薄層掃描法測(cè)定抗炎靈口服液中連翹苷的含量

1、    薄層掃描法測(cè)定抗炎靈口服液中連翹苷的含量        摘要目的:采用雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定抗炎靈口服液中連翹苷含量。方法:連翹苷測(cè)定波長(zhǎng)S=510 nm,參比波長(zhǎng)R=700 nm;展開劑為:環(huán)己烷-氯仿-苯-甲醇(5353),顯色劑為10%硫酸乙醇液;用反射式鋸齒掃描測(cè)定。結(jié)果:連翹苷的平均回收率為95.2%,RSD為1.2%。結(jié)論:該法分離效果好,簡(jiǎn)便,結(jié)果準(zhǔn)確,適用于該制劑的質(zhì)量控制。關(guān)鍵詞薄層掃描法,連翹苷,口服液 Content determination o

2、f forsythin inKang Yan Ling oral solution by TLC scannerLuo Jian,Li Xinrong,Zou Jinlei (Guangdong College of Pharmacy,Guangzhou 510220)ABSTRACTOBJECTIVE:To determine the content of forsythin is a new preparation of the Red Cross Hospital,Kang Yan Ling oral solution.METHODS:The sample wavelength S=51

3、0 nm.The reference wavelengths R=700 nm.The mobile phase was cyclohexane-chloroform-benzene-methand(5353).The visualizing agent was 10% H2SO4 alcohol solution.RESULTS:The average recovery was 95.2% with RSD 1.2%.CONCLUSIONS:This method was simple,accurate.It is suitable for the quality control of th

4、e preparation.KEY WORDSTLC,forsythin,oral solution抗炎靈口服液是醫(yī)院自制的新制劑,其由連翹、金銀花、黃芩等六味藥材組成,臨床用于清熱解毒、抗菌消炎、抗病毒等癥狀,服用方便,效果良好1。中國(guó)藥典(1995年版)采用高效液相色譜法測(cè)定其它連翹制劑中連翹苷含量2,但至今,該制劑仍未有定性鑒別方法和定量化質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法3。本文采用薄層掃描法測(cè)定抗炎靈口服液中連翹苷含量4.5,方法簡(jiǎn)便結(jié)果準(zhǔn)確,可作為該制劑的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。1儀器與試藥1.1儀器薄層掃描(日本島津CS-910型);定量點(diǎn)樣毛細(xì)管(美國(guó)DUCMMOND公司出品);薄層自動(dòng)鋪板器(PBQ-型,重慶南

5、岸新力電器廠)。1.2試藥硅膠G(青島海洋化工廠,薄層用,1040 m);連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);抗炎靈口服液(廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院);聚酰胺粉(廣州化學(xué)試劑廠,1430目);中性氧化鋁(上海五四化學(xué)試劑廠,層析用100200目);其它所用試劑均為AR級(jí)。2方法與結(jié)果2.1薄層板的制備稱取適量硅膠G,與0.3% CMC-Na溶液以12.2混合,研勻,鋪成0.4 mm厚的薄層板,室溫晾干,105 活化1h,置干燥器中備用。展開劑為環(huán)己烷-氯仿-苯-甲醇(5353);顯色劑為10%硫酸乙醇液。試樣經(jīng)薄層層析,噴顯色劑后,室溫下吹干,置105 烘約57min,至出現(xiàn)明顯紫褐色斑點(diǎn)即可。

6、2.2薄層掃描條件方式:反射法雙波長(zhǎng)鋸齒掃描;測(cè)定波長(zhǎng)S=510 mm,參比波長(zhǎng)R=700 nm;掃描速度:20 mm.min-1;靈敏度x2;譜見1。 1連翹苷譜2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品2.21 mg,用乙醇溶解并定容至2.0 ml,即制成濃度為1.11 mg.ml-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。用定量點(diǎn)樣毛細(xì)管分別吸取連翹苷標(biāo)準(zhǔn)液1,2,4,6,8,12,16 l點(diǎn)于同一硅膠G板上,按上述2.1項(xiàng)及2.2項(xiàng)方法展開,掃描測(cè)定,以斑點(diǎn)峰面積積分值為縱座標(biāo),點(diǎn)樣量為橫座標(biāo),制得一條不通過(guò)原點(diǎn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線,連翹苷在1.1117.76 g之間呈良好線性關(guān)系,回歸方程為Y=0.147 8 X+1.460

