不是氨基酸。解析：選C。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從32013中圖版選修1第六章第2節(jié)《DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)》課件2.PCR擴(kuò)增過程變性復(fù)性延伸預(yù)變性95℃，5min55℃，1min72℃，1min重復(fù)30次95℃，30s55℃，30s72℃，1min最后一次循環(huán)－－72℃，1min2.PCR擴(kuò)增過程變性復(fù)性延伸預(yù)變性95℃，5min55圖示：圖示：3.DNA擴(kuò)增數(shù)目的理論計(jì)算理論上DNA擴(kuò)增呈指數(shù)增長。若只有一條DNA模板，則復(fù)制n次后有2n條；若一開始有m條DNA模板，則復(fù)制n次后有m×2n條；實(shí)際操作過程中，由于無關(guān)變量的影響，一般來說實(shí)驗(yàn)值要略小于理論值。3.DNA擴(kuò)增數(shù)目的理論計(jì)算近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在短時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。例2近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱為__________；而在細(xì)胞中是在__________酶的作用下進(jìn)行的。(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入__________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55°C時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是________________________________________________________________________。(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的__________和________，前者由__________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠__________來維持。(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有2013中圖版選修1第六章第2節(jié)《DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)》課件【解析】

(1)PCR技術(shù)利用熱變性原理使DNA雙鏈之間的氫鍵斷裂，稱為變性，而在細(xì)胞內(nèi)是在解旋酶的作用下使氫鍵斷裂。(2)PCR分為三個(gè)基本反應(yīng)步驟:變性(95℃)、復(fù)性(55℃)、延伸(72℃)，其特異性依賴于與靶序列互補(bǔ)的引物，引物是兩段與待擴(kuò)增DNA序列互補(bǔ)的片段，兩引物之間的距離決定擴(kuò)增片段的長度?！窘馕觥?1)PCR技術(shù)利用熱變性原理使DNA雙鏈之間的氫由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3′端延伸DNA鏈，則DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。(3)PCR技術(shù)與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制不完全相同，除了需要模板、原料、酶以外，至少還需要液體環(huán)境(穩(wěn)定的緩沖液)，每一個(gè)步驟需要適宜的溫度和酸堿度等。(4)一個(gè)DNA分子連續(xù)復(fù)制四次之后，形成16個(gè)DNA分子，15N標(biāo)記的DNA分子有2個(gè)，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例為1/8。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3′端延【答案】

(1)氫變性解旋(2)兩3′從子鏈的5′端向3′端延伸(3)溫度酸堿度PCR儀緩沖液(4)1/8【答案】(1)氫變性解旋互動(dòng)探究(1)PCR中由堿基錯(cuò)配而引起哪種變異？(2)假設(shè)對一個(gè)DNA進(jìn)行擴(kuò)增，第一次循環(huán)時(shí)某一條模板鏈上發(fā)生堿基錯(cuò)配，則擴(kuò)增若干次后檢測所用DNA的擴(kuò)增片段，與原DNA相應(yīng)片段相同的占多少？【提示】

(1)基因突變。(2)50%。互動(dòng)探究【誤區(qū)警示】關(guān)于DNA的擴(kuò)增方向容易發(fā)生混淆，為了明確表示DNA的方向，通常將DNA的羥基(—OH)末端稱為3′端，磷酸基團(tuán)的末端稱為5′端，子鏈從引物3′端開始延伸，而子鏈的合成方向是從5′端向3′端延伸?！菊`區(qū)警示】關(guān)于DNA的擴(kuò)增方向容易發(fā)生混淆，為了明確表示要點(diǎn)三實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果分析1.檢測PCR擴(kuò)增效果的過程要點(diǎn)三實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果分析2.結(jié)果分析DNA片段的擴(kuò)增是否成功的判斷(1)對于電泳檢測的方法，可以通過在紫外線下直接觀察DNA帶的分布及粗細(xì)程度來評價(jià)擴(kuò)增的效果。(2)擴(kuò)增不成功的可能原因有：①漏加了PCR的反應(yīng)成分；②各反應(yīng)成分的用量不當(dāng)；③PCR程序設(shè)置不當(dāng)?shù)取?.結(jié)果分析在PCR擴(kuò)增DNA的實(shí)驗(yàn)中，預(yù)計(jì)一分子DNA經(jīng)過30次循環(huán)后，應(yīng)該得到230個(gè)DNA分子，但是結(jié)果只有約210個(gè)DNA分子，那么不是出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因是(

