微生物檢測培訓-培養(yǎng)基課件

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-培養(yǎng)基和配制SummaryfromGlobalMicroTrai1學習目的Identifythedifferentcategoriesofmediausedinthelab/識別用于不同實驗的培養(yǎng)基Identifythespecificmediausedineachcategory/識別不同試驗中的各種培養(yǎng)基Explainhowtypicalmediaaremade/學習培養(yǎng)基的準備方法Explainhowtostoremedia/學習培養(yǎng)基的儲存學習目的Identifythedifferentcat2主要內(nèi)容介紹實驗室使用的培養(yǎng)基一般培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的儲存主要內(nèi)容介紹3微生物實驗的重要性充分理解哪些微生物會影響我們的產(chǎn)品只是我們保護我們產(chǎn)品和品牌的第一步;同時,我們必須通過對我們的原料,半成品和最終產(chǎn)品的微生物檢測來確保符合公司有關(guān)質(zhì)量和安全的要求.進行微生物實驗最重要的手段之一就是是微生物生長的營養(yǎng)培養(yǎng)基.我們會一一介紹可口可樂公司微生物實驗室使用的各種不同種類的培養(yǎng)基,它們的配制和儲存,它們?nèi)绾问褂靡宰R別不同的微生物等等第一章微生物實驗的重要性充分理解哪些微生物會影響我們的產(chǎn)品只是我們4培養(yǎng)基我們可能會肉眼看見或者直接聞到一些腐敗的現(xiàn)象,我們也可以在顯微鏡下識別一些微生物,然而,為了了解哪些微生物需要更復雜一些的實驗,我們還需要更大的樣本量.一般來說,我們通過營養(yǎng)培養(yǎng)基讓微生物在實驗室

生長.簡單來說,培養(yǎng)基就是一種物質(zhì),液態(tài)的或者固態(tài)的,包含一系列微生物生長的營養(yǎng)物質(zhì).由于微生物種類繁多,我們有很多不同種類的培養(yǎng)基,每一種都有不同的混合的營養(yǎng)物質(zhì)或者化學品.培養(yǎng)基讓微生物學家能夠判斷特定微生物種群是否存在或者數(shù)量多少.營養(yǎng)培養(yǎng)基分為三個主要類型:一般培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)基,差異培養(yǎng)基第二章培養(yǎng)基我們可能會肉眼看見或者直接聞到一些腐敗的現(xiàn)象,我們也5培養(yǎng)基的分類按照培養(yǎng)基的用途分:普通培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基差異培養(yǎng)基氮源:肉湯提取物,

植物提取物,使微生物能獲得足夠的營養(yǎng)生長碳源:葡萄糖,用以合成所需要的有機物質(zhì)緩沖液:中和細菌產(chǎn)生的酸除了氮源,

碳源和緩沖液外,還包含一些能夠抑制某些生長的化學物質(zhì).比如:1)Endo瓊脂中含有亞硫酸鈉可以抑制革蘭氏陽性細菌的生長;2)酸化的橙血清瓊脂可以減緩非嗜酸細菌的生長可以幫助超過一種目標微生物生長.

微生物在這樣的培養(yǎng)基上的形態(tài)或者顏色是不一樣的.在日常操作中,普通培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基用的比較多按照培養(yǎng)基的形態(tài)分:肉湯:

常用于增加微生物的數(shù)量以達到可檢測的水平瓊脂(固態(tài))碳水化合物,維生素,礦物質(zhì),酸化劑等各種旨在促進微生物生長的物質(zhì)加入了多聚糖(瓊脂).為不同需求而制備,

比如:1)商業(yè)無菌肉湯用于濃縮液廠來檢測主劑,這個配方抑制細菌而讓酵母菌正常生長;2)橙血清肉湯包含了橙的組分而使嗜酸的微生物能很好生長瓊脂是理想的固化劑:1)大多數(shù)微生物不能消化;2)可以和許多營養(yǎng)成分混合;3)也可以通過加入不同的原料滿足不同的測試需要第二章培養(yǎng)基的分類按照培養(yǎng)基的用途分:普通培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基差異培6普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基可以用于增菌和計數(shù)的檢測.增菌是定性的,用于判斷微生物的存在與否;而計數(shù)則是定量的,可以得到存在微生物的數(shù)量.M-TGEandPCA:最常用的普通培養(yǎng)基,可通過薄膜過濾,傾倒平板,或者擴散平板用于固態(tài)的瓊脂中以計數(shù).

pH值在7.0能使非嗜酸微生物很好的生長第三章普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基可以用于增菌和計數(shù)的檢測.增菌是定性的7TTC指示劑M-TGE和PCA都可以用于獲得瓶裝水中的異養(yǎng)菌和糖樣品中的總菌.需要的話,可以使用TTC指示劑,用來改變菌落顏色成紅色.

