分子生物學(xué)知識(shí)點(diǎn)整理(共7頁(yè))

1、名詞解釋?zhuān)?. 基因(jyn)：基因是位于染色體上的遺傳基本單位，是負(fù)載特定遺傳信息的DNA片段，編碼具有生物功能(gngnng)的產(chǎn)物包括RNA和多肽鏈。2. 基因(jyn)表達(dá)：即基因負(fù)載遺傳信息轉(zhuǎn)變生成具有生物學(xué)功能產(chǎn)物的過(guò)程，包括基因的激活、轉(zhuǎn)錄、翻譯以及相關(guān)的加工修飾等多個(gè)步驟或過(guò)程。3. 管家基因：在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有組織細(xì)胞中和所有時(shí)間段都持續(xù)表達(dá)的基因，其表達(dá)水平變化很小且較少受環(huán)境變化的影響。如GAPDH、-肌動(dòng)蛋白基因。4. 啟動(dòng)子：是指位于基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游、能夠與RNA聚合酶和其他轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合并進(jìn)而調(diào)節(jié)其下游目的基因轉(zhuǎn)錄起始和轉(zhuǎn)錄效率的一段DNA片段。5. 操縱子

2、：是原核生物基因表達(dá)的協(xié)調(diào)控制單位，包括有結(jié)構(gòu)基因、啟動(dòng)序列、操縱序列等。如：乳糖操縱子、色氨酸操縱子等。6. 反式作用因子：指由其他基因表達(dá)產(chǎn)生的、能與順式作用元件直接或間接作用而參與調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄的蛋白因子（轉(zhuǎn)錄因子）。7.順式作用元件：即位于基因附近或內(nèi)部的能夠調(diào)節(jié)基因自身表達(dá)的特定DNA序列。是轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn)，通過(guò)與轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合而實(shí)現(xiàn)對(duì)真核基因轉(zhuǎn)錄的精確調(diào)控。8. Ct值：即循環(huán)閾值（cycle threshold，Ct），是指在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。（它與PCR擴(kuò)增的起始模板量存在線性對(duì)數(shù)關(guān)系，由此可以對(duì)擴(kuò)增樣品中的目的基因的模板

3、量進(jìn)行準(zhǔn)確的絕對(duì)和（或）相對(duì)定量。）9. 核酸分子雜交：是指核酸分子在變性后再?gòu)?fù)性的過(guò)程中，來(lái)源不同但互不配對(duì)的核酸單鏈（包括DNA和DNA，DNA和RNA，RNA和RNA）相互結(jié)合形成雜合雙鏈的特性或現(xiàn)象，依據(jù)此特性建立的一種對(duì)目的核酸分子進(jìn)行定性和定量分析的技術(shù)則稱(chēng)為分子雜交技術(shù)。10. 印跡或轉(zhuǎn)?。菏侵笇⒑怂峄虻鞍踪|(zhì)等生物大分子通過(guò)一定的方法轉(zhuǎn)移并固定至尼龍膜等支持載體上的一種方法，該技術(shù)類(lèi)似于用吸墨紙吸收紙張上的墨跡。11. 探針：是一種用同位素或非同位素標(biāo)記核酸單鏈，通常是人工合成的寡核苷酸片段。12. 基因芯片：又稱(chēng)DNA芯片或DNA微陣列，是基于核酸分子雜交原理建立的一種對(duì)DNA

4、進(jìn)行高通量、大規(guī)模、并進(jìn)行分析的技術(shù)，其基本原理是將大量寡核苷酸分子固定于支持物上，然后與標(biāo)記的待測(cè)樣品進(jìn)行雜交，通過(guò)檢測(cè)雜交信號(hào)的強(qiáng)弱進(jìn)而對(duì)待測(cè)樣品中的核酸進(jìn)行定性和定量分析。13. 基因文庫(kù)：是指通過(guò)克隆方法保存在適當(dāng)宿主中的一群混合的DNA分子，所有這些分子中的插入片段的總和，可代表某種生物的全部基因組序列或全部的mRNA序列，因此基因文庫(kù)實(shí)際上是包含某一生物體或生物組織樣本的全部DNA序列的克隆群體?；蛭膸?kù)包括(boku)兩類(lèi)：基因組文庫(kù)和cDNA文庫(kù)。14. 克?。菏莵?lái)自同一始祖的相同副本或拷貝(kobi)的集合。15. 載體：為攜帶的目的(md)基因，實(shí)現(xiàn)其無(wú)性繁殖或表達(dá)有意義的

