紅細(xì)胞血型檢測(cè)課件

1、紅細(xì)胞血型檢測(cè)輸輸 血血 前前 檢檢 查查 第一頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)主要(zhyo)內(nèi)容u輸血前免疫血液學(xué)檢查輸血前免疫血液學(xué)檢查u鹽水介質(zhì)鹽水介質(zhì)(jizh)試驗(yàn)技術(shù)試驗(yàn)技術(shù)u酶處理試驗(yàn)技術(shù)酶處理試驗(yàn)技術(shù)u抗球蛋白試驗(yàn)技術(shù)抗球蛋白試驗(yàn)技術(shù)u聚凝胺介質(zhì)試驗(yàn)技術(shù)聚凝胺介質(zhì)試驗(yàn)技術(shù)u微柱凝集試驗(yàn)技術(shù)微柱凝集試驗(yàn)技術(shù)u吸收放散試驗(yàn)吸收放散試驗(yàn)u凝集抑制試驗(yàn)?zāi)种圃囼?yàn)第二頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)第一節(jié) 輸血前免疫(miny)血液學(xué)檢查 一、受血者標(biāo)本處理一、受血者標(biāo)本處理 二、受血者和供血者二、受血者和供血者ABOABO和和RhRh定型定型 三、不規(guī)則抗體的篩選和鑒定三、不規(guī)則抗體的

2、篩選和鑒定 四、交叉配血試驗(yàn)四、交叉配血試驗(yàn) 五、實(shí)驗(yàn)五、實(shí)驗(yàn)(shyn)(shyn)結(jié)果的規(guī)范化報(bào)告結(jié)果的規(guī)范化報(bào)告第三頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)輸血前檢查輸血前檢查(jinch)的主要程序的主要程序第四頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)受血者病史和血樣的檢查受血者病史和血樣的檢查(jinch)、核對(duì)及處理、核對(duì)及處理受血者血樣本受血者血樣本(yngbn)第五頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)為什么輸血前檢查用血清為什么輸血前檢查用血清(xuqng)比血漿更好？比血漿更好？第六頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)ABO正反定型不符分析(fnx)基本程序u重復(fù)試驗(yàn)重復(fù)試驗(yàn)u重新采集獻(xiàn)血者與受血者血液標(biāo)本

3、重新采集獻(xiàn)血者與受血者血液標(biāo)本u查詢受血者既往病史及輸血史和用藥史等查詢受血者既往病史及輸血史和用藥史等u多次洗滌多次洗滌(xd)(xd)標(biāo)本紅細(xì)胞標(biāo)本紅細(xì)胞u應(yīng)用抗應(yīng)用抗-AB-AB、抗、抗-A-A1 1、抗、抗-H-H檢測(cè)紅細(xì)胞檢測(cè)紅細(xì)胞u分析分析O O型篩選細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果型篩選細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果第七頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)l 復(fù)檢正定型血型結(jié)果的準(zhǔn)確性，糾正漏檢、誤報(bào)復(fù)檢正定型血型結(jié)果的準(zhǔn)確性，糾正漏檢、誤報(bào)l 亞型亞型l 能夠糾正因疾病原因造成的紅細(xì)胞抗原減弱造成的血型錯(cuò)誤能夠糾正因疾病原因造成的紅細(xì)胞抗原減弱造成的血型錯(cuò)誤(cuw)(cuw)l 排除獲得性抗原（如類排除獲得性抗原（如類

4、B B抗原）和冷凝集現(xiàn)象對(duì)紅細(xì)胞定型的抗原）和冷凝集現(xiàn)象對(duì)紅細(xì)胞定型的干擾干擾l 不規(guī)則抗體不規(guī)則抗體ABO正反定型(dng xng)的臨床意義第八頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)錯(cuò)加試劑錯(cuò)加試劑(shj)或標(biāo)本或標(biāo)本技術(shù)技術(shù)(jsh)和操作和操作受血者紅受血者紅細(xì)胞或血細(xì)胞或血清清(xuqng)(xuqng)ABO正反定型不一致的原因試劑失效或污染試劑失效或污染細(xì)胞與血清間比例細(xì)胞與血清間比例不適當(dāng)不適當(dāng)溶血現(xiàn)象未能識(shí)別溶血現(xiàn)象未能識(shí)別漏加試劑漏加試劑結(jié)果記錄或判斷錯(cuò)結(jié)果記錄或判斷錯(cuò)誤誤l血清異常血清異常l紅細(xì)胞致敏紅細(xì)胞致敏l近期輸血近期輸血l疾病導(dǎo)致抗原減疾病導(dǎo)致抗原減弱弱l抗體減弱抗體減

