化藥制藥畢業(yè)論文

PAGEIII摘要委陵菜(Potentilla)種類眾多，用途也非常廣泛。以松嫩平原大慶地區(qū)六種具有普遍性和代表性的自然生長的委陵菜為實(shí)驗(yàn)材料，采用蒽酮比色法測定不同品種葉片在晚秋時節(jié)（9月-10月）可溶性糖含量變化，通過對各種因素以及可溶性糖含量變化的分析，初步比較六種委陵菜的抗寒性。結(jié)果表明：隨著溫度的逐漸降低，可溶性糖含量整體上升，以伏委陵菜增加幅度最小，從94.40μg/g到196.13μg/g，蔓委陵菜增加幅度最大，從82.91μg/g到306.88μg/g，光叉委陵菜變化最不敏感，委陵菜和蒿葉委陵菜變化浮動最強(qiáng)，鵝絨委陵菜居中。關(guān)鍵詞：委陵菜；可溶性糖

AbstractPotentilla(Potentilla)typelargeisalsoverywideapplication.SixuniversalandrepresentativeinthesongnenplaininDaqingareathenaturalgrowthofpotentillaasexperimentalmaterials,theuseofdifferentvarietiesofanthroneColorimetryleavesinlateautumnseason(September-October)changesofsolublesugarcontent,throughtheanalysisofvariousfactorsandchangesofsolublesugarcontentandcomparisonofcoldresistanceofsixspeciespotentilla.Resultsshowthatastemperaturesgraduallyreducing,solublesugarcontentsasawholerose,potentillavincreasedtheminimum,from94.40μg/gto196.13μg/g,potentillavinesincreasedthemost,from82.91μg/gto306.88μg/g,potentillaforkschangestheleastsensitive,changesinleavesofArtemisiapotentillaandpotentillastrongestfloating,potentillaanserinamoderatechanges.Keywords：Potentilla；solublesugar

目錄中文摘要 I英文摘要 II目錄 III1引言 12材料與方法 32.1實(shí)驗(yàn)材料 32.1.1供試材料 32.1.2儀器 32.1.3試劑 32.2實(shí)驗(yàn)方法 32.2.1實(shí)驗(yàn)原理 32.2.2實(shí)驗(yàn)步驟 33結(jié)果與分析 63.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果 63.1.1繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 63.1.2幾種委陵菜可溶性糖含量測定結(jié)果 73.1.3鵝絨委陵菜和光叉委陵菜可溶性糖含量變化 73.1.4蔓委陵菜和委陵菜可溶性糖含量變化 83.1.5伏委陵菜和蒿葉委陵菜可溶性糖含量變化 83.1.6幾種委陵菜可溶性糖含量變化 93.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論與分析 93.2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論 93.2.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 104結(jié)論 12參考文獻(xiàn) 13致謝 15PAGE15引言委陵菜是薔薇科(Rosaceae)委陵菜屬(Potentilla)植物，全球共有500余種，廣泛分布于北溫帶，化學(xué)成分主要有七種。我國委陵菜資源很豐富有86種，全國各省均有分布，以北方和西南地區(qū)居多，常生于河岸、路邊、山坡草地，海拔500-4100m[1]。