)A．TaqDNA聚合酶的活力不夠，或活性受到抑制B．系統(tǒng)設(shè)計(jì)欠妥C．循環(huán)次數(shù)不夠D．復(fù)性時(shí)，部分親鏈與親鏈結(jié)合例3在PCR擴(kuò)增DNA的實(shí)驗(yàn)中，預(yù)【解析】如果TaqDNA聚合酶活力不夠，或活性受到抑制，則導(dǎo)致催化效率降低，得到的產(chǎn)物比預(yù)期的少。如果PCR系統(tǒng)設(shè)置不妥，達(dá)不到預(yù)期的結(jié)果。復(fù)性時(shí)，模板鏈既可以和引物結(jié)合，互補(bǔ)的模板鏈也可相互結(jié)合，從而導(dǎo)致產(chǎn)物減少?！敬鸢浮?/p>

C【解析】如果TaqDNA聚合酶活力不夠，或活性受到抑制，變式訓(xùn)練DNA在______nm的紫外線波段存在一強(qiáng)烈的吸收峰，其峰值的大小與DNA含量有關(guān)(

)A．220

B．240C．260D．280解析：選C。DNA在260nm的紫外線波段存在一強(qiáng)烈的吸收峰，其峰值的大小與DNA含量有關(guān)。據(jù)此，可以進(jìn)行DNA含量的測定。變式訓(xùn)練第2節(jié)DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)第2節(jié)DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.理解PCR擴(kuò)增DNA片段的原理。[重點(diǎn)]2.嘗試PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。

[難點(diǎn)]學(xué)習(xí)導(dǎo)航新知初探思維啟動(dòng)一、DNA在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制1.所需的酶：___________酶、DNA聚合酶和RNA聚合酶等。2.引物：___________。3.原料：__________________。4.原則：___________________。DNA解旋一段RNA四種脫氧核苷酸堿基互補(bǔ)配對原則新知初探思維啟動(dòng)一、DNA在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制DNA解旋一段RNA二、PCR及其過程1.概念：PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，實(shí)際上是在_____模擬細(xì)胞內(nèi)的_______________，形成大量__________的DNA片段。體外DNA復(fù)制過程特異性二、PCR及其過程體外DNA復(fù)制過程特異性2.過程條件過程加樣室溫把PCR緩沖液、_________、一對引物、四種脫氧核苷酸、DNA聚合酶、Mg2＋等成分加入到微量離心管中DNA模板2.過程條件過程加樣室溫把PCR緩沖液、_________、氫鍵一對引物DNA聚合脫氧核苷酸氫鍵一對引物DNA聚合脫氧核苷酸判一判(1)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制和PCR技術(shù)所需的引物一樣，都是RNA。(×)(2)經(jīng)PCR技術(shù)合成的DNA分子中，每條單鏈都含有引物。(×)(3)PCR實(shí)驗(yàn)的原理和操作都十分復(fù)雜，不易于操作。(×)(4)經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性和中溫延伸三步操作，DNA片段可呈指數(shù)增長。(√)判一判三、實(shí)驗(yàn)操作1.準(zhǔn)備(1)為了避免__________等因素的污染，PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_________。(2)如果沒有PCR儀，可以設(shè)置3個(gè)恒溫水浴鍋，溫度分別為______、______和______，然后按要求在3個(gè)水浴鍋中來回轉(zhuǎn)移PCR的微量離心管即可。外源DNA高壓滅菌95

℃55

℃72

℃三、實(shí)驗(yàn)操作外源DNA高壓滅菌95℃55℃72℃PCR熱循環(huán)260

nmPCR熱循環(huán)260nm想一想決定PCR反應(yīng)特異性的原因有哪些？【提示】

待擴(kuò)增DNA片段的特異性。想一想要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的比較細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)解旋在解旋酶作用下,細(xì)胞提供能量，部分解開加熱至90℃以上時(shí)，雙鏈全部解開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶引物一小段RNA單鏈DNA要點(diǎn)突破講練互動(dòng)要點(diǎn)一PCR技術(shù)與體內(nèi)DNA復(fù)制的比較細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)能量ATP不加循環(huán)次數(shù)生物自身控制30多次子鏈合成一條鏈連續(xù)合成,另一條鏈不連續(xù)合成兩條子鏈為連續(xù)合成,溫度為72℃產(chǎn)物完整DNADNA片段相同點(diǎn)①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸為原料③堿基互補(bǔ)配對原則④子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端細(xì)胞內(nèi)復(fù)制PCR反應(yīng)能量ATP不加循環(huán)次數(shù)生物自身控制30多特別提醒①PCR反應(yīng)需要可變的溫度，而體內(nèi)DNA復(fù)制需要穩(wěn)定的溫度。②DNA解旋酶的作用是使DNA兩條鏈的氫鍵斷開；DNA聚合酶的作用是將單個(gè)脫氧核苷酸加到已有的單鏈片段的3′端上，需要模板;DNA連接酶連接的是兩條DNA片段的缺口，不需要模板。特別提醒①PCR反應(yīng)需要可變的溫度，而體內(nèi)DNA復(fù)制需要穩(wěn)PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比，主要有兩點(diǎn)不同，它們是(