5、弱l不規(guī)則抗體不規(guī)則抗體l年齡年齡l近期進(jìn)行大量血近期進(jìn)行大量血漿置換治療漿置換治療第九頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)(1) 假凝集假凝集(nngj)（串錢狀凝集（串錢狀凝集(nngj)）較多見，本身不是較多見，本身不是(b shi)抗原與抗體的反應(yīng)?？乖c抗體的反應(yīng)。原因：原因： A 某些肝病、腎病等所致的纖維蛋白原及球蛋白的某些肝病、腎病等所致的纖維蛋白原及球蛋白的增高。增高。 B 玻片法實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)，水分蒸發(fā)。玻片法實(shí)驗(yàn)長(zhǎng)，水分蒸發(fā)。 C 右旋糖酐、輸注某些造影劑等右旋糖酐、輸注某些造影劑等處理：用生理鹽水洗滌多次，重新配制懸液。處理：用生理鹽水洗滌多次，重新配制懸液。第十頁，共四十二頁。紅細(xì)

6、胞血型檢測(cè)(2) 冷凝集（自身冷凝集（自身(zshn)凝集）凝集） 冷凝集素正常人血清中存在，但效價(jià)不高，冷凝集素正常人血清中存在，但效價(jià)不高，1：16以以下，室溫不反應(yīng)。冷凝集素綜合征是免疫球蛋白下，室溫不反應(yīng)。冷凝集素綜合征是免疫球蛋白M(IgM)抗體引起的自體免疫性疾病，又叫抗體引起的自體免疫性疾病，又叫“冷血凝集冷血凝集素病素病”或或“冷凝集素病冷凝集素病”。原因：。原因：（1）自身免疫性溶血性貧血）自身免疫性溶血性貧血(pnxu)、病毒性肺炎等、病毒性肺炎等（2）室溫過低）室溫過低 處理：處理：37生理鹽水洗滌，并在生理鹽水洗滌，并在37做凝集實(shí)驗(yàn)。做凝集實(shí)驗(yàn)。第十一頁，共四十二頁。

7、紅細(xì)胞血型檢測(cè) 高效價(jià)冷凝集素患者的血型鑒定及配輸血的高效價(jià)冷凝集素患者的血型鑒定及配輸血的處理處理1 臨床資料患者，女，56歲，貧血，Hb30g/L，該患皮膚蒼白，呈極度貧血貌，需輸血治療，血型鑒定為AB型，但與AB型交叉配血分歧。2 ABO定型重新血型鑒定，正定型為AB型，反定型ABO均凝集，該患者無輸血史，考慮可能為冷凝集素所致。 逐將做血型之玻片置于37溫箱，10min后觀察可見：抗B側(cè)凝集顆粒變小，抗A側(cè)不變；升溫至45，抗B側(cè)凝集消失，抗A測(cè)不變。取出室溫1min后，抗B側(cè)復(fù)又出現(xiàn)凝集，初步(chb)定型為A型；用37鹽水將患者RBC洗滌3次，做正定型為A型；將洗滌RBC 1份加患

8、者血清內(nèi)的冷凝集素用自家吸收后的血清做反定型，也為A型。第十二頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè) 3 血清冷凝集效價(jià)測(cè)定患者不同稀釋濃度的血清與洗滌后的O型RBC做玻片凝集試驗(yàn)，室溫時(shí)測(cè)得冷凝集效價(jià)為1:2000。4 配血及輸血用A型血按常規(guī)方法做鹽水配血試驗(yàn)，主側(cè)出現(xiàn)凝集次側(cè)因該患RBC自家凝集成顆粒狀，不能進(jìn)行。用37鹽水洗滌后的RBC配成0.05L/L的RBC懸液與A型血清做次側(cè)交叉，無凝集及溶血。用前述自家吸收后的血清與A型RBC做次側(cè)交叉，無凝集及溶血。交叉顯示可以輸血，考慮該患冷凝集素效價(jià)太高，要求臨床保溫輸血，室溫控制在2530。輸A型血200ml，無不良反應(yīng)。后按同樣方法兩次繼續(xù)輸