5、蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子。16. 限制性核酸內(nèi)切酶：識(shí)別DNA的特意序列，并在識(shí)別位點(diǎn)或其周?chē)懈铍p鏈DNA的一類(lèi)內(nèi)切酶。17. 基因工程（Genetic Engineering）：又稱(chēng)基因操作（gene manipulation）、DNA重組（DNA recombination），是指采用類(lèi)似于工程建設(shè)的方式，按照預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，將一種或多種生物體（供體）的基因育載體在體外進(jìn)行拼接重組構(gòu)建成雜種DNA分子，然后轉(zhuǎn)入另一種生物體（受體）內(nèi)，以改變生物原有的遺傳特性并表達(dá)出新的性狀。獲得新品種，生產(chǎn)新產(chǎn)品，或是研究基因的結(jié)構(gòu)和功能。因此，供體、受體和載體稱(chēng)為基因工程的三大要素，其中相對(duì)于受體

6、而言，來(lái)自供體的基因?qū)儆谕庠椿?。由于DNA重組分子大都需在受體細(xì)胞中復(fù)制擴(kuò)增，故還可以將基因工程表征為分子克?。∕olecular Cloning）或基因的無(wú)性繁殖。18. 目的基因：感興趣的基因或DNA序列。19. 生長(zhǎng)因子：（growth factor）通過(guò)質(zhì)膜上特異的受體，將信息傳遞至細(xì)胞內(nèi)部，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖的多肽類(lèi)物質(zhì)。20. 基因組：泛指一個(gè)生命體、病毒或細(xì)胞器的全部遺傳物質(zhì)。21. 蛋白質(zhì)組：指一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的全套蛋白質(zhì)，反映了特殊階段、環(huán)境狀態(tài)下，細(xì)胞或組織在翻譯水平的蛋白質(zhì)表達(dá)譜。22. 人類(lèi)基因組計(jì)劃：是美國(guó)科學(xué)家于1986年率先提出，1990年正式啟動(dòng)的，這一計(jì)劃的目標(biāo)是

7、為30億個(gè)堿基對(duì)構(gòu)成的人類(lèi)基因組精確測(cè)序，從而最終弄清楚每種基因產(chǎn)生的蛋白質(zhì)及其作用，它的實(shí)施將會(huì)為認(rèn)識(shí)疾病的分子機(jī)制以及診斷和治療提供重要依據(jù)。23. 基因診斷：利用現(xiàn)代分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的技術(shù)方法直接檢測(cè)基因結(jié)構(gòu)及其表達(dá)水平是否正常，從而對(duì)人體狀態(tài)和疾病做出診斷的方法。24. 基因治療：從廣義來(lái)說(shuō)，將某種遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到患者細(xì)胞內(nèi)，使其在體內(nèi)發(fā)揮作用而達(dá)到治療疾病目的的方法均稱(chēng)為基因治療。25. 基因替換：用正常的基因通過(guò)體內(nèi)基因同源重組，原位替換病變(bngbin)細(xì)胞內(nèi)的致病基因，使細(xì)胞內(nèi)DNA完全恢復(fù)正常狀態(tài)的基因治療方法。26. 自殺基因(jyn)：某些病毒或細(xì)菌的基因所表達(dá)的酶

8、能將對(duì)人體無(wú)毒或低毒的藥物在人體細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞毒性產(chǎn)物，從而導(dǎo)致攜帶該基因的受體細(xì)胞也被殺死，故稱(chēng)這類(lèi)基因?yàn)椤白詺?zsh)基因”。27. 轉(zhuǎn)錄組：是一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的一套R(shí)NA轉(zhuǎn)錄物，包含了某一環(huán)境條件下、某一生命階段、某一生理或病理狀態(tài)下，生命體的細(xì)胞或組織所表達(dá)的基因種類(lèi)及水平。28. 癌基因：（oncogene）細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的基因，它的結(jié)構(gòu)異?；虮磉_(dá)異常，可以引起細(xì)胞癌變。29. 病毒癌基因：存在于腫瘤細(xì)胞中，能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。30. 抑癌基因：也稱(chēng)為抗癌基因。抑癌基因的產(chǎn)物是抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化，和抑制細(xì)胞遷移，因此起負(fù)調(diào)控作用，抑癌基因的突變是隱性的（也稱(chēng)