本屬植物作為民間用藥已具有悠久歷史，具有較高的藥理作用，如鵝絨委陵菜、翻白委陵菜，其具有明顯的抵抗糖尿病抗菌抗病毒、保肝及鎮(zhèn)痛作用。委陵菜屬的一些植物還可用作畜牧業(yè)飼料，園林觀賞植物，鞣料和染料等的來源，具有較高的經(jīng)濟(jì)價值[2]。糖作為主要的能源物質(zhì)，在呼吸過程中形成的有機(jī)酸可以作為氨氣的受體轉(zhuǎn)化為氨基酸。生物體含有豐富的糖，糖類作為呼吸基質(zhì)，一方面為生物的生命活動提供能量，為植物的各種合成過程和各種生命活動提供了所需的能量，另一方面保護(hù)細(xì)胞維持其正常的形態(tài)和功能，同時糖類又是一類重要的信息分子[3]。可溶性糖不僅是高等植物的主要光合產(chǎn)物，而且是碳水化合物代謝和暫時貯藏的主要形式，與植物的生長發(fā)育、呼吸代謝、產(chǎn)量的形成和品質(zhì)等各個方面都有緊密聯(lián)系，是植物營養(yǎng)中最基本的物質(zhì)也是需要量最多的一類。當(dāng)溫度降低后，水解酶類活性通常都高于合成酶，酶促反應(yīng)平衡失調(diào)，物質(zhì)分解加速，淀粉的含量降低，可溶性糖含量增加[4]，植物細(xì)胞的滲透調(diào)節(jié)能力提高，提高細(xì)胞液的濃度，同時增加細(xì)胞自由水的含量，降低細(xì)胞原生質(zhì)的凝固點(diǎn)，使原生質(zhì)不致過渡脫水，保護(hù)原生質(zhì)膠體不致遇冷凝固，增強(qiáng)抗凍能力，維持細(xì)胞膜在低溫下的正常功能等方面有重要作用[5]。有實(shí)驗(yàn)證實(shí)，低溫下植物細(xì)胞內(nèi)會大幅度地積累可溶性糖類，尤其是蔗糖，可溶性糖含量越高，其相應(yīng)冰點(diǎn)越低，故抗凍力越強(qiáng)[6]。已有研究證實(shí)，除少數(shù)例外，可溶性糖的含量與植物抗寒性之間呈正相關(guān)[7]，關(guān)于可溶性糖與抗寒性的關(guān)系有很多的學(xué)者在多種植物上進(jìn)行了大量研究，他們分別對干椒品種、雪蓮花、高粱、甘藍(lán)、甜柿、蘆筍、茄子、葡萄、梨等植物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在溫度降低時POD活性明顯提高，脯氨酸含量升高，并且可溶性糖含量明顯增加[8-15]。黃治遠(yuǎn)在對3個引進(jìn)龍眼品種和1個單株葉片的可溶性糖含量進(jìn)行測定時提出，葉片可溶性糖含量與龍眼不同品種的耐寒性密切相關(guān)，葉片含糖量高的品種耐寒性較強(qiáng)，含糖量低的品種耐寒性弱，說明葉片可溶性糖含量能反映各品種間耐寒性差異，可作為耐寒性鑒定指標(biāo)[16]。也有的研究表明，抗寒性強(qiáng)的植物可溶性糖含量高且與抗寒力呈顯著正相關(guān)，而脯氨酸含量與抗寒力沒有明顯的相關(guān)性[17]。我國北方地區(qū)夏季干旱、年平均氣溫低，在低溫脅迫下草坪草常遭受低溫和干旱的雙重脅迫[18]，且大慶年平均氣溫4.2℃，草甸土占市區(qū)總土地面積52.3%，秋季多寒潮，降溫急劇。然而關(guān)于委陵菜體內(nèi)保護(hù)類物質(zhì)可溶性糖含量的變化未見報道。為此，對大慶地區(qū)多種委陵菜的可溶性糖含量進(jìn)行了測定，從而進(jìn)行對比，探討其對低溫的反應(yīng)，一方面豐富了委陵菜的基礎(chǔ)研究內(nèi)容，另一方面因?yàn)槲瓴吮旧砟蛪A力、生命力強(qiáng)，希望通過本實(shí)驗(yàn)探究能夠?yàn)橐院笪瓴嗽诳鼓嫘院统鞘幸约班l(xiāng)村綠化方面提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

