實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試課件

1、實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試誘變物質(zhì)的微核測(cè)試誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試要求要求n學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案n學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料學(xué)生自己準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料n學(xué)生自己實(shí)施實(shí)驗(yàn)，結(jié)果觀學(xué)生自己實(shí)施實(shí)驗(yàn)，結(jié)果觀察及分析察及分析實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試程序程序n第一階段：實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)（查閱文獻(xiàn)資料并設(shè)計(jì)詳細(xì)第一階段：實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)（查閱文獻(xiàn)資料并設(shè)計(jì)詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案）。時(shí)間：的實(shí)驗(yàn)方案）。時(shí)間：1-2周。周。n第二階段第二階段：（一組同學(xué)內(nèi)討論）：（一組同學(xué)內(nèi)討論）列出試劑和材料清單，列出試劑和材料清單，與實(shí)驗(yàn)員老師聯(lián)系，準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)

2、（包括實(shí)與實(shí)驗(yàn)員老師聯(lián)系，準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)（包括實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備、實(shí)施和保存）過程中涉及到的的所有材驗(yàn)材料準(zhǔn)備、實(shí)施和保存）過程中涉及到的的所有材料、試劑和儀器和器材。料、試劑和儀器和器材。n第三階段：實(shí)驗(yàn)的實(shí)施。時(shí)間（第二和第三階段共）：第三階段：實(shí)驗(yàn)的實(shí)施。時(shí)間（第二和第三階段共）：3-4周。周。n第四階段：實(shí)驗(yàn)的觀察，當(dāng)堂完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。第四階段：實(shí)驗(yàn)的觀察，當(dāng)堂完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。n第五階段：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告。時(shí)間：第五階段：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告。時(shí)間：1周。周。實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試說明說明n第一階段：以一位學(xué)生為單位。第一階段：以一位學(xué)生為單位。每每3-4位學(xué)生為一組，選用相位學(xué)生為一

3、組，選用相同的題目（同的題目（ 對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響），但每人必須單獨(dú)對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響），但每人必須單獨(dú)完成一份實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)（作為成績材料）完成一份實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)（作為成績材料） ，不得相互拷貝與抄襲。，不得相互拷貝與抄襲。n第二階段第二階段：以一組學(xué)生為單位。一組學(xué)生（：以一組學(xué)生為單位。一組學(xué)生（3-4位學(xué)生）位學(xué)生）內(nèi)討論，內(nèi)討論，列出試劑和材料詳細(xì)清單一份，與實(shí)驗(yàn)員老師列出試劑和材料詳細(xì)清單一份，與實(shí)驗(yàn)員老師聯(lián)系（如實(shí)驗(yàn)老師需留一份，則需學(xué)生寫出相同的兩份，聯(lián)系（如實(shí)驗(yàn)老師需留一份，則需學(xué)生寫出相同的兩份，留一份作為存根，于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后上交給我）留一份作為存根，于實(shí)驗(yàn)結(jié)束后上交

4、給我） ，準(zhǔn)備好實(shí)，準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)（包括實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備、實(shí)施和保存）過程驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)（包括實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備、實(shí)施和保存）過程中涉及到的的所有材料、試劑和儀器和器材。中涉及到的的所有材料、試劑和儀器和器材。n第三階段：第三階段：以一組學(xué)生為單位。以一組學(xué)生為單位。實(shí)驗(yàn)的實(shí)施中一組學(xué)生實(shí)驗(yàn)的實(shí)施中一組學(xué)生相互配合，共同準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料。相互配合，共同準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料。n第四階段：實(shí)驗(yàn)的觀察以一位學(xué)生為單位，上交一份拍第四階段：實(shí)驗(yàn)的觀察以一位學(xué)生為單位，上交一份拍攝圖片，實(shí)驗(yàn)結(jié)果，完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。攝圖片，實(shí)驗(yàn)結(jié)果，完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。n第五階段：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告以一位學(xué)生為單位第五階段：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告以一位學(xué)生為單位