9、抗癌基因。抑癌基因的產(chǎn)物是抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化，和抑制細(xì)胞遷移，因此起負(fù)調(diào)控作用，抑癌基因的突變是隱性的。）31. 結(jié)構(gòu)基因組學(xué)：是以全基因組測(cè)序?yàn)槟繕?biāo)的基因結(jié)構(gòu)研究，弄清楚基因組中全部基因的位置和結(jié)構(gòu)，為基因功能的研究奠定基礎(chǔ)。其主要內(nèi)容就是制作高分辨率的人類(lèi)基因組的遺傳圖和物理圖，最終完成人類(lèi)其他重要模式生物全部基因組DNA序列測(cè)定。問(wèn)答題以乳糖操縱子為模型解釋原核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控模式 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)操縱子調(diào)控模式 （1）操縱子的概念：操縱子是原核生物基因表達(dá)的協(xié)調(diào)控制單位，包括有結(jié)構(gòu)基因、啟動(dòng)序列、操縱序列等。如：乳糖操縱子、色氨酸操縱子等。 （2）乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)：乳糖操縱子包

10、括調(diào)節(jié)基因I、一個(gè)操縱序列O、一個(gè)啟動(dòng)序列P以及單個(gè)結(jié)構(gòu)基因Z、Y、A。其中調(diào)節(jié)基因I編碼生成阻遏蛋白，后者與操縱序列結(jié)合；RNA聚合酶與啟動(dòng)序列結(jié)合；分解代謝物基因激活蛋白（CAP）也結(jié)合在操縱序列附近；結(jié)構(gòu)基因Z、Y和A分別編碼三個(gè)與乳糖代謝有關(guān)的酶，即：-半乳糖苷酶，透酶和乙酰轉(zhuǎn)移酶。這三個(gè)酶的基因作為一個(gè)整體由同一個(gè)調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié)，以實(shí)現(xiàn)基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。 （3）其調(diào)節(jié)機(jī)制主要有正性和負(fù)性?xún)煞N模式。阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)：當(dāng)沒(méi)有乳糖時(shí)，調(diào)節(jié)基因表達(dá)生成阻遏蛋白，阻遏蛋白結(jié)合操縱子序列出，阻礙RNA結(jié)合酶與啟動(dòng)序列結(jié)合，抑制結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)，此時(shí)操縱子處于阻遏狀態(tài)；當(dāng)有半乳糖存在時(shí)，乳糖首先被轉(zhuǎn)

11、變成半乳糖，半乳糖則作為一種誘導(dǎo)劑與阻遏蛋白結(jié)合，誘發(fā)蛋白質(zhì)構(gòu)象改變，使阻遏蛋白從啟動(dòng)序列上解離下來(lái)，從而啟動(dòng)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，此時(shí)操縱子處于誘導(dǎo)狀態(tài)。CAP的正性調(diào)節(jié)：當(dāng)沒(méi)有葡萄糖時(shí)，cAMP濃度升高，與CAP結(jié)合(jih)，CAP進(jìn)而結(jié)合在啟動(dòng)序列附近，從而進(jìn)一步促進(jìn)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。當(dāng)有葡萄糖時(shí)，cAMP濃度降低，結(jié)合在啟動(dòng)序列附近的CAP減少，結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄速率降低。協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)：實(shí)際(shj)情況下，上述兩種調(diào)節(jié)方式是相輔相成、相互協(xié)調(diào)的。譬如：在無(wú)乳糖且有葡萄糖時(shí)，阻遏蛋白負(fù)性調(diào)節(jié)起作用，此時(shí)結(jié)構(gòu)基因不被轉(zhuǎn)錄；在有乳糖且有葡萄糖時(shí)，阻遏蛋白負(fù)性調(diào)節(jié)不起作用，此時(shí)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄水平低；在有乳糖且

12、無(wú)葡萄糖時(shí)，阻遏蛋白的抑制作用不解除，CAP正性調(diào)節(jié)被激活，此時(shí)結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄水平最高。生長(zhǎng)因子的作用(zuyng)機(jī)制生長(zhǎng)因子由不同的細(xì)胞的細(xì)胞合成后分泌，作用于靶細(xì)胞上的相應(yīng)受體，這些受體有的是位于細(xì)胞膜上的，有的是位于細(xì)胞內(nèi)部。生長(zhǎng)因子與受體結(jié)合后，激活細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞體系，產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)作用。根據(jù)受體的分布和對(duì)生長(zhǎng)因子不同的響應(yīng)，生長(zhǎng)因子是作用機(jī)制分為三種情況：生長(zhǎng)因子與具有酪氨酸蛋白激酶（TPK）活性的跨膜受體結(jié)合，TPK被活化，磷酸化相應(yīng)蛋白質(zhì)，產(chǎn)生生理效應(yīng)。與膜上受體結(jié)合，通過(guò)胞內(nèi)信息傳遞，產(chǎn)生第二信使，是蛋白激酶活化，再磷酸化相應(yīng)的效應(yīng)蛋白質(zhì)，這些被磷酸化的蛋白質(zhì)再活化核內(nèi)的轉(zhuǎn)