第三章TTC指示劑M-TGE和PCA都可以用于獲得瓶裝水中的異養(yǎng)菌8選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)特定的微生物,舉例來說,當需要得知酵母菌數(shù)量時候,可以選擇相應的培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基包含了營養(yǎng)成分和其他某種”允許”生長物質(zhì),可能包含一些抑制劑來防止可能影響實驗的微生物的生長.選擇性培養(yǎng)基可以用來識別酵母菌和霉菌,嗜酸細菌,和其他細菌,比如大腸菌群.第四章選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)特定的微生物,舉例來說,9霉菌和酵母菌M-Green:含有豐富的蛋白胨非常有利于微生物生長

pH4.6抑制了大部分細菌的生長溴甲酚綠(pH=3.8時呈黃色，pH=5.4時呈藍綠色，pH=4.5時開始有顏色的明顯變化)是指示劑,大部分菌落被里面的色素變成率綠色,酸性物質(zhì)擴散到培養(yǎng)基把它變成黃色.第四章霉菌和酵母菌M-Green:第四章10霉菌和酵母菌培養(yǎng)基酸化培養(yǎng)基RBCA橙血清瓊脂(OSA),土豆葡萄糖瓊脂(PDA),麥芽提取物瓊脂(MEA)孟加拉紅氯霉素選擇性培養(yǎng)基是最常用的檢測果汁里的總嗜酸菌的培養(yǎng)基.pH5.5的OSA和5.6的PDA&MEA比較高,不能有效抑制大部分細菌,所以使用酸化的方法來有效的分析嗜酸菌一般酒石酸用來酸化OSA和PDA,而對于MEA,乳酸和酒石酸都可以用最終的pH為4.2-4.4僅限于霉菌測試,一般用于空氣樣品.含有氯霉素以抑制細菌生長孟加拉紅抑制霉菌的大小和擴散,并且把菌落染成粉紅色第四章霉菌和酵母菌培養(yǎng)基酸化培養(yǎng)基RBCA橙血清瓊脂(OSA),11耐熱霉菌/耐熱細菌耐熱霉菌(HRM)耐熱細菌(TAB)一些霉菌孢子能夠抵抗巴氏滅菌過程而存活于飲料中.為了了解耐熱霉菌是否存在,我們需要取少量樣品到肉湯培養(yǎng)基并加熱滅活,通過一定的培養(yǎng)(時間溫度),觀察霉菌存在與否;需要計數(shù)的話,酸化的MEA,PDA,OSA都可以使用.有時候樣品中會存在耐熱細菌,一般稱為嗜熱嗜酸菌(TAB).根據(jù)樣品的不同,薄膜法或擴散平板法都可以用來測試TAB.合適的培養(yǎng)基是BAT和YSGBAT:主要用來檢測脂環(huán)酸芽胞桿菌.

通過支持脂環(huán)酸芽胞桿菌的生長,低pH值和高的培養(yǎng)溫度有效抑制了其他細菌的生長第四章耐熱霉菌/耐熱細菌耐熱霉菌(HRM)耐熱細菌(TAB12大腸菌群Endo,Tergitol-7,Chormocult,Colilert和Readycult都可以用來定性或定量地檢測大腸菌群.大腸菌群的存在表示了糟糕的衛(wèi)生情況,可能是由不充分的消毒或者沒有很好執(zhí)行GMP的要求.這些細菌有三個主要來源:水植物性物質(zhì)動物動物污染產(chǎn)生糞大腸,能出現(xiàn)在水體或者植物中如果數(shù)量較大,種類又特別,大腸菌群的存在可能會引起公共衛(wèi)生事件第四章大腸菌群Endo,Tergitol-7,Chormocu13大腸菌群的培養(yǎng)基-EndoEndo培養(yǎng)基使用乳糖作為碳源,硫酸品紅還區(qū)別不同的微生物,亞硫酸鈉和品紅來抑制其他微生物的生長.M-Endo則含有十二烷基硫酸鹽和脫氧膽鹽作為抑制劑.當使用Endo培養(yǎng)基時,菌落顯示帶有綠色金屬光澤的紅色.如果結(jié)果呈陽性,則需要進一步確定其存在和種類在一些情況下,在Endo培養(yǎng)基上會有假陽性或者假陰性出現(xiàn).比如:陰溝腸桿菌