材料與方法實(shí)驗(yàn)材料供試材料從松嫩平原中部大慶地區(qū)經(jīng)度125.09°緯度46.59°，采取秋季9月份到10月份的六種委陵菜，即鵝絨委陵菜、光叉委陵菜、委陵菜、蔓委陵菜、蒿葉委陵菜、伏委陵菜，每天采2個樣為一組3天將每一組循環(huán)實(shí)驗(yàn)一次。將葉片樣品采集后立即帶回實(shí)驗(yàn)室，取下葉片，先用流水沖洗，然后用蒸餾水清洗，用吸水紙吸干后準(zhǔn)確稱量。儀器烘箱；恒溫水浴鍋；離心機(jī)；751型分光光度計；分析天平；研缽；容量瓶；試管；試管架；燒杯；離心管；移液管；吸耳球；膠頭滴管；玻璃棒；比色杯；培養(yǎng)皿試劑葡萄糖；80%乙醇；濃硫酸；蒽酮；實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)采用硫酸蒽酮法[19]。測定自然生長狀態(tài)下委陵菜在九月份到十月份可溶性糖的含量。硫酸蒽酮法需將材料磨成勻漿，經(jīng)過濾或離心除去殘?jiān)?，以上清液為可溶性糖含有液進(jìn)行測定。糖與硫酸反應(yīng)后生成糠醛，糠醛與特異性顯色劑蒽酮迅速而完全地縮合成穩(wěn)定的有色物質(zhì)，其生成量與可溶性糖含量之間存在著定量關(guān)系[20]，在620nm波長下測定其OD值又與糖含量呈正比。每種委陵菜做三次重復(fù)，三天一個循環(huán)，這樣即可知道葉片中的可溶性糖含量變化。實(shí)驗(yàn)步驟蒽酮—硫酸溶液的配制精密稱取蒽酮0.1500g，溶于100mL98%濃硫酸中，當(dāng)日配制使用。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取葡萄糖0.1000g，用蒸餾水溶解并定容至1000mL，即為100μg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精確吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL注入試管中，分別加入1.0、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3mL蒸餾水，然后分別加入蒽酮試劑4.0mL。再在沸水浴中加熱10min，用冷水冷卻至室溫，在620nm下測定吸光值。以葡萄糖含量為縱坐標(biāo)，吸光度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程為：y=0.6693x+0.0044，R2=0.9936。表1標(biāo)準(zhǔn)曲線制作取樣表Table1Thestandardcurvesampletable序號12345678葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(ml）00.10.20.30.40.50.60.7水(ml)1.00.90.80.70.60.50.40.3硫酸蒽酮(ml)44444444獲得委陵菜樣品溶液、測定及計算稱取材料：將委陵菜的葉片用水洗凈，再用蒸餾水沖洗幾遍，然后用紗布或?yàn)V紙吸干，置于干燥的培養(yǎng)皿中，分別稱取三份，鑒于種類不同每份0.15-0.25g。研磨以及抽提：磨碎組織干樣后轉(zhuǎn)移至10ml的離心管中，加入10ml80%乙醇，攪拌均勻后于80-85℃加熱30min，冷卻后4000r/min下離心15min，將上清液移入50ml容量瓶中，重復(fù)抽提一次，棄掉殘?jiān)?，?0%乙醇定容提取液至50ml刻度處。委陵菜葉片可性糖含量的測定：取1mL糖提取液，沿試管壁緩慢的加入4mL蒽酮試劑置90℃沸水浴中保溫顯色15min，冷水浴后用分光光度儀于620nm波長下比色，以空白實(shí)驗(yàn)作參比讀出光密度，查用標(biāo)準(zhǔn)蔗糖溶液繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求出可溶性糖的含糖量。結(jié)果計算：可溶性糖含量以每克樣品中含有的可溶性糖微克數(shù)表示：可溶性糖含量（%）=100×（C×V/A）/(W×106)C：從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得可溶性糖μg值V：樣品提取液總體積（mL）A：顯色時取樣品液量（mL）W：樣品重（g）