9、A型血800ml 。患者均無不良反應(yīng)。因本地缺免疫抑制藥，患者自行出院往北京，在中日友好醫(yī)院診斷為冷凝集素引起的免疫性溶血性貧血(pnxu)。經(jīng)北京紅 十字中心血站鑒定冷凝集素為抗I。第十三頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)5 討論多數(shù)正凡人的血清中有低效價(jià)冷凝集素，但效價(jià)一般不超過1:16，且在20時(shí)凝集即可消失。本例患者由于病理變化，血清中出現(xiàn)高效價(jià)冷凝集素抗-I，在37還能與自身RBC發(fā)生明顯凝集，使血型鑒定出現(xiàn)誤判，并影響交叉配血。 碰到此種情況(qngkung)應(yīng)該留意：血型鑒定時(shí)先用37鹽水洗滌被檢RBC 23次，以消除冷凝集素造成的鑒定錯(cuò)誤。交叉配血時(shí)，次側(cè)RBC也應(yīng)該用37鹽水洗3

10、次，主側(cè)血清先做自家吸收試驗(yàn)吸收冷凝集素，以防冷凝集素造成的配血困難。冷凝集素效價(jià)太高時(shí)，提高室溫2530下反應(yīng)是行之有效的方法。第十四頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)(3)類類B 現(xiàn)象現(xiàn)象(xinxing)：原因：原因： 被腸道桿菌感染的病人（被腸道桿菌感染的病人（O、A型），其紅細(xì)胞獲得一種型），其紅細(xì)胞獲得一種“類類B”抗原抗原（變成（變成B、AB型），但血清中含有正常的抗型），但血清中含有正常的抗B。現(xiàn)象：現(xiàn)象： 凝集較疏松，游離凝集較疏松，游離RBC多，不受溫度的影響，唾液中無多，不受溫度的影響，唾液中無B型血型物型血型物質(zhì)，與質(zhì)，與AB血清不凝集，只與抗血清不凝集，只與抗B反應(yīng)病情好

11、轉(zhuǎn)，類反應(yīng)病情好轉(zhuǎn)，類B消失。消失。處理：用唾液定血型處理：用唾液定血型 吸收放散試驗(yàn)（吸附的抗體通過吸收放散試驗(yàn)（吸附的抗體通過(tnggu)加熱等從加熱等從RBC上釋放上釋放出來）出來） 第十五頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)RhD定型(dng xng)及其常見問題1.Rh1.Rh定型定型(dng xng)(dng xng)RhDRhD定型，試管法最經(jīng)典，多使用微柱凝膠卡定型，試管法最經(jīng)典，多使用微柱凝膠卡2.2.RhD陰性確認(rèn)陰性確認(rèn)IgM抗抗-D陰性陰性三個(gè)廠家三個(gè)廠家IgGIgG抗抗- -D進(jìn)行進(jìn)行(jnxng)確認(rèn)確認(rèn)l抗人球蛋白法進(jìn)行確認(rèn)抗人球蛋白法進(jìn)行確認(rèn)l三種三種IgG抗抗-D

12、試劑均為陰性，報(bào)試劑均為陰性，報(bào)RhD陰性陰性l一種或一種以上一種或一種以上IgG抗抗-D試劑為陽性，報(bào)弱試劑為陽性，報(bào)弱D第十六頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)三三. 交叉交叉(jioch)配血（配血（Crossmatching）目的：驗(yàn)證血型、發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體目的：驗(yàn)證血型、發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體 輸血前必做，是安全輸血前必做，是安全(nqun)輸血的根本保證。輸血的根本保證。主側(cè)：檢測(cè)病人血清中有無破壞供者主側(cè)：檢測(cè)病人血清中有無破壞供者RBC的的 抗體存在。（抗體存在。（受血者血清受血者血清+供血者供血者RBC）次側(cè)：檢測(cè)供者血清中有無破壞病人次側(cè)：檢測(cè)供者血清中有無破壞病人RBC的的 抗體存在。

