五味保肝丸定性定量實(shí)驗(yàn)研究

1、五味保肝丸定性定量實(shí)驗(yàn)研究         11-05-18 11:22:00     編輯：studa20                 作者：張偉，張?jiān)汽悾x旭善，于爽，孫晶  【摘要】  目的 建立五味保肝丸定性定量質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 薄層色譜法定性鑒別五味子和丹參的存在, 高效液相色

2、譜法確定降酶丸中五味子甲素含量。結(jié)果 定性鑒別五味子和丹參, 方法簡(jiǎn)便，圖譜清晰;高效液相色譜法測(cè)定含量，結(jié)果準(zhǔn)確,陰性無(wú)干擾。結(jié)論 該實(shí)驗(yàn)方法可作為降酶丸的定性定量質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)。 【關(guān)鍵詞】  五味保肝丸;薄層色譜;高效液相色譜;五味子甲素五味保肝丸由五味子、丹參等中藥組成, 是我院傳統(tǒng)中藥自制制劑(魯衛(wèi)藥制字Z02080175)，具有斂陰、活血、降酶功效, 用于乙型肝炎、轉(zhuǎn)氨酶升高等病癥, 臨床應(yīng)用近30年，療效確切。為控制該制劑質(zhì)量, 除常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目外,實(shí)驗(yàn)研究五味子、丹參兩味藥的薄層色譜法鑒別方法，以及該制劑主要藥效成分五味子甲素含量范圍，為該制劑質(zhì)量控制指標(biāo)提供定性定量實(shí)驗(yàn)

3、依據(jù)。1 主要儀器、試劑與藥材1.1 主要儀器Agilent 1100型高效液相色譜儀 (美國(guó))， JA2003型電子分析天平(上海)，KQ100型超聲波清洗器(昆山)。1.2 主要試劑五味子甲素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，甲醇為色譜純(美國(guó)),水為重蒸餾水,其余試劑均為分析純。1.3 主要藥材五味保肝丸由本院制劑室提供，其他實(shí)驗(yàn)用藥材取自本院中藥庫(kù)，經(jīng)鑒定五味子為木蘭科植物五味子Schisandchinensis(Turcz.)Bail的干燥成熟果實(shí)，丹參為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.干燥根及根莖。陰性對(duì)照品實(shí)驗(yàn)時(shí)現(xiàn)制。2 薄層色譜定性鑒別2.1 五味

4、子定性鑒別取五味保肝丸2g，研碎，加氯仿30ml，超聲提取30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)勇确?ml使溶解，作為供試品溶液;另取缺五味子的處方比例量的其他藥材細(xì)粉2g，按上述方法,制成五味子陰性對(duì)照液。再取五味子甲素對(duì)照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液;吸取上述三種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以石油醚(3060)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干。置紫外燈(365nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，五味子陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。2.2 丹參定性鑒別取五味保肝丸3g，研碎，加乙醚20m

5、l，超聲處理10min，過(guò)濾，濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml溶解，作為供試品溶液;另取缺丹參的處方比例量的其他藥材細(xì)粉2g，按上述方法,制成丹參陰性對(duì)照液;再取丹參酮A對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述3種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(19：1)為展開劑，展開、取出、晾干。日光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，丹參陰性對(duì)照液無(wú)此斑點(diǎn)。3 五味子甲素含量測(cè)定3.1 色譜條件色譜柱：Agilent ODS柱(4.6mm×150mm,5m)。柱溫：30,流動(dòng)相：甲醇-水(80：20),流速：1.5

6、ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm。理論板數(shù)按五味子甲素計(jì)應(yīng)不低于3000,五味子甲素峰與相鄰峰分離度符合要求。3.2 對(duì)照品溶液制備精密稱取減壓干燥至恒重的五味子甲素對(duì)照品6.32mg,加甲醇使溶解,并定容至25 ml;制成濃度為0.2528mg/ml的對(duì)照品溶液。3.3 樣品液制備取五味保肝丸適量，粉碎過(guò)四號(hào)篩, 置硅膠于干燥器中干燥24h后備用。取樣品粉末約2g，精密稱定,置150ml 具塞三角燒瓶中,準(zhǔn)確加入氯仿50ml,稱重，超聲提取40min, 水浴溫度45。提取液放至室溫, 再稱定重量，用氯仿補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液10ml，置水浴上蒸干,殘?jiān)蛹状挤执稳芙舛ㄈ苡?0ml 容量瓶中, 得樣品液。3.4 陰性對(duì)照溶液制備取不含五味子的處方比例量的其他藥材細(xì)粉，照“2.3”項(xiàng)方法制成陰性對(duì)照溶液。3.5 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)按“2.1”項(xiàng)下條件，將對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液分別進(jìn)樣10l進(jìn)行測(cè)定,