煙葉蛋白的分離純化_第1頁
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文檔簡介

1、.中國礦業(yè)大學(xué)研究生學(xué)術(shù)專題研討會記錄第 次時(shí)間 2010.5.14地點(diǎn)專題匯報(bào)人（1）匯報(bào)主題煙葉蛋白的分離純化（2）專題匯報(bào)人（2）匯報(bào)主題研討會記錄：煙葉蛋白的分離純化（2）1.研究背景及意義煙草作為一種高產(chǎn)作物，具有豐富的原料來源。煙葉蛋白質(zhì)量高，營養(yǎng)平衡，在目前所研究的植物蛋白中位居首位。2.煙草蛋白功能特性煙草中的蛋白質(zhì)分為可溶性蛋白和不溶性蛋白?？扇苄缘鞍滓话胱笥沂侨~綠體蛋白，另一半為其他可溶性蛋白質(zhì)的復(fù)合物。3.實(shí)驗(yàn)安排煙葉蛋白的分離純化研究主要包括三方面： （1）最大化地將煙葉細(xì)胞中的可溶性蛋白溶解到提取液中； （2）通過大孔樹脂法來除去提取液中的雜質(zhì)，調(diào)節(jié)各因素來獲得最佳的

2、煙葉蛋白結(jié)晶條件； （3）對煙葉蛋白結(jié)晶體進(jìn)行純度鑒定。目前第一階段的實(shí)驗(yàn)已基本完成。4.實(shí)驗(yàn)進(jìn)展（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 采用考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）來標(biāo)定提取液中的可溶蛋白含量。以牛血清蛋白（BSA）為標(biāo)準(zhǔn)蛋白。（2）蛋白標(biāo)準(zhǔn)液 稱取100mg牛血清蛋白，溶于100ml蒸餾水中，即為1000g/ml的蛋白溶液(3)提取液鹽濃的影響(4)提取時(shí)間的影響(5)提取溫度的影響(6)料液比的影響(7)脫脂劑的影響結(jié)論：1.提取溫度<40,不隨溫度改變而改變提取率，室溫下提取即可；2.pH在中性條件下有較大的提取率，建議采用含NaCl的緩沖溶液；3.脫脂劑石油醚的加入并沒有提高蛋白提取率；4.抗氧化劑的加入對蛋白提取率有不同程度的提升，但前提是提取液的pH不因此發(fā)生大的變化，檸檬酸雖然不具備還原性，但它的效果在三

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