13、（抗體存在。（供血者血清供血者血清+受血者受血者RBC ）第十七頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)交叉交叉(jioch)(jioch)配血的主次側(cè)配血的主次側(cè)第十八頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)接收接收(jishu)申請(qǐng)單和血標(biāo)本申請(qǐng)單和血標(biāo)本 核對(duì)無誤核對(duì)無誤(ww)（如有錯(cuò)誤與醫(yī)生（如有錯(cuò)誤與醫(yī)生/護(hù)士聯(lián)系）護(hù)士聯(lián)系）進(jìn)行進(jìn)行(jnxng)交叉配血交叉配血 相合相合結(jié)果輸入微機(jī)結(jié)果輸入微機(jī)不相合不相合打印發(fā)血單打印發(fā)血單血液中心血液中心交叉配血工作流程交叉配血工作流程第十九頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)交叉交叉(jioch)配血的要求配血的要求第二十頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)試驗(yàn)試驗(yàn)(sh

14、yn)方法方法第二十一頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)鹽水介質(zhì)鹽水介質(zhì)(jizh)凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)l 懸浮于鹽水介質(zhì)中的紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體分子結(jié)合，懸浮于鹽水介質(zhì)中的紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體分子結(jié)合，交叉聯(lián)結(jié)形成肉眼可見的凝集。交叉聯(lián)結(jié)形成肉眼可見的凝集。l 主要檢測(cè)主要檢測(cè)IgM類抗體（類抗體（ABO系統(tǒng)、抗系統(tǒng)、抗E）。）。l 抗抗A抗抗B特異性特異性IgG類抗體有時(shí)可直接凝集懸浮于鹽水中類抗體有時(shí)可直接凝集懸浮于鹽水中的紅細(xì)胞，與紅細(xì)胞表面抗原位點(diǎn)數(shù)目的紅細(xì)胞，與紅細(xì)胞表面抗原位點(diǎn)數(shù)目(shm)和抗原決定和抗原決定簇位置有關(guān)。簇位置有關(guān)。 第二十二頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)鹽水介質(zhì)鹽水介質(zhì)(ji

15、zh)凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)l 方法：玻片法方法：玻片法- -便于顯微鏡觀察結(jié)果便于顯微鏡觀察結(jié)果 試管法試管法- -適用于不同溫度適用于不同溫度(wnd)(wnd)、便于洗滌、便于洗滌l 反應(yīng)溫度：反應(yīng)溫度：4 42222l 臨床意義：鹽水凝集試驗(yàn)陽性，并在臨床意義：鹽水凝集試驗(yàn)陽性，并在3737也有活性的抗體有意也有活性的抗體有意義，這些抗體通常能用其他方法證明。室溫有活性，義，這些抗體通常能用其他方法證明。室溫有活性，3737無活無活性者臨床意義不大。性者臨床意義不大。 第二十三頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè) 試驗(yàn)記錄試驗(yàn)記錄 4+4+（+）：一個(gè)大凝集塊，背景透明，無游離）：一個(gè)大凝集塊，背

16、景透明，無游離細(xì)胞細(xì)胞(xbo)(xbo) 3+3+（+）：數(shù)個(gè)大凝集塊，背景透明，無游離）：數(shù)個(gè)大凝集塊，背景透明，無游離細(xì)胞細(xì)胞 2+2+（+）：許多小凝集塊，背景稍混濁，有游離）：許多小凝集塊，背景稍混濁，有游離細(xì)胞細(xì)胞 1+1+（+ +）：細(xì)小的凝集塊，背景渾濁）：細(xì)小的凝集塊，背景渾濁 W+W+（）：極細(xì)小凝集塊，要用顯微鏡觀察結(jié)果（）：極細(xì)小凝集塊，要用顯微鏡觀察結(jié)果 0 0（- -）：無凝集，無溶血，細(xì)胞呈游離散在狀態(tài)）：無凝集，無溶血，細(xì)胞呈游離散在狀態(tài) PHPH：部分溶血：部分溶血 H H：完全溶血：完全溶血第二十四頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)試管法結(jié)果試管法結(jié)果(ji g

17、u)判判定定紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞凝集(nngj)強(qiáng)度判斷標(biāo)強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)第二十五頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)鹽水介質(zhì)凝集鹽水介質(zhì)凝集(nngj)試驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果分析：陽性結(jié)果分析：陽性- -凝集或溶血凝集或溶血 陰性陰性- -無凝集或溶血無凝集或溶血先觀察有無溶血、再觀先觀察有無溶血、再觀察有無凝集察有無凝集注意事項(xiàng)：細(xì)胞濃度注意事項(xiàng)：細(xì)胞濃度2 25%5%（嚴(yán)格按說明（嚴(yán)格按說明書操作）書操作）、血清與細(xì)胞比例、反應(yīng)溫度、弱凝集分析、血清與細(xì)胞比例、反應(yīng)溫度、弱凝集分析優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：第二十六頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)酶介質(zhì)酶介質(zhì)(jizh)凝集試驗(yàn)?zāi)囼?yàn) 原理：原理：紅細(xì)胞表面有豐富的唾液酸，