7、 3,r=0.991 0。2.4精密度測(cè)試分別吸取連翹苷標(biāo)準(zhǔn)液10 l,點(diǎn)于同一薄層板上,共5點(diǎn),依上述2.1項(xiàng)及2.2項(xiàng)方法展開,掃描測(cè)定,得RSD=1.02%(n=5)。2.5穩(wěn)定性測(cè)試吸取連翹苷標(biāo)準(zhǔn)液10 l,點(diǎn)于薄層板上,按2.1項(xiàng)及2.2項(xiàng)方法展開,顯色,每間隔一定時(shí)間掃描一次,結(jié)果證明在4 h內(nèi)穩(wěn)定,RSD=0.10%(n=12)。2.6樣品含量測(cè)定準(zhǔn)確量取50 ml抗炎靈口服液,用水飽和的正丁醇50 ml提取3次,合并上層液,用50 ml水洗2次,水浴蒸干得殘?jiān)?加少量乙醇溶解,加至聚酰胺(1430目)吸附柱上用約300 ml水洗至無(wú)色,再用約140 ml的85%乙醇洗脫,收集洗

8、脫液,水浴蒸干,殘?jiān)蒙倭?0%乙醇溶解,再加至中性氧化鋁(100200目)柱上,50%乙醇洗脫至無(wú)色,合并洗脫液,水浴蒸干,乙醇溶解并定容至10 ml,制成樣品溶液。用定量點(diǎn)樣毛細(xì)管分別吸取供試品液15 l,標(biāo)準(zhǔn)液1,3 l,點(diǎn)于硅膠G板上,按上述薄層條件展開,顯色,掃描測(cè)定,依據(jù)外標(biāo)二點(diǎn)法公式計(jì)算,得抗炎靈口服液中連翹苷含量,結(jié)果見表1。表 1樣品含量測(cè)定結(jié)果(n=5)編號(hào)含量/g.ml-1sRSD/%123.9323.620.582.46222.71323.96423.65523.862.7回收率試驗(yàn)精密量取抗炎靈口服液50 ml,準(zhǔn)確加入連翹苷標(biāo)準(zhǔn)品5.10 mg,按2.6項(xiàng)方法制備測(cè)

9、定溶液,再按上述條件展開,顯色,掃描測(cè)定,結(jié)果見表2(n=5)。 表 2連翹苷回收率測(cè)定結(jié)果(n=5)編號(hào)樣品原含量加標(biāo)量實(shí)測(cè)值回收率RSDmgmgmg%11.205.106.0695.3095.181.2221.145.106.0496.0831.205.105.9893.7241.185.105.9994.3151.195.106.1196.473討論3.1展開劑和顯色劑實(shí)驗(yàn)曾選用氯仿-甲醇(91)或(201)4作展開劑,但效果均不好,最后改用環(huán)己烷-氯仿-苯-甲醇(5353),分離效果好,斑點(diǎn)清晰。實(shí)驗(yàn)曾用過(guò)5% FeCl3乙醇鹽酸酸化液作顯色劑,但由于底色為黃色,斑點(diǎn)為黑色,對(duì)薄層掃描

10、背景影響大,使得掃描出的峰型不理想,故采用10% H2SO4乙醇液作顯色劑,結(jié)果斑點(diǎn)為紫褐色,背景為白色,掃描效果好,靈敏度高。3.2提取方法本實(shí)驗(yàn)用正丁醇提取,雜質(zhì)少,效率高。用聚酰胺、氧化鋁過(guò)柱,可除去樹膠、鞣質(zhì)、糖類,得較純的成分。但由于提取過(guò)程較復(fù)雜,故連翹苷有所損失,使得提取回收率較低。3.3顯色應(yīng)特別注意顯色均勻度及顯色后105 烘烤時(shí)間的控制,一般約57 min為宜,如烘烤得太久,會(huì)使背景變黑,影響掃描。3.4展開前注意事項(xiàng)展開前應(yīng)飽和層析缸約30 min,預(yù)飽和層析板約10 min,這樣才能減少邊緣效應(yīng),使得展開的斑點(diǎn)圓整,展開劑應(yīng)新鮮配制,這樣可保持展開劑的比例不變。 作者單位：羅健鄒金蕾(廣東藥學(xué)院廣州510224)黎新榮(廣州市紅十字會(huì)醫(yī)院)參考文獻(xiàn)1梁文藻.連翹成分分析連翹甙和連翹甙脂素的分離鑒定和測(cè)定.藥物分析雜志,1985,5(1):582中國(guó)藥典.一部(1995版).廣州:廣東科