13、錄因子，引發(fā)基因轉(zhuǎn)錄，達(dá)到調(diào)節(jié)生長(zhǎng)與分化的作用。與膜內(nèi)受體結(jié)合，形成生長(zhǎng)因子-受體復(fù)合物，進(jìn)入胞核活化相關(guān)基因，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。與胞內(nèi)受體結(jié)合 與膜受體結(jié)合激活胞核相關(guān)基因 生長(zhǎng)因子-受體復(fù)合物基因轉(zhuǎn)錄核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子活化活化蛋白激酶磷酸化相應(yīng)蛋白質(zhì)產(chǎn)生第二信使活化酪氨酸激酶生長(zhǎng)因子作用機(jī)制示意圖常規(guī)PCR技術(shù)的基本原理基本原理：類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性退火延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。變性(binxng)（denature）：模板DNA經(jīng)加熱至95左右一定時(shí)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便(ybi

14、n)它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備。退火（annealing）（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，將溫度(wnd)降至引物的Tm值左右或以下（55左右），引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合，形成雜交鏈。延伸（extension）：DNA模板-引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。 以上三步為一個(gè)循環(huán)，約需24分鐘，每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個(gè)循環(huán)的模板，如此循環(huán)30次，大約23小時(shí)后，新生DNA片段理論上可達(dá)到2n-1個(gè)分子拷貝。定量PCR技術(shù)的基本原理基本原理：將熒光信號(hào)強(qiáng)弱與

15、PCR擴(kuò)增情況結(jié)合在一起，通過(guò)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)管內(nèi)熒光信號(hào)的變化來(lái)實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR反應(yīng)進(jìn)行的情況，PCR反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)強(qiáng)度達(dá)到設(shè)定閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)（即Ct值）與擴(kuò)增的起始模板量進(jìn)行準(zhǔn)確的絕對(duì)和（或）相對(duì)定量。循環(huán)閾值（cycle threshold，Ct）是指在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。熒光閾值（threshold）一般是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào)（baseline），缺省設(shè)置是315個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。實(shí)際上就是熒光信號(hào)開(kāi)始由本底信號(hào)進(jìn)入指數(shù)增長(zhǎng)階段的拐點(diǎn)時(shí)的熒光信號(hào)強(qiáng)度。Sanger測(cè)序法的基本原理 S

16、anger法也稱(chēng)雙脫氧鏈末端終止法，是目前應(yīng)用最為廣泛的方法。 基本原理：它巧妙地利用了DNA復(fù)制的原理，是利用ddNTP來(lái)代替常規(guī)的dNTP作為底物進(jìn)行DNA合成反應(yīng)。在DNA合成時(shí)，一旦ddNTP參入到合成的DNA鏈中，由于ddNTP脫氧核糖的3-位碳原子上缺少羥基而不能與下一位核苷酸的5-位磷酸基之間形成3,5-磷酸二酯鍵，從而使得正在延伸的DNA鏈在此ddNTP處終止。Southern印跡、Northern印跡的異同相同點(diǎn)：基本流程相似不同點(diǎn)：Southern 印跡（雜交）Northern 印跡（雜交）用途主要用于檢測(cè)基因組DNA主要用于檢測(cè)RNA事先進(jìn)行限制性?xún)?nèi)切酶處理需要不需要，可

17、直接電泳進(jìn)行堿變性需要不需要，采而是用甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳基因工程(jyn gngchng)中如何選擇載體？基因工程(jyn gngchng)選擇載體的標(biāo)準(zhǔn)如下：能自主(zzh)復(fù)制具有兩個(gè)以上的遺傳標(biāo)記物，便于重組體的篩選和鑒定有克隆位點(diǎn)（外源DNA插入點(diǎn)），常具有多個(gè)單一酶切位點(diǎn)，稱(chēng)為多克隆位點(diǎn)分子量小，以容納較大的外源DNA重組DNA技術(shù)的基本步驟？重組DNA技術(shù)的基本操作過(guò)程可形象的歸納為“分、切、接、轉(zhuǎn)、篩”，即“目的基因的獲取克隆載體的選擇和構(gòu)建外源基因與載體的連接DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞重組體的篩選克隆基因的表達(dá)”。分述如下：目的基因的獲取?？赏ㄟ^(guò)化學(xué)合成法、基因組DNA文庫(kù)、cDN