18、帶有負(fù)電紅細(xì)胞表面有豐富的唾液酸，帶有負(fù)電荷，使紅細(xì)胞相互排斥。荷，使紅細(xì)胞相互排斥。 蛋白水解酶能消化破壞這種唾液酸，減少紅細(xì)蛋白水解酶能消化破壞這種唾液酸，減少紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷以及紅細(xì)胞之間的排斥力，縮短了胞表面的負(fù)電荷以及紅細(xì)胞之間的排斥力，縮短了紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞之間的距離，使IgGIgG分子能與有相應(yīng)抗原分子能與有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞產(chǎn)生的紅細(xì)胞產(chǎn)生(chnshng)(chnshng)凝集。凝集。第二十七頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)酶介質(zhì)凝集酶介質(zhì)凝集(nngj)試驗(yàn)試驗(yàn) 常用的酶：菠蘿酶、木瓜酶、胰酶、無花果常用的酶：菠蘿酶、木瓜酶、胰酶、無花果酶。酶。方法：方法：期法期法

19、- -酶液直接加入血清和細(xì)胞的混合酶液直接加入血清和細(xì)胞的混合物中。物中。 期法期法- -用酶處理細(xì)胞再與血清進(jìn)行反用酶處理細(xì)胞再與血清進(jìn)行反應(yīng)。應(yīng)。兩種方法比較兩種方法比較(bjio)(bjio)：期法期法 操作方便操作方便 期法期法 敏感敏感第二十八頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè) 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)： 成本低，快速。成本低，快速。 缺點(diǎn)缺點(diǎn)：（：（1）破壞某些抗原（如）破壞某些抗原（如MN，Duffy） （2）酶批次不同，活性不同，難以標(biāo)）酶批次不同，活性不同，難以標(biāo) 準(zhǔn)化。準(zhǔn)化。 （3）需確定最適孵育時(shí)間，處理）需確定最適孵育時(shí)間，處理(chl)過度過度 則會(huì)降解則會(huì)降解IgG。 （4）假陽性高。

20、）假陽性高。 應(yīng)用應(yīng)用：現(xiàn)已少用，主要用于：現(xiàn)已少用，主要用于ABO新生兒溶血病新生兒溶血病 檢查，檢查，Rh抗體篩檢?？贵w篩檢。酶介質(zhì)酶介質(zhì)(jizh)法法第二十九頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè) 用于測(cè)定在體外能引起紅細(xì)胞致敏的抗體用于測(cè)定在體外能引起紅細(xì)胞致敏的抗體(kngt)(kngt)。 用不完全抗體測(cè)定紅細(xì)胞血型，如用不完全抗體測(cè)定紅細(xì)胞血型，如RhRh血型。血型。 交叉配血。交叉配血。3抗人球蛋白法抗人球蛋白法：又稱Coombs試驗(yàn)。是最早用于檢查不完全抗體的方法。主要用于檢測(cè)IgG、IgA等抗體參與(cny)的抗原-抗體反應(yīng)，也可測(cè)定補(bǔ)體組分C3、C4片段參與的免疫反應(yīng)第三十頁，

21、共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)第三十一頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)抗球蛋白試劑抗球蛋白試劑(shj)不純不純假陽性假陽性(yngxng)假陰性假陰性(ynxng)(ynxng)紅細(xì)胞洗滌已凝集紅細(xì)胞洗滌已凝集紅細(xì)胞質(zhì)量紅細(xì)胞質(zhì)量不抗凝標(biāo)本不抗凝標(biāo)本漏加試劑漏加試劑離心過度離心過度l紅細(xì)胞、血清及紅細(xì)胞、血清及試劑質(zhì)量試劑質(zhì)量l洗滌不充分洗滌不充分l操作過程不連續(xù)操作過程不連續(xù)l離心過度離心過度l紅細(xì)胞過多或過紅細(xì)胞過多或過少少l血清濃度過大血清濃度過大l孵育時(shí)間和溫度孵育時(shí)間和溫度不當(dāng)不當(dāng)l前帶現(xiàn)象前帶現(xiàn)象間接抗球蛋白試驗(yàn)間接抗球蛋白試驗(yàn)鹽水保存不當(dāng)鹽水保存不當(dāng)紅細(xì)胞直抗陽性紅細(xì)胞直抗陽性第三十