結(jié)果與分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線據(jù)表2.1，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，根據(jù)得到的OD值，繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線如下：圖3-1可溶性糖含量標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure3-1Standardcurveofsolublesugarcontent幾種委陵菜可溶性糖含量測定結(jié)果表3-2六種委陵菜可溶性糖含量數(shù)據(jù)表Table3-2SixPotentillasolublesugarcontentinthedatatable種類可溶性糖含量（μg/g）鵝絨委陵菜142.83172.46178.37232.22191.95198.41196.75173.55308.32207.70211.64196.13234.20光叉委陵菜341.09330.34279.01343.54345.36434.21357.82蔓委陵菜75.0486.25171.84220.65246.25257.02306.88委陵菜177.94130.85173.24221.67233.57279.93272.83伏委陵菜105.93195.33136.98187.32158.55192.58153.26蒿葉委陵菜153.28225.02171.18217.76239.48230.74147.85鵝絨委陵菜和光叉委陵菜可溶性糖含量變化根據(jù)得到的鵝絨委陵菜、光叉委陵菜的可溶性糖含量繪制的趨勢圖如下：圖3-3鵝絨委陵菜、光叉委陵菜的可溶性糖含量隨時間變化折線圖Figure3-3Potentillaanserina,Potentillalightforksolublesugarcontentwithtimelinechart圖2中光叉委陵菜于9月13日第三次實(shí)驗(yàn)時可溶性糖含量最低為279.01μg/g，9月22日第五次實(shí)驗(yàn)時含量最高為434.21μg/g。鵝絨委陵菜于9月7日第一次實(shí)驗(yàn)時可溶性糖含量最低為142.83μg/g，9月16日第四次實(shí)驗(yàn)時含量最高為232.22μg/g。蔓委陵菜和委陵菜可溶性糖含量變化蔓委陵菜和委陵菜可溶性糖含量趨勢圖如下：圖3-4蔓委陵菜、委陵菜的可溶性糖含量隨時間變化折線圖Figure3-4ManPotentilla,Potentillasolublesugarcontentwithtimelinechart實(shí)驗(yàn)過程中，蔓委陵菜可溶性糖含量最低最高分別為，9月8日279.01μg/g，9月26日含量306.88μg/g。委陵菜可溶性糖含量最低最高分別為，9月11日130.85μg/g，9月23日279.93μg/g。伏委陵菜和蒿葉委陵菜可溶性糖含量變化伏委陵菜和蒿葉委陵菜可溶性糖含量趨勢圖如下圖3-5伏委陵菜、蒿葉委陵菜的可溶性糖含量隨時間變化折線圖Figure3-5VPotentilla,PotentillaArtemisialeafsolublesugarcontentwithtimelinechart由此可見，實(shí)驗(yàn)期間伏委陵菜和蒿葉委陵菜的可溶性糖含量的最小值和最高值分別為，伏委陵菜：9月9日105.93μg/g，9月30日196.13μg/g，蒿葉委陵菜9月9日153.28μg/g，9月21日239.48μg/g。幾種委陵菜可溶性糖含量變化在下面圖3-6中光叉委陵菜的可溶性含量明顯高于其他五種且變化趨勢平穩(wěn)，其他五種的可溶性糖變化趨勢相近，呈上升趨勢，其中最小值為蔓委陵菜：75.04μg/g，最大值為光叉委陵菜：434.21μg/g。幾種委陵菜可溶性糖含量趨勢圖如下：圖3-6六種委陵菜可溶性糖隨時間變化趨勢圖Figure3-6solublesugarsevenPotentillatrendsovertime實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論與分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論從圖3-3看出，在相同日期內(nèi)、相同溫度和相同波長下，對鵝絨委陵菜和光叉委陵菜進(jìn)行相同次數(shù)的可溶性糖含量測定，可以清楚地看出在實(shí)驗(yàn)期間、隨溫度的逐漸降低光叉委陵菜的可溶性糖含量有所降低，鵝絨委陵菜的可溶性糖含量有所增加。9月7日-9月16日，鵝絨委陵菜可溶性糖含量逐漸上升，9月16日-9月19日，含量有明顯的下降，9月19日-9月28日，可溶性糖含量緩慢的下降，但最后的可溶性糖含量比9月7日高。