實驗一 顯微鏡的基本知識與使用ppt課件

1、l學(xué)習(xí)顯微鏡的原理、使用方法和保養(yǎng)。學(xué)習(xí)顯微鏡的原理、使用方法和保養(yǎng)。 l利用顯微鏡觀察微生物標(biāo)本利用顯微鏡觀察微生物標(biāo)本l學(xué)習(xí)顯微數(shù)碼系統(tǒng)的使用方法。學(xué)習(xí)顯微數(shù)碼系統(tǒng)的使用方法。 l學(xué)習(xí)生物繪圖。學(xué)習(xí)生物繪圖。了解顯微鏡的構(gòu)造、原理了解顯微鏡的構(gòu)造、原理利用顯微鏡觀察微生物標(biāo)本利用顯微鏡觀察微生物標(biāo)本了解顯微數(shù)碼系統(tǒng)的使用方法了解顯微數(shù)碼系統(tǒng)的使用方法生物繪圖與拍照生物繪圖與拍照l微生物染色裝片標(biāo)本。微生物染色裝片標(biāo)本。l顯微鏡、計算機(jī)、香柏油、二甲苯或乙醇顯微鏡、計算機(jī)、香柏油、二甲苯或乙醇乙醚混合液、擦鏡紙等。乙醚混合液、擦鏡紙等。（一了解顯微鏡的構(gòu)造、原理（一了解顯微鏡的構(gòu)造、原理鏈接

2、實驗錄相鏈接實驗錄相 1、光學(xué)部分：、光學(xué)部分： 接目鏡、接物鏡、照接目鏡、接物鏡、照明裝置明裝置(聚光鏡、虹彩聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等光圈、反光鏡等)。 它使檢視物放大，造它使檢視物放大，造成物象。成物象。 2、機(jī)械部分：、機(jī)械部分： 鏡座、鏡臂、鏡筒、鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細(xì)調(diào)節(jié)器等部節(jié)器、細(xì)調(diào)節(jié)器等部件。件。 它起著支持、調(diào)理、它起著支持、調(diào)理、固定等作用。固定等作用。圖圖1-2 光學(xué)顯微鏡的成像原理光學(xué)顯微鏡的成像原理倒立的虛像倒立的虛像 1、 放大倍數(shù)放大倍數(shù)=接物鏡放大倍數(shù)接物鏡放大倍數(shù)接目鏡放大倍數(shù)接

3、目鏡放大倍數(shù) 2、顯微鏡的分辨率、顯微鏡的分辨率 是表示顯微鏡辨析物體兩端是表示顯微鏡辨析物體兩端兩點之間距離的能力，可用公式表示為：兩點之間距離的能力，可用公式表示為： D=/2n sin(/2) 式中式中D：物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。：物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。 l l：可見光的波長平均：可見光的波長平均0.55m) n: 物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率。物鏡和被檢標(biāo)本間介質(zhì)的折射率。 ：鏡口角即入射角）。鏡口角即入射角）。3、數(shù)值孔徑、數(shù)值孔徑 N.A=n.sin/2）l干燥系物鏡干燥系物鏡 以空氣為介質(zhì)，如常用的以空氣為介質(zhì)，如常用的40以下的以下的物鏡，數(shù)值孔徑均小于物鏡，

4、數(shù)值孔徑均小于1。l油浸系物鏡油浸系物鏡 常以香柏油為介質(zhì)，此物鏡又叫油鏡常以香柏油為介質(zhì)，此物鏡又叫油鏡頭，其放大率為頭，其放大率為90100，數(shù)值孔值大于，數(shù)值孔值大于1。l根據(jù)物鏡放大率的高低，可分為：根據(jù)物鏡放大率的高低，可分為：l低倍物鏡低倍物鏡 指指16，NA值為值為0.040.15；l中倍物鏡中倍物鏡 指指625，NA值為值為0.15 0.40；l高倍物鏡高倍物鏡 指指2563，NA值為值為0.350.95；l油浸物鏡油浸物鏡 指指90100，NA值為值為1.251.40。增加照明亮度：油鏡，即油浸接物增加照明亮度：油鏡，即油浸接物鏡。當(dāng)光線由反光鏡通過玻片與鏡鏡。當(dāng)光線由反光鏡