(Enterobactercloacae)在培養(yǎng)基上不會出現(xiàn)特征的金屬光澤(假陰性);而食酸叢毛單胞菌(Comamonasacidovorans)會發(fā)出金屬光澤

(假陽性)第四章大腸菌群的培養(yǎng)基-EndoEndo培養(yǎng)基使用乳糖作為碳源14大腸菌群的培養(yǎng)基–Tergitol-7/Chromocult

Tergitol-7withTTCChromocult可用于定性或者定量實驗碳源:

乳糖pH指示劑:溴百里酚藍,pH6.0(黃)～7.6(藍)抑制劑:Tergitol-7,

能夠減緩革蘭氏陽性菌和陰性菌的生長菌落呈現(xiàn)黃色,桔色或者磚紅,并在薄膜底部有黃色環(huán).如果是陽性結(jié)果,需要進一步確定其存在和種類可用于定性或者定量實驗抑制劑:Tergitol-7,

能夠減緩革蘭氏陽性菌和陰性菌的生長差異試劑:半乳糖苷和葡糖苷酸大腸菌群存在時呈現(xiàn)紅色假如存在大腸埃希菌,則呈現(xiàn)深藍或者紫色如果是陽性結(jié)果,需要進一步確定其存在和種類第四章大腸菌群的培養(yǎng)基–Tergitol-7/Chromo15大腸菌群的培養(yǎng)基Colilert(R)Readycult定性試驗,用于水的測試可以用于同時檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌差異試劑:?-D-半乳糖苷酶(galactosidase)and?-D-葡萄糖醛酸苷酶(glucuronidase)抑制劑:ONGP(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside,鄰硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷)和MUG(nitrophenylβ-D-glucuronide,(4-硝基苯基)-β-D-葡糖苷酸)大腸菌群生長會把ONGP變成黃色,同時,大腸埃希氏菌會代謝MUG產(chǎn)生熒光.定性試驗,用于水的測試可以發(fā)光/熒光物質(zhì)用于同時檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌同樣的,差異試劑是?-D-半乳糖苷酶和?-D-葡萄糖醛酸苷酶抑制劑:X-GAL(5-Bromo-4-chloro-3-indolylβ-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolylβ-D-galactoside)和MUG總大腸菌群呈現(xiàn)藍綠色,而大腸埃希氏菌則呈現(xiàn)藍綠色并帶有熒光第四章大腸菌群的培養(yǎng)基Colilert(R)Readycult定16腸球菌腸球菌也是我們關(guān)心的一類微生物,常用來定性或者定量的培養(yǎng)基有:S&B(SlanetzandBartley),BEA(Bile-Esculin-Azide),和Enterolert(R)第四章S&BBEAEnterolert(R)抑制劑:

疊氮化鈉來抑制革蘭氏陰性菌的生長差異試劑:TTC(氯化三苯基四氮唑)培養(yǎng)過程中,腸球菌會還原TTC成甲瓚(一種紫藍色結(jié)晶物)如果是陽性結(jié)果,需要用BEA進一步確定抑制劑:

膽汁來抑制革蘭氏陽性菌的生長,疊氮化鈉來抑制革蘭氏陰性菌的生長差異試劑:七葉苷和檸檬酸鐵銨腸球菌能水解七葉苷為葡萄糖和七葉而七葉,能與三價鐵形成黃褐色或黑色的物質(zhì),從而在培養(yǎng)基上顯現(xiàn)含有?-葡萄糖苷酶,當腸球菌存在時,酶代謝成為4-甲基-傘形β-D-葡糖苷(4-methyl-umbelliferyl?-D-glucoside),并產(chǎn)生熒光對于原水,廠內(nèi)用水,瓶裝水中的腸球菌檢測非常有效腸球菌腸球菌也是我們關(guān)心的一類微生物,常用來定性或者定量的17乳酸桿菌MRSmediumRogosamedium全稱:de-Man,Rogosa,Sharpemedium抑制劑:乙酸鈉來抑制其他細菌的生長,但是有些乳桿菌目的細菌可能會生長碳源/氮源:酵母肉湯提取物含有更高的醋酸含量以及低的pH值來壓制其他乳酸菌的生長菌落呈現(xiàn)灰白色小點,平滑或者突起,或光滑,或粗糙.第四章乳酸桿菌MRSmediumRogosamedium全稱18其他培養(yǎng)基Cetrimidemedium(溴棕三甲銨)tryptosesulfiteagar綠膿桿菌(Pseudomonasaeruginosa)亞硫酸鹽還原梭狀芽孢桿菌(sulfite-reducingclostridia)抑制劑:西曲溴胺和酮酸菌株呈現(xiàn)藍綠色,

即綠膿菌素時,綠膿桿菌存在的可能性為90%;而當熒光存在時,

有98%的可能性一般用來檢測天然礦泉水差異試劑:亞硫酸鹽和檸檬酸鐵銨梭狀芽胞桿菌產(chǎn)生硫化氫與亞硫酸鹽和鐵鹽反應,產(chǎn)生黑色的菌落并把菌落邊緣染成黑色第四章其他培養(yǎng)基Cetrimidemedium(溴棕三甲銨)t19培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基可以是實驗室配制的也可以是市售的(放在培養(yǎng)皿中),后者使用方便但是價格比較高必須從有著良好聲譽的生產(chǎn)商采購并且根據(jù)供應商要求來儲存,使用和安全注意事項混合干粉培養(yǎng)基:使用去離子水或者蒸餾水配制并調(diào)節(jié)pH值,或者加入所需要的抑制劑.嚴格按照供應商的說明來配制培養(yǎng)基,混合,滅菌(時間溫度)等,并編好批號以方便使用嚴格按照供應商注明的規(guī)程使用,有些物質(zhì)有刺激性,需要防塵口罩和手套來防止吸入粉末以及皮膚接觸有效期:使用前,必須保證日期沒有超過瓶上注明的有效日期;一旦開瓶使用,建議6個月內(nèi)用完質(zhì)量管理:配置完成后,培養(yǎng)基批號,配制日期必須要記錄,并且應與樣品的分析相對應.另外,其他指標,比如pH,顏色,數(shù)量(體積)也應該被記錄在案第五章培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基可以是實驗室配制的也可以是市售的(放在培養(yǎng)20培養(yǎng)基的儲存培養(yǎng)基需要妥善保存以避免污染和失效,建議遵照供應商的說明.吸濕的和對于光和熱敏感的培養(yǎng)基需要保持涼爽并避免接觸水分和光線采購的培養(yǎng)基需要確認過期日期并記錄實驗室收貨日期,以杜絕過期培養(yǎng)基.按照批號順序使用并記錄開瓶日期舊瓶用完再開新瓶儲存于密閉容器,保持溫度在300C以下,液體培養(yǎng)基,通常需要冷藏儲存前,液體培養(yǎng)基需要冷卻并蓋緊瓶蓋,需要加入熱不穩(wěn)定的物質(zhì)時,培養(yǎng)基需要冷卻到430Cto470C加入培養(yǎng)基不能自由流動時,應拋棄不能使用固體培養(yǎng)基,配制完成應盡快使用額外多配的培養(yǎng)基應冷藏

(不能冷凍),使用前溶解.瓊脂培養(yǎng)基一般在密閉瓶中以避免水分流失,儲存于30Cto70C第六章培養(yǎng)基的儲存培養(yǎng)基需要妥善保存以避免污染和失效,建議遵照供21SummaryfromGlobalMicroTrainingMaterial