9月7日-9月13日，光叉委陵菜可溶性糖含量逐漸下降，至9月16日又上升，一直到9月22日達(dá)到相當(dāng)高的可溶性糖含量后緊隨的9月25和9月28日糖含量又明顯下降了，最后的可溶性糖含量比9月7日的低。從圖3-4看出，對這兩種委陵菜的可溶性糖含量測定后發(fā)現(xiàn)，從9月8日-9月29日委陵菜和蔓委陵菜的可溶性糖含量均顯著增加。9月8日-9月11日委陵菜可溶性糖含量下降，蔓委陵菜可溶性糖含量上升，9月11日-9月23日，兩種委陵菜的可溶性糖含量以相似的程度上升，9月23日-9月29日委陵菜可溶性糖含量逐漸下降，9月26日-9月29日蔓委陵菜可溶性糖含量急劇下降。從圖3-5看出，最后一次9月30日的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，即兩種委陵菜可溶性糖含量都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于第一次9月9日的可溶性糖含量。蒿葉委陵菜和伏委陵菜的整體可溶性糖含量隨溫度變化整體走向大致相同，但是在9月18日-9月24日，蒿葉委陵菜的可溶性糖含量是先上升后下降，而伏委陵菜的可溶性糖含量是先下降后上升。由圖3-6我們可以看出，在我們實(shí)驗(yàn)的時間段內(nèi)隨著時間和溫度的變化有五種委陵菜的可溶性糖含量是呈上升趨勢的的，僅有光叉委陵菜的變化趨勢很平緩。實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析 葉片是植物的源器官，承擔(dān)整株同化物的生產(chǎn)和供應(yīng)[21]，對作物的生長發(fā)育影響極大。葉片衰老的不同階段可溶性糖的調(diào)節(jié)作用是不同的，在葉片衰老的早期階段可溶性糖具有刺激衰老的作用，但在衰老后期又抑制一些和衰老相關(guān)基因的表達(dá)[22]。植物在越冬前積累可塑性物質(zhì)的基本形式是淀粉，這種積累通常在夏季即開始，儲存在根、干、枝的皮層和木質(zhì)部中，在低溫到來之前則轉(zhuǎn)化為糖類和脂肪以及纖維素和其它化合物，而增強(qiáng)抗逆性，這無疑與抗凍力有關(guān)[23-24]。在9月7日-9月30日實(shí)驗(yàn)進(jìn)行的過程中，幾乎沒有降雨天氣，因此溫度對委陵菜的可溶性糖含量有著直接的影響。有研究證明[25-26]，在逆境條件下植物積累的可溶性糖越多抗逆性就越強(qiáng)，由圖3-6可知，不同品種委陵菜葉片中的可溶性糖含量隨著溫度的降低大部分呈上升趨勢，這與前人的研究結(jié)果相吻合。委陵菜品種間抗寒性也有差異，光叉委陵菜受溫度影響時所測定糖含量變化幅度較其他品種小。由圖3-3我們看到，常溫下鵝絨委陵菜的可溶性糖含量明顯低于光叉委陵菜這可能與兩種委陵菜的生存環(huán)境的土壤水分、鹽堿程度以及種之間的結(jié)構(gòu)差異所造成的。在這八組實(shí)驗(yàn)中，光叉委陵菜對溫度的敏感性也稍稍強(qiáng)于鵝絨委陵菜，前者的最高點(diǎn)晚于后者，很有可能是前者對低溫的承受力強(qiáng)于后者，隨著溫度的逐漸降低，后期植株萎蔫死亡，也可能是所進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)時間不夠未能完全看到最終的變化情況。根據(jù)圖3-4，常溫下蔓委陵菜和委陵菜的可溶性糖含量差異不大，而且溫度對其影響程度也幾乎保持同步，都經(jīng)歷了從上升到下降再上升的過程，在一定程度上二者的抗寒性相差不多，這可能是由于二者都喜歡生長于干旱地區(qū)。在圖3-5中，伏委陵菜和蒿葉委陵菜的可溶性糖含量變化呈明顯的起伏狀，對溫度非常敏感，在9月27日-9月30日的可溶性糖含量顯著上升，由于秋眠類型較高仍在繼續(xù)生長，地上部分的光合作用低不能滿足地上部的正常生長，可溶性糖被動由地下轉(zhuǎn)至地上，這也充分符合了孫航等人所述這兩種委陵菜枯死晚的觀點(diǎn)[27]。