18、A文庫(kù)、PCR等方法獲取?？寺≥d體的選擇和構(gòu)建。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮筒僮骰虻男再|(zhì)選擇合適的載體和改建方法。外源基因與載體的連接。將外援DNA通過(guò)DNA連接酶進(jìn)行共價(jià)連接。DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞。重組DNA分子導(dǎo)入相應(yīng)宿主細(xì)胞后，隨受體細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖而得以復(fù)制、擴(kuò)增。重組體的篩選根據(jù)載體體系、宿主細(xì)胞特性及外源基因在受體細(xì)胞表達(dá)情況，采取直接選擇法和非直接選擇法進(jìn)行篩選，獲得含有重組DNA分子的克隆?？寺』虻谋磉_(dá)?？寺〉哪康幕蛉绻枰_而大量表達(dá)有特殊意義的蛋白質(zhì)，則需要建立相應(yīng)的表達(dá)體系，包括表達(dá)載體的構(gòu)建、受體細(xì)胞的建立及表達(dá)產(chǎn)物的分離、純化等。目前基因治療采用的方法分為哪幾種？基因治療的方法

19、分為以下：基因矯正，將致病基因的異常堿基進(jìn)行糾正，而正常部分予以保留的基因治療方法；基因置換，用正常的基因通過(guò)體內(nèi)基因同源重組，原位替換病變細(xì)胞內(nèi)的致病基因，使細(xì)胞內(nèi)DNA完全恢復(fù)正常狀態(tài)的基因治療方法；基因增補(bǔ)，將目的基因?qū)氩∽兓蚱渌?xì)胞，不去除異?；?，通過(guò)目的基因的非定點(diǎn)整合，使其表達(dá)產(chǎn)物補(bǔ)償缺陷基因的功能或使原有的功能得以加強(qiáng)的基因治療方法；基因失活，將特定的序列導(dǎo)入細(xì)胞后，在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平阻斷某些基因的異常表達(dá)的治療方法；自殺基因的應(yīng)用，用某些病毒或細(xì)菌的基因所表達(dá)的酶能將對(duì)人體無(wú)毒或低毒的藥物前體在人體細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞毒性產(chǎn)物，從而導(dǎo)致攜帶該基因的受體細(xì)胞也被殺死，故稱(chēng)這類(lèi)基因?yàn)?/p>

20、“自殺基因”?；蛑委煹幕具^(guò)程？基因治療的基本過(guò)程包括：治療性基因的選擇，選擇對(duì)疾病有治療作用的特定目的基因是基因治療的首要問(wèn)題；基因載體的選擇，目前使用的載體分病毒性載體和非病毒性載體兩類(lèi)，而一般臨床多選用病毒性載體。目前被用作基因轉(zhuǎn)移的病毒有逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒；靶細(xì)胞的選擇，根據(jù)受體細(xì)胞的不同，基因治療可分為體細(xì)胞的基因治療和生殖細(xì)胞的基因治療，而目前基因治療禁止使用生殖細(xì)胞，僅限于使用體細(xì)胞為靶細(xì)胞?；蜣D(zhuǎn)移，如何有效地將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，是基因治療研究的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，可分為非病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移和病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移；外源基因表達(dá)的篩檢，一般利用載體中的標(biāo)記基因?qū)D(zhuǎn)染細(xì)胞

21、進(jìn)行篩檢，再檢測(cè)轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的標(biāo)記基因表達(dá)情況；回輸體內(nèi)，將治療基因修飾的細(xì)胞以不同的方式回輸體內(nèi)以發(fā)揮治療作用。人類(lèi)基因組計(jì)劃的基本(jbn)任務(wù)及意義HCG內(nèi)容包括人類(lèi)基因組作圖及序列分析，基因的鑒定、基因組研究技術(shù)的建立與創(chuàng)新、模式(msh)生物基因組作圖和測(cè)序、信息系統(tǒng)的建立、存儲(chǔ)及相應(yīng)軟件的開(kāi)發(fā)、相關(guān)產(chǎn)業(yè)的開(kāi)發(fā)等。HCG基本任務(wù)可用四張圖譜來(lái)概括，即遺傳圖、物理圖、轉(zhuǎn)錄圖（基因圖）、序列圖。遺傳圖：又稱(chēng)連鎖圖，是具有(jyu)遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記作為“位標(biāo)”，遺傳學(xué)距離為“圖距”的基因組圖。需要應(yīng)用多態(tài)性標(biāo)志RFLP、VNTR、SNP。物理圖譜：是以一段已知核苷酸的DNA片段 為“位標(biāo)”，以DNA實(shí)際長(zhǎng)度（Mb或kb）作