)①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA②PCR過程不需要DNA聚合酶③PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實(shí)現(xiàn)的④PCR過程中，DNA不需要解旋，直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制例1PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相A．③④

B．①②C．①③

D．②④【解析】

PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比較，主要有兩點(diǎn)不同：①PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNA，長度通常為15～40個(gè)核苷酸。②PCR過程中，DNA解旋不依賴解旋酶，而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實(shí)現(xiàn)的?！敬鸢浮?/p>

CA．③④B．①②變式訓(xùn)練(2012·成都七中高二檢測)下列關(guān)于DNA復(fù)制和PCR的描述中，正確的是(

)A．DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從5′端延伸DNA鏈B．DNA復(fù)制不需要引物C．引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行結(jié)合D．PCR擴(kuò)增的對象是氨基酸序列變式訓(xùn)練解析：選C。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈，故DNA復(fù)制需要引物，而且它與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對結(jié)合。PCR擴(kuò)增的對象是DNA，而不是氨基酸。解析：選C。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從32013中圖版選修1第六章第2節(jié)《DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)》課件2.PCR擴(kuò)增過程變性復(fù)性延伸預(yù)變性95℃，5min55℃，1min72℃，1min重復(fù)30次95℃，30s55℃，30s72℃，1min最后一次循環(huán)－－72℃，1min2.PCR擴(kuò)增過程變性復(fù)性延伸預(yù)變性95℃，5min55圖示：圖示：3.DNA擴(kuò)增數(shù)目的理論計(jì)算理論上DNA擴(kuò)增呈指數(shù)增長。若只有一條DNA模板，則復(fù)制n次后有2n條；若一開始有m條DNA模板，則復(fù)制n次后有m×2n條；實(shí)際操作過程中，由于無關(guān)變量的影響，一般來說實(shí)驗(yàn)值要略小于理論值。3.DNA擴(kuò)增數(shù)目的理論計(jì)算近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)實(shí)驗(yàn)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在短時(shí)間內(nèi),將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。例2近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱為__________；而在細(xì)胞中是在__________酶的作用下進(jìn)行的。(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加入__________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55°C時(shí)，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是________________________________________________________________________。(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個(gè)特定區(qū)段，應(yīng)該加(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個(gè)條件，即液體環(huán)境、適宜的__________和________，前者由__________自動(dòng)調(diào)控，后者則靠__________來維持。(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個(gè)用15N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以14N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有2013中圖版選修1第六章第2節(jié)《DNA片段的擴(kuò)增——PCR技術(shù)》課件【解析】

(1)PCR技術(shù)利用熱變性原理使DNA雙鏈之間的氫鍵斷裂，稱為變性，而在細(xì)胞內(nèi)是在解旋酶的作用下使氫鍵斷裂。(2)PCR分為三個(gè)基本反應(yīng)步驟:變性(95℃)、復(fù)性(55℃)、延伸(72℃)，其特異性依賴于與靶序列互補(bǔ)的引物，引物是兩段與待擴(kuò)增DNA序列互補(bǔ)的片段，兩引物之間的距離決定擴(kuò)增片段的長度?！窘馕觥?1)PCR技術(shù)利用熱變性原理使DNA雙鏈之間的氫由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3′端延伸DNA鏈，則DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸。(3)PCR技術(shù)與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制不完全相同，除了需要模板、原料、酶以外，至少還需要液體環(huán)境(穩(wěn)定的緩沖液)，每一個(gè)步驟需要適宜的溫度和酸堿度等。(4)一個(gè)DNA分子連續(xù)復(fù)制四次之后，形成16個(gè)DNA分子，15N標(biāo)記的DNA分子有2個(gè)，則15N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例為1/8。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3′端延【答案】

(1)氫變性解旋(2)兩3′從子鏈的5′端向3′端延伸(3)溫度酸堿度PCR儀緩沖液(4)1/8【答案】(1)氫變性解旋互動(dòng)探究(1)PCR中由堿基錯(cuò)