苦參栓的制備與體外釋放研究

1、苦參栓的制備與體外釋放研究【摘要】目的將苦參制成中藥栓劑，研究其體外釋放特性。方法選用半合成脂肪酸脂為基質(zhì)，用熱熔法制備栓劑；建立分光光度法測(cè)定苦參栓中苦參堿釋放度，利用溴甲酚綠結(jié)合生物堿后在416n處有最大吸收，測(cè)定吸光度A，將A與苦參總堿的濃度建立線(xiàn)性關(guān)系。結(jié)果所制栓劑符合藥典栓劑有關(guān)規(guī)定，苦參栓劑體外30in完全釋放,分光光度法線(xiàn)性范圍10100g/L，r=09998，平均加樣回收率99.49，日內(nèi)精細(xì)度和日間精細(xì)度分別為1.85和2.62。結(jié)論該制劑處方合理，制備工藝簡(jiǎn)單，質(zhì)量易于控制，體外釋放情況良好,預(yù)示有較好的臨床療效?！娟P(guān)鍵詞】苦參；栓劑；釋放度霉菌、滴蟲(chóng)感染是造成婦女帶下、陰

2、癢的重要原因，是婦科臨床常見(jiàn)并多發(fā)玻苦參為豆科leguinsae植物苦參SphraflavesensAit.的枯燥根。其主要有效成分為以苦參堿(atrine)為主的多種生物堿，是臨床常用中藥，其性寒、味苦，具有清熱燥濕、殺蟲(chóng)止癢的作用，臨床可用于治療濕熱所致的白帶、皮膚瘙癢、疥癬等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，其對(duì)治療宮頸腐敗、陰道炎和陰道滴蟲(chóng)具有良好的療效。為此，筆者將苦參制成陰道栓劑，采用酸堿滴定法測(cè)定苦參總堿含量，并重點(diǎn)考察體外釋放情況，以預(yù)測(cè)在體內(nèi)的作用情況?，F(xiàn)報(bào)道如下。1儀器與試藥1.1儀器鴨嘴形栓劑模(浙江諸暨制藥設(shè)備廠(chǎng))，756紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上海光譜儀器，電子分析天平AG135型。1.2試藥

3、苦參，經(jīng)鑒定為豆科植物苦參SphraflavesensAit的枯燥根；羊毛脂天津市永大化學(xué)試劑中心批號(hào)20221106；溴甲酚綠上海試劑三廠(chǎng)批號(hào)750221；鄰苯二甲酸氫鉀天津市天新精細(xì)化工開(kāi)發(fā)中心批號(hào)20220915；苦參堿對(duì)照品110805-202207,中國(guó)藥品生物制品檢定所；氧化苦參堿對(duì)照品110780-202205,中國(guó)藥品生物制品檢定所；所用試劑均為分析純。2方法2.1處方組成1苦參總堿200g，羊毛脂64g，半合成脂肪酸脂1283g，共制成栓劑1000粒。2.2有效成分的提取及栓劑的制備2.2.1苦參總生物堿的提取工藝2其流程如下所示：2.2.2栓劑的制備先將苦參總堿與羊毛脂混合

4、，研勻，邊研磨邊參加在45水浴鍋上融化的半合成脂肪酸脂中，攪拌，待溫度恒定45時(shí)迅速傾入涂有光滑劑的栓模中,冷卻后除去溢出局部，起模即得。2.3含量測(cè)定2.3.1測(cè)定方法取本品5粒，置分液漏斗中，加氯仿30l振搖，使溶解，用鹽酸液0.2l/l25，20，10，10，10l分次提取，酸液合并于100l容量瓶中，加水至刻度，搖勻，精細(xì)汲取20l置另一分液漏斗中，加氯化鈉約6g使飽和，再參加用氯化鈉飽和的氫氧化鈉液0.1l/l5l，用氯仿25，20，10，10，10l分別提取，氯仿液依次用同一飽和氯化鈉液5l振搖，洗滌，再依次通過(guò)裝有無(wú)水硫酸鈉的漏斗，濾入另一分液漏斗中，漏斗以5l氯仿分3次洗滌，合

5、并氯仿液，再精細(xì)參加硫酸液0.05l/l10l及水20l振搖30in，分取酸液于三角燒瓶?jī)?nèi)，氯仿層再用水洗滌3次，每次10l水液與上次酸液合并，置水浴上加熱至無(wú)氯仿臭，放冷，參加甲基紅指示液兩滴，用氫氧化鈉液0.1l/L滴定，即得。每毫升的硫酸液0.05l/l相當(dāng)于26.44g的氧化苦參堿15H24N22。以空白栓同法測(cè)定校正結(jié)果，計(jì)算栓劑苦參總堿含量。本品每粒含苦參總堿以氧化苦參堿15H24N22計(jì)應(yīng)在80100g。2.3.2吸收波長(zhǎng)的選擇溴甲酚綠比色法測(cè)定苦參總堿含量，在416n處有最大吸收，應(yīng)選416n為測(cè)定波長(zhǎng)見(jiàn)圖1。2.3.3緩沖液pH的選擇用500l燒杯盛100l蒸餾水置恒溫水浴中

6、調(diào)節(jié)至(371)參加1粒栓劑，開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí)并以100r/in的速度攪拌，10in取樣6l，分別置6個(gè)分液漏斗中，每個(gè)1l，參加pH2.0，pH3.0，pH4.0，pH5.0，pH6.0，pH7.0緩沖液各8l，溴甲酚綠BG1l，振搖后參加氯仿液10l，上下振蕩一定時(shí)間，靜置，待兩相徹底別離后，取氯仿層，于416n處測(cè)定吸光度，以空白栓的氯仿萃取液為空白。結(jié)果緩沖液pH3.0時(shí)吸光度最大見(jiàn)表1。表1緩沖液pH對(duì)吸光度的影響略轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3.4標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)精細(xì)稱(chēng)取AT氧化苦參堿對(duì)照品10g，置10l容量瓶中，用蒸餾水定容。再精細(xì)量取0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0置6個(gè)1l容量