結(jié)論可溶性糖作為主要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，是冷害和凍害的主要保護(hù)物質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與劉磊等[28]得出了相似的結(jié)果。不同委陵菜品種的抗寒性有差異，抗寒性強(qiáng)的品種，可溶性糖含量高，抗寒性差的品種含量低，無論抗寒性強(qiáng)或弱的委陵菜可溶性糖含量均隨溫度下降而增加，即溫度高時可溶性糖含量低，溫度低時可溶性糖含量反而高，這與池春玉等[29]的研究結(jié)果是一致的。伏委陵菜和蒿葉委陵菜枯死較晚、可溶性糖含量變化幅度比較劇烈，抗寒性較弱。委陵菜、蔓委陵菜和鵝絨委陵菜能夠主動的適應(yīng)低溫環(huán)境，光叉委陵菜低溫時所測定指標(biāo)變化幅度較其他品種小且相對較平緩，一定程度上光叉委陵菜的抗寒性要強(qiáng)于其他幾種，適應(yīng)性較好，適合作為綠化植物。[參考文獻(xiàn)][1]中國植物志編委會中國植物志(第三十七卷)〔M〕.北京:科學(xué)出版社,1985,223-331.[2]任燕利,曲瑋,梁敬鈺.委陵菜屬植物研究進(jìn)展[J].海峽藥學(xué),2010(5):1-8.[3]王克夷,糖類研究的進(jìn)展和前景[J].生命的化學(xué)1994,14(5):4-8.[4]李合生,孟慶偉,夏凱,等.現(xiàn)代植物生理學(xué).北京:高等教育出版社,2000:391-435.[5]劉祖褀,張石城.植物抗性生理.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1994:8-29,35-45.[6]王淑杰,王家民,李來東等,可溶性全蛋白、可溶性糖含量與葡萄抗旱性關(guān)系的研究[J].北方園藝,1996,107:13-14.[7]王榮富.植物抗寒指標(biāo)的種類及其應(yīng)用.植物生理學(xué)通訊,1987,(3):49-55.[8]隋益虎,張子學(xué),陶宏志.不同溫度對幾個干椒品種(系)某些生理生化指標(biāo)的影響[J].植物生理學(xué)通訊,2004(12):693—695.[9]陳玉珍,李鳳蘭.低溫鍛煉對綿頭雪蓮花組織培養(yǎng)苗抗寒性及抗氧化酶活性的影響[J]植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報,2005,31(4):437—440.[10]馬純艷.鄒建秋,徐昕.等.低溫對高粱后代選系苗期生理生化的影響[J].沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報.2006.37(2):147-150.[11]吳能表,鐘永達(dá),肖文娟.零上低溫對甘藍(lán)幼苗逆境指標(biāo)的動態(tài)影響[J].西南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2005(6):525-528.[12]歐毅,謝永紅,王玉霞.溫度和PEG脅迫對甜柿葉片游離脯氮酸累積的影響[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報,2006,l9(3):470-472.[13]李志剛,張玉霞,孫志剛.蘆筍抗寒機(jī)理的研究[J].內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2005(12):634-637.[14]姚明華,徐躍進(jìn),邱正明.茄子品種耐冷性與脯氨酸和可溶性糖含量的關(guān)系[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2004.[15]陳因,方大惟.外源脯氨酸對受短期高溫脅迫的藍(lán)藻固氮活性的影響[J]南京農(nóng)業(yè)大學(xué)報社,1993,16(5):42-46.[16]黃治遠(yuǎn).李隆華,張?jiān)瀑F.龍跟葉片可溶性糖含量與耐寒性的關(guān)系[J].西南園藝,2004(4):l8-l9.[17]盧少云,郭振飛.草坪草逆境生理研究進(jìn)展[J].草地學(xué)報,2003(12):13-20.[18]張基德,李玉梅,陳艷秋.梨品種枝條可溶性糖、脯氨酸含量變化規(guī)律與抗寒性的關(guān)系[J].延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)報.2004(12):281-285.[19]李合生,孫群,趙世杰,等.植物生理生化實(shí)驗(yàn)原理和技術(shù).北京:高等教育出版社,2000:195-197.[