22、二頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè) 優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：經(jīng)典，特異（金標(biāo)準(zhǔn)），可測(cè)補(bǔ)體致：經(jīng)典，特異（金標(biāo)準(zhǔn)），可測(cè)補(bǔ)體致 敏，受冷凝集素影響相對(duì)少。敏，受冷凝集素影響相對(duì)少。 缺點(diǎn)缺點(diǎn)：煩瑣（需兩次三洗），孵育時(shí)間長(zhǎng)，不適用于急：煩瑣（需兩次三洗），孵育時(shí)間長(zhǎng)，不適用于急診和血庫存的大批量工作。且易受殘留血清蛋白影響。診和血庫存的大批量工作。且易受殘留血清蛋白影響。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)：每次試驗(yàn)要設(shè)有陰性和陽性對(duì)照；實(shí)驗(yàn)器每次試驗(yàn)要設(shè)有陰性和陽性對(duì)照；實(shí)驗(yàn)器材清潔；注意抗原抗體比例、孵育時(shí)間、溫度等條件，材清潔；注意抗原抗體比例、孵育時(shí)間、溫度等條件，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)方法操作嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)方法操作(cozu)(

23、cozu)；排除自身抗體干擾；排除自身抗體干擾抗人球蛋白法抗人球蛋白法第三十三頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)低離子低離子(lz)聚凝胺技術(shù)聚凝胺技術(shù)第三十四頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)1 1 紅細(xì)胞間有一定間距紅細(xì)胞間有一定間距2 2 加入加入(jir)(jir)聚凝胺后，聚凝胺后，可以縮短紅細(xì)胞之間可以縮短紅細(xì)胞之間的距離，使其非特異的距離，使其非特異性凝集性凝集3 3 加入枸櫞酸鈉，可以中加入枸櫞酸鈉，可以中和聚凝胺和聚凝胺4 4 紅細(xì)胞的非特異性凝集紅細(xì)胞的非特異性凝集消失消失聚凝胺聚凝胺枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉第三十五頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)1 1 紅細(xì)胞上已有不完全紅細(xì)胞上已有不完全

24、(wnqun)(wnqun)抗體致敏抗體致敏2 2 加入聚凝胺后，縮短紅加入聚凝胺后，縮短紅細(xì)胞之間的距離，讓不細(xì)胞之間的距離，讓不完全完全(wnqun)(wnqun)抗體可以同抗體可以同時(shí)與兩個(gè)紅細(xì)胞結(jié)合使時(shí)與兩個(gè)紅細(xì)胞結(jié)合使其特異性凝集其特異性凝集3 3 加入加入(jir)(jir)枸櫞酸鈉中和枸櫞酸鈉中和聚凝胺聚凝胺4 4 由于不完全抗體的結(jié)合，由于不完全抗體的結(jié)合，紅細(xì)胞的特異性凝集不消紅細(xì)胞的特異性凝集不消失失聚凝胺聚凝胺枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉不完全抗體不完全抗體第三十六頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：快速，方便：快速，方便(fngbin)，適于急診，試劑易保存，適于急診，試劑易保存， 可測(cè)可測(cè)IgG、 IgM。缺點(diǎn)缺點(diǎn)：易受冷凝集素和肝素等多價(jià)陰離子的干擾，且作：易受冷凝集素和肝素等多價(jià)陰離子的干擾，且作效價(jià)測(cè)定時(shí)易造成溶血；不能檢測(cè)補(bǔ)體致敏。效價(jià)測(cè)定時(shí)易造成溶血；不能檢測(cè)補(bǔ)體致敏。對(duì)無對(duì)無唾液酸的紅細(xì)胞無作用（多凝集紅細(xì)胞）。唾液酸的紅細(xì)胞無作用（多凝集紅細(xì)胞）。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)：抗原抗體比例適當(dāng)；：抗原抗體比例適當(dāng)；實(shí)驗(yàn)步驟過程中聚凝實(shí)驗(yàn)步驟過程中聚凝胺應(yīng)去除干凈胺應(yīng)去除干凈。 聚凝胺法聚凝胺法第三十七頁，共四十二頁。紅細(xì)胞血型檢測(cè)微柱凝膠試驗(yàn)微柱凝膠試驗(yàn)(sh