7、瓶中，配成100，200，400，600，800，1000g/l的溶液后,處理如下:溶液1l，參加pH3.0緩沖液8l，溴甲酚綠BG1l,振搖后參加氯仿液10l,上下振蕩一定時(shí)間，靜置，待兩相徹底別離后，取氯仿層，于416n處測(cè)定吸光度，取1l蒸餾水按上述方法處理作為空白。于416n處測(cè)定吸收度A，將濃度(g/L)對(duì)A值作線(xiàn)性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)方程：A=0.0061+0.0367，r=0.9998，線(xiàn)性范圍10100g/L。2.3.5精細(xì)度及重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)配制800g/lAT的對(duì)照品溶液，按“2.3.4操作處理,分別在1d內(nèi)測(cè)定3次及每天測(cè)定1次，共測(cè)3d。日內(nèi)值分別是0.521，0.509，0.5

8、28，平均值為0.5190.0096，RSD為1.85，日間值分別是0.521，0.542，0.516，平均值為0.5260.0138，RSD為2.62。2.3.6加樣回收率測(cè)定精細(xì)稱(chēng)取一定量苦參總堿，配制成濃度為0.312g/L的樣品溶液。取樣品溶液1l，置3個(gè)5l容量瓶中，分別加人1g/L氧化苦參堿對(duì)照品溶液120，150，180l，用蒸餾水定容，充分混勻，按上述方法測(cè)定，每個(gè)樣測(cè)定兩次。平均回收率99.49，RSD值269。2.3.7百分之百釋放度的測(cè)定用500l燒杯盛100l蒸餾水置恒溫水浴中調(diào)節(jié)至(371),參加1粒栓劑，開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí)并以100r/in的速度攪拌，放置24h并不斷攪拌，取

9、1l，參加pH3.0緩沖液8l，溴甲酚綠BG1l，振搖后參加氯仿液10l，上下振蕩一定時(shí)間，靜置。待兩相徹底別離后，取氯仿層，于416n處測(cè)定吸光度，以空白栓的氯仿萃取液為空白。重復(fù)5次，平均值為0.6220.0016，RSD為0.26。2.4釋放度測(cè)定2.4.1試驗(yàn)方法3用500l燒杯盛100l蒸餾水置恒溫水浴中調(diào)節(jié)至(371),參加1粒栓劑，開(kāi)場(chǎng)計(jì)時(shí)并以100r/in的速度攪拌，間隔5in取樣一次，每次5l，取樣后立即補(bǔ)充5l蒸餾水。每次取樣的處理方法如下：樣品1l，pH3.0緩沖液8l，溴甲酚綠BG1l,振搖后參加氯仿液10l,上下振蕩一定時(shí)間，靜置。待兩相徹底別離后，取氯仿層，于416

10、n處測(cè)定吸光度，以空白栓的氯仿萃取液為空白。2.4.2結(jié)果本品在30in釋放100%，數(shù)據(jù)如表2，釋放曲線(xiàn)如圖2。表2釋放度測(cè)定測(cè)定結(jié)果略2.4.3關(guān)于釋放機(jī)制根據(jù)Ritger-Peppas模型，采用t/=ktnt/為藥物在某一時(shí)間的累積釋放分?jǐn)?shù)%,t為釋放時(shí)間，k為常數(shù)，n為Ritger-Peppas方程中表示釋放機(jī)制的特征參數(shù)，以L(fǎng)gt/對(duì)Lgt作圖，得斜率n值為0.838，如圖3所示，在0.450.89之間，說(shuō)明苦參栓的釋放是通過(guò)非Fik擴(kuò)散機(jī)制，為混合機(jī)制，也就是Fik擴(kuò)散和凝膠骨架溶蝕兩種機(jī)制協(xié)同作用的結(jié)果，并且以溶蝕性機(jī)制為主。3討論苦參及其制劑以苦參堿為指標(biāo)的含量測(cè)定方法有酸堿滴

11、定法、薄層掃描法、高效液相色譜法HPL法、高效毛細(xì)管電泳法(HPE)等，以苦參總堿為指標(biāo)的含量測(cè)定方法有酸堿滴定法、酸性染料比色法、溴甲酚綠比色法4。本文采用酸堿滴定法測(cè)量苦參總堿的含量，方法簡(jiǎn)便，可操作性強(qiáng)?？鄥⒅猩飰A大都屬于喹喏里西啶類(lèi)生物堿，均含有仲胺或叔胺基團(tuán)或者兼而有之，它們與BG在一定的pH值條件下結(jié)合產(chǎn)生較強(qiáng)的可見(jiàn)吸收，因此體外釋放度考察選用溴甲酚綠比色法測(cè)定苦參總堿含量5。根據(jù)參考文獻(xiàn)3，適宜的pH值是主要影響因素，其他條件對(duì)測(cè)定結(jié)果影響較小，且氯仿萃取液的吸收值相當(dāng)穩(wěn)定。因此，緩沖液及顯色劑用量和顯色時(shí)間不再作為考察對(duì)象?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1高華.最新國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)施行手冊(cè)S.北京:社會(huì)科學(xué)文獻(xiàn)出版社，2022，1156S3-B-