5、通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油其折射率與中間的介質(zhì)是一層油其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進(jìn)光量，從而使物象增加了視野的進(jìn)光量，從而使物象更加清晰。更加清晰。提高分辨率：香柏油提高分辨率：香柏油n=1.515為為介質(zhì)時，其折射率與玻璃相近，光介質(zhì)時，其折射率與玻璃相近，光線經(jīng)過載玻片后可直接通過香柏油線經(jīng)過載玻片后可直接通過香柏油進(jìn)入物鏡而不發(fā)生折射，從而增加進(jìn)入

6、物鏡而不發(fā)生折射，從而增加數(shù)值孔徑達(dá)到提高分辨率的目的。數(shù)值孔徑達(dá)到提高分辨率的目的。 l鏈接演示顯微數(shù)鏈接演示顯微數(shù)碼系統(tǒng)軟件的使碼系統(tǒng)軟件的使用方法用方法l演示拍照的方法演示拍照的方法l圖片保存要求圖片保存要求l建文件夾：建文件夾：l D:環(huán)境環(huán)境0511班班201922200*l圖片：圖片：l 格式：格式：JPGl 文件名：環(huán)境文件名：環(huán)境201922200*大大腸桿菌（腸桿菌（ 10100 ）l1、觀察前的準(zhǔn)備、觀察前的準(zhǔn)備l2、低倍鏡觀察、低倍鏡觀察l3、高倍鏡觀察、高倍鏡觀察l4、油鏡觀察、油鏡觀察l5、鏡檢完畢后的處理、鏡檢完畢后的處理 （1將顯微鏡置于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡將顯微鏡

7、置于平穩(wěn)的實驗臺上，鏡座距實驗臺邊沿約為座距實驗臺邊沿約為34cm。檢查零件是。檢查零件是否齊全，鏡頭是否清潔。否齊全，鏡頭是否清潔。 （2調(diào)節(jié)光亮度調(diào)節(jié)光亮度 （3調(diào)節(jié)目鏡及數(shù)值孔徑大小調(diào)節(jié)目鏡及數(shù)值孔徑大小 鏈接實驗錄相鏈接實驗錄相 將標(biāo)本片放置在載物臺上，用標(biāo)本夾夾住，移動推動器，將標(biāo)本片放置在載物臺上，用標(biāo)本夾夾住，移動推動器，使被觀察的標(biāo)本處在物鏡正下方。使被觀察的標(biāo)本處在物鏡正下方。 轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)旋鈕，使物鏡調(diào)至接近標(biāo)本處，用目鏡觀轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)旋鈕，使物鏡調(diào)至接近標(biāo)本處，用目鏡觀察并同時用粗調(diào)節(jié)旋鈕慢慢下降載物臺，直至物像出察并同時用粗調(diào)節(jié)旋鈕慢慢下降載物臺，直至物像出現(xiàn)，再用細(xì)調(diào)節(jié)旋

8、鈕使物像清晰為止。現(xiàn)，再用細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕使物像清晰為止。 用推動器移動標(biāo)本片，找到合適的目的像并將它移到用推動器移動標(biāo)本片，找到合適的目的像并將它移到視野中央進(jìn)行觀察。視野中央進(jìn)行觀察。 鏈接實驗錄相鏈接實驗錄相l(xiāng)在低倍物鏡觀察的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)換高倍物鏡。較好在低倍物鏡觀察的基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)換高倍物鏡。較好的顯微鏡，低倍、高倍鏡頭是同焦的，在正常的顯微鏡，低倍、高倍鏡頭是同焦的，在正常情況下，高倍物鏡的轉(zhuǎn)換不應(yīng)碰到載玻片或其情況下，高倍物鏡的轉(zhuǎn)換不應(yīng)碰到載玻片或其上的蓋玻片。上的蓋玻片。l若使用不同型號的物鏡，在轉(zhuǎn)換物鏡時要從側(cè)若使用不同型號的物鏡，在轉(zhuǎn)換物鏡時要從側(cè)面觀察，避免鏡頭與玻片相撞。然后從目鏡觀面觀