-培養(yǎng)基和配制SummaryfromGlobalMicroTrai22學習目的Identifythedifferentcategoriesofmediausedinthelab/識別用于不同實驗的培養(yǎng)基Identifythespecificmediausedineachcategory/識別不同試驗中的各種培養(yǎng)基Explainhowtypicalmediaaremade/學習培養(yǎng)基的準備方法Explainhowtostoremedia/學習培養(yǎng)基的儲存學習目的Identifythedifferentcat23主要內(nèi)容介紹實驗室使用的培養(yǎng)基一般培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的儲存主要內(nèi)容介紹24微生物實驗的重要性充分理解哪些微生物會影響我們的產(chǎn)品只是我們保護我們產(chǎn)品和品牌的第一步;同時,我們必須通過對我們的原料,半成品和最終產(chǎn)品的微生物檢測來確保符合公司有關(guān)質(zhì)量和安全的要求.進行微生物實驗最重要的手段之一就是是微生物生長的營養(yǎng)培養(yǎng)基.我們會一一介紹可口可樂公司微生物實驗室使用的各種不同種類的培養(yǎng)基,它們的配制和儲存,它們?nèi)绾问褂靡宰R別不同的微生物等等第一章微生物實驗的重要性充分理解哪些微生物會影響我們的產(chǎn)品只是我們25培養(yǎng)基我們可能會肉眼看見或者直接聞到一些腐敗的現(xiàn)象,我們也可以在顯微鏡下識別一些微生物,然而,為了了解哪些微生物需要更復雜一些的實驗,我們還需要更大的樣本量.一般來說,我們通過營養(yǎng)培養(yǎng)基讓微生物在實驗室

生長.簡單來說,培養(yǎng)基就是一種物質(zhì),液態(tài)的或者固態(tài)的,包含一系列微生物生長的營養(yǎng)物質(zhì).由于微生物種類繁多,我們有很多不同種類的培養(yǎng)基,每一種都有不同的混合的營養(yǎng)物質(zhì)或者化學品.培養(yǎng)基讓微生物學家能夠判斷特定微生物種群是否存在或者數(shù)量多少.營養(yǎng)培養(yǎng)基分為三個主要類型:一般培養(yǎng)基,選擇培養(yǎng)基,差異培養(yǎng)基第二章培養(yǎng)基我們可能會肉眼看見或者直接聞到一些腐敗的現(xiàn)象,我們也26培養(yǎng)基的分類按照培養(yǎng)基的用途分:普通培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基差異培養(yǎng)基氮源:肉湯提取物,

植物提取物,使微生物能獲得足夠的營養(yǎng)生長碳源:葡萄糖,用以合成所需要的有機物質(zhì)緩沖液:中和細菌產(chǎn)生的酸除了氮源,

碳源和緩沖液外,還包含一些能夠抑制某些生長的化學物質(zhì).比如:1)Endo瓊脂中含有亞硫酸鈉可以抑制革蘭氏陽性細菌的生長;2)酸化的橙血清瓊脂可以減緩非嗜酸細菌的生長可以幫助超過一種目標微生物生長.

微生物在這樣的培養(yǎng)基上的形態(tài)或者顏色是不一樣的.在日常操作中,普通培養(yǎng)基和選擇性培養(yǎng)基用的比較多按照培養(yǎng)基的形態(tài)分:肉湯:

常用于增加微生物的數(shù)量以達到可檢測的水平瓊脂(固態(tài))碳水化合物,維生素,礦物質(zhì),酸化劑等各種旨在促進微生物生長的物質(zhì)加入了多聚糖(瓊脂).為不同需求而制備,

比如:1)商業(yè)無菌肉湯用于濃縮液廠來檢測主劑,這個配方抑制細菌而讓酵母菌正常生長;2)橙血清肉湯包含了橙的組分而使嗜酸的微生物能很好生長瓊脂是理想的固化劑:1)大多數(shù)微生物不能消化;2)可以和許多營養(yǎng)成分混合;3)也可以通過加入不同的原料滿足不同的測試需要第二章培養(yǎng)基的分類按照培養(yǎng)基的用途分:普通培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基差異培27普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基可以用于增菌和計數(shù)的檢測.增菌是定性的,用于判斷微生物的存在與否;而計數(shù)則是定量的,可以得到存在微生物的數(shù)量.M-TGEandPCA:最常用的普通培養(yǎng)基,可通過薄膜過濾,傾倒平板,或者擴散平板用于固態(tài)的瓊脂中以計數(shù).

pH值在7.0能使非嗜酸微生物很好的生長第三章普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基可以用于增菌和計數(shù)的檢測.增菌是定性的28TTC指示劑M-TGE和PCA都可以用于獲得瓶裝水中的異養(yǎng)菌和糖樣品中的總菌.需要的話,可以使用TTC指示劑,用來改變菌落顏色成紅色.