9、察，避免鏡頭與玻片相撞。然后從目鏡觀察，調(diào)節(jié)光照，使亮度適中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)節(jié)察，調(diào)節(jié)光照，使亮度適中，緩慢調(diào)節(jié)粗調(diào)節(jié)旋鈕，使載物臺下降，直至物像出現(xiàn)，再用細(xì)旋鈕，使載物臺下降，直至物像出現(xiàn)，再用細(xì)調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至物像清晰為止，找到需觀察的部調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)至物像清晰為止，找到需觀察的部位，并移至視野中央進(jìn)行觀察。位，并移至視野中央進(jìn)行觀察。l鏈接實驗錄相鏈接實驗錄相（1 1升高鏡筒，將油鏡轉(zhuǎn)至工作位升高鏡筒，將油鏡轉(zhuǎn)至工作位置。在玻片標(biāo)本區(qū)域滴加香柏油。置。在玻片標(biāo)本區(qū)域滴加香柏油。（2 2從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)器慢慢從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)器慢慢降下鏡筒，使油鏡浸在油中幾乎降下鏡筒，使油鏡浸在油中幾乎與裝片

10、接觸，但不可壓及裝片，與裝片接觸，但不可壓及裝片，以免壓碎玻片，損壞鏡頭。以免壓碎玻片，損壞鏡頭。（3 3將光線調(diào)亮，目鏡觀察，用細(xì)將光線調(diào)亮，目鏡觀察，用細(xì)調(diào)節(jié)器校正焦距，直至物像看清調(diào)節(jié)器校正焦距，直至物像看清為止。仔細(xì)觀察并繪圖。為止。仔細(xì)觀察并繪圖。鏈接實驗錄相鏈接實驗錄相（1觀察完畢，下降載物臺，取下載玻片。觀察完畢，下降載物臺，取下載玻片。（2將油鏡頭轉(zhuǎn)出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的香柏油，再用擦鏡紙沾少將油鏡頭轉(zhuǎn)出，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的香柏油，再用擦鏡紙沾少許二甲苯或乙醚酒精混合液擦掉殘留的香柏油，最后再用干凈的許二甲苯或乙醚酒精混合液擦掉殘留的香柏油，最后再用干凈的擦鏡紙擦干殘留

11、的二甲苯注意向一個方向擦拭）。擦鏡紙擦干殘留的二甲苯注意向一個方向擦拭）。（3將各部分還原。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使物鏡頭不與載物臺通光孔相對，將各部分還原。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器，使物鏡頭不與載物臺通光孔相對，而是成八字形位置，再將鏡筒下降至最低，同時降下聚光器。用柔軟而是成八字形位置，再將鏡筒下降至最低，同時降下聚光器。用柔軟紗布清潔載物臺等機(jī)械部分，最后套上鏡罩，置陰涼干燥處存放。紗布清潔載物臺等機(jī)械部分，最后套上鏡罩，置陰涼干燥處存放。鏈接實驗錄相鏈接實驗錄相l(xiāng)拍照與提交圖片拍照與提交圖片l 提交在高倍鏡和油鏡下觀察到的微生物提交在高倍鏡和油鏡下觀察到的微生物（*菌形態(tài)圖片，注明總放大倍數(shù)。菌形態(tài)圖

12、片，注明總放大倍數(shù)。l生物繪圖生物繪圖 1、不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件、不準(zhǔn)擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。以免損壞。 2、鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔、鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度。度。 3、觀察標(biāo)本時，必須、觀察標(biāo)本時，必須依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時，依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當(dāng)目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面?；驌p傷鏡面。 4、觀察時，兩眼睜開，、觀察時，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習(xí)慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時，右眼注視繪圖。在左眼觀察時，右眼注視繪圖。 5、拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單