第三章TTC指示劑M-TGE和PCA都可以用于獲得瓶裝水中的異養(yǎng)菌29選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)特定的微生物,舉例來說,當需要得知酵母菌數(shù)量時候,可以選擇相應的培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基包含了營養(yǎng)成分和其他某種”允許”生長物質(zhì),可能包含一些抑制劑來防止可能影響實驗的微生物的生長.選擇性培養(yǎng)基可以用來識別酵母菌和霉菌,嗜酸細菌,和其他細菌,比如大腸菌群.第四章選擇性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基能夠培養(yǎng)特定的微生物,舉例來說,30霉菌和酵母菌M-Green:含有豐富的蛋白胨非常有利于微生物生長

pH4.6抑制了大部分細菌的生長溴甲酚綠(pH=3.8時呈黃色，pH=5.4時呈藍綠色，pH=4.5時開始有顏色的明顯變化)是指示劑,大部分菌落被里面的色素變成率綠色,酸性物質(zhì)擴散到培養(yǎng)基把它變成黃色.第四章霉菌和酵母菌M-Green:第四章31霉菌和酵母菌培養(yǎng)基酸化培養(yǎng)基RBCA橙血清瓊脂(OSA),土豆葡萄糖瓊脂(PDA),麥芽提取物瓊脂(MEA)孟加拉紅氯霉素選擇性培養(yǎng)基是最常用的檢測果汁里的總嗜酸菌的培養(yǎng)基.pH5.5的OSA和5.6的PDA&MEA比較高,不能有效抑制大部分細菌,所以使用酸化的方法來有效的分析嗜酸菌一般酒石酸用來酸化OSA和PDA,而對于MEA,乳酸和酒石酸都可以用最終的pH為4.2-4.4僅限于霉菌測試,一般用于空氣樣品.含有氯霉素以抑制細菌生長孟加拉紅抑制霉菌的大小和擴散,并且把菌落染成粉紅色第四章霉菌和酵母菌培養(yǎng)基酸化培養(yǎng)基RBCA橙血清瓊脂(OSA),32耐熱霉菌/耐熱細菌耐熱霉菌(HRM)耐熱細菌(TAB)一些霉菌孢子能夠抵抗巴氏滅菌過程而存活于飲料中.為了了解耐熱霉菌是否存在,我們需要取少量樣品到肉湯培養(yǎng)基并加熱滅活,通過一定的培養(yǎng)(時間溫度),觀察霉菌存在與否;需要計數(shù)的話,酸化的MEA,PDA,OSA都可以使用.有時候樣品中會存在耐熱細菌,一般稱為嗜熱嗜酸菌(TAB).根據(jù)樣品的不同,薄膜法或擴散平板法都可以用來測試TAB.合適的培養(yǎng)基是BAT和YSGBAT:主要用來檢測脂環(huán)酸芽胞桿菌.

通過支持脂環(huán)酸芽胞桿菌的生長,低pH值和高的培養(yǎng)溫度有效抑制了其他細菌的生長第四章耐熱霉菌/耐熱細菌耐熱霉菌(HRM)耐熱細菌(TAB33大腸菌群Endo,Tergitol-7,Chormocult,Colilert和Readycult都可以用來定性或定量地檢測大腸菌群.大腸菌群的存在表示了糟糕的衛(wèi)生情況,可能是由不充分的消毒或者沒有很好執(zhí)行GMP的要求.這些細菌有三個主要來源:水植物性物質(zhì)動物動物污染產(chǎn)生糞大腸,能出現(xiàn)在水體或者植物中如果數(shù)量較大,種類又特別,大腸菌群的存在可能會引起公共衛(wèi)生事件第四章大腸菌群Endo,Tergitol-7,Chormocu34大腸菌群的培養(yǎng)基-EndoEndo培養(yǎng)基使用乳糖作為碳源,硫酸品紅還區(qū)別不同的微生物,亞硫酸鈉和品紅來抑制其他微生物的生長.M-Endo則含有十二烷基硫酸鹽和脫氧膽鹽作為抑制劑.當使用Endo培養(yǎng)基時,菌落顯示帶有綠色金屬光澤的紅色.如果結(jié)果呈陽性,則需要進一步確定其存在和種類在一些情況下,在Endo培養(yǎng)基上會有假陽性或者假陰性出現(xiàn).比如:陰溝腸桿菌

(Enterobactercloacae)在培養(yǎng)基上不會出現(xiàn)特征的金屬光澤(假陰性);而食酸叢毛單胞菌(Comamonasacidovorans)會發(fā)出金屬光澤

(假陽性)第四章大腸菌群的培養(yǎng)基-EndoEndo培養(yǎng)基使用乳糖作為碳源35大腸菌群的培養(yǎng)基–Tergitol-7/Chromocult

Tergitol-7withTTCChromocult可用于定性或者定量實驗碳源:

乳糖pH指示劑:溴百里酚藍,pH6.0(黃)～7.6(藍)抑制劑:Tergitol-7,

能夠減緩革蘭氏陽性菌和陰性菌的生長菌落呈現(xiàn)黃色,桔色或者磚紅,并在薄膜底部有黃色環(huán).如果是陽性結(jié)果,需要進一步確定其存在和種類可用于定性或者定量實驗抑制劑:Tergitol-7,

能夠減緩革蘭氏陽性菌和陰性菌的生長差異試劑:半乳糖苷和葡糖苷酸大腸菌群存在時呈現(xiàn)紅色假如存在大腸埃希菌,則呈現(xiàn)深藍或者紫色如果是陽性結(jié)果,需要進一步確定其存在和種類第四章大腸菌群的培養(yǎng)基–Tergitol-7/Chromo36大腸菌群的培養(yǎng)基Colilert(R)Readycult定性試驗,用于水的測試可以用于同時檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌差異試劑:?-D-半乳糖苷酶(galactosidase)and?-D-葡萄糖醛酸苷酶(glucuronidase)抑制劑:ONGP(o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside,鄰硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷)和MUG(nitrophenylβ-D-glucuronide,(4-硝基苯基)-β-D-葡糖苷酸)大腸菌群生長會把ONGP變成黃色,同時,大腸埃希氏菌會代謝MUG產(chǎn)生熒光.定性試驗,用于水的測試可以發(fā)光/熒光物質(zhì)用于同時檢測大腸菌群和大腸埃希氏菌同樣的,差異試劑是?-D-半乳糖苷酶和?-D-葡萄糖醛酸苷酶抑制劑:X-GAL(5-Bromo-4-chloro-3-indolylβ-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolylβ-D-galactoside)和MUG總大腸菌群呈現(xiàn)藍綠色,而大腸埃希氏菌則呈現(xiàn)藍綠色并帶有熒光第四章大腸菌群的培養(yǎng)基Colilert(R)Readycult定37腸球菌腸球菌也是我們關(guān)心的一類微生物,常用來定性或者定量的培養(yǎng)基有:S&B(SlanetzandBartley),BEA(Bile-Esculin-Azide),和Enterolert(R)第四章S&BBEAEnterolert(R)抑制劑:

疊氮化鈉來抑制革蘭氏陰性菌的生長差異試劑:TTC(氯化三苯基四氮唑)培養(yǎng)過程中,腸球菌會還原TTC成甲瓚(一種紫藍色結(jié)晶物)如果是陽性結(jié)果,需要用BEA進一步確定抑制劑:

膽汁來抑制革蘭氏陽性菌的生長,疊氮化鈉來抑制革蘭氏陰性菌的生長差異試劑:七葉苷和檸檬酸鐵銨腸球菌能水解七葉苷為葡萄糖和七葉而七葉,能與三價鐵形成黃褐色或黑色的物質(zhì),從而在培養(yǎng)基上顯現(xiàn)含有?-葡萄糖苷酶,當腸球菌存在時,酶代謝成為4-甲基-傘形β-D-葡糖苷(4-methyl-umbelliferyl?-D-glucoside),并產(chǎn)生熒光對于原水,廠內(nèi)用水,瓶裝水中的腸球菌檢測非常有效腸球菌腸球菌也是我們關(guān)心的一類微生物,常用來定性或者定量的38乳酸桿菌MRSmediumRogosamedium全稱:de-Man,Rogosa,Sharpemedium抑制劑:乙酸鈉來抑制其他細菌的生長,