5、。實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試n注：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告與實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)注：實(shí)驗(yàn)總結(jié)報(bào)告與實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)一起將作為考試實(shí)驗(yàn)的筆試材料，一起將作為考試實(shí)驗(yàn)的筆試材料，沒有上述階段中的任一環(huán)節(jié)都將作沒有上述階段中的任一環(huán)節(jié)都將作實(shí)驗(yàn)成績不合格處理。實(shí)驗(yàn)成績不合格處理。實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試主 要 內(nèi) 容n實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理n實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膎實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料n實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)要求實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)要求實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)原理n微核是真核類生物細(xì)胞中微核是真核類生物細(xì)胞中的一種異常結(jié)構(gòu)，往往是的一種異常結(jié)構(gòu)，往往是細(xì)胞經(jīng)輻射或化學(xué)藥物的細(xì)胞經(jīng)輻射或化學(xué)藥物的作用而產(chǎn)生的。在細(xì)

6、胞間作用而產(chǎn)生的。在細(xì)胞間期，微核呈圓形或橢圓形，期，微核呈圓形或橢圓形，游離于主核之外，大小應(yīng)游離于主核之外，大小應(yīng)在主核在主核1/31/3以下。以下。實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試n20世紀(jì)世紀(jì)70年代初期由年代初期由Matter和和Schmid首次建立了一種簡首次建立了一種簡便、快速、評(píng)價(jià)客觀地檢測(cè)來自環(huán)境中的各種理化及生便、快速、評(píng)價(jià)客觀地檢測(cè)來自環(huán)境中的各種理化及生物因子對(duì)機(jī)體產(chǎn)生潛在的遺傳損傷方法，即用哺乳動(dòng)物物因子對(duì)機(jī)體產(chǎn)生潛在的遺傳損傷方法，即用哺乳動(dòng)物骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核出現(xiàn)率的實(shí)驗(yàn)方法，稱為微核試骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核出現(xiàn)率的實(shí)驗(yàn)方法，稱為微核試驗(yàn)（驗(yàn)（micronu

7、cleus test，MNT）。）。當(dāng)染色體受到損傷后，在有絲分裂中、后期細(xì)胞中觀察當(dāng)染色體受到損傷后，在有絲分裂中、后期細(xì)胞中觀察到喪失著絲粒的染色單體或染色體斷片，游離于子細(xì)胞質(zhì)到喪失著絲粒的染色單體或染色體斷片，游離于子細(xì)胞質(zhì)中形成次核。在間期細(xì)胞中，常常見到比普通細(xì)胞核小很中形成次核。在間期細(xì)胞中，常常見到比普通細(xì)胞核小很多的一個(gè)或幾個(gè)圓形結(jié)構(gòu)，其直徑大約相當(dāng)于細(xì)胞直徑的多的一個(gè)或幾個(gè)圓形結(jié)構(gòu)，其直徑大約相當(dāng)于細(xì)胞直徑的1/201/5，故稱微核（，故稱微核（micronucleus，MN）。在骨髓及外）。在骨髓及外周血的有核細(xì)胞中均可見到。周血的有核細(xì)胞中均可見到。實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))

8、誘變物質(zhì)的微核測(cè)試n利用哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞的微核測(cè)試缺點(diǎn)利用哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞的微核測(cè)試缺點(diǎn): :需要需要一定的培養(yǎng)時(shí)間、細(xì)胞同步化困難、微核低，一定的培養(yǎng)時(shí)間、細(xì)胞同步化困難、微核低，一般只有一般只有0.2%0.2%左右。左右。n植物系統(tǒng)則更直接、更簡便。植物系統(tǒng)則更直接、更簡便。 70年代末馬修德用鴨跖草建立了四分孢子期微核率年代末馬修德用鴨跖草建立了四分孢子期微核率計(jì)數(shù)的測(cè)試系統(tǒng)。計(jì)數(shù)的測(cè)試系統(tǒng)。 1983年華中師范大學(xué)生物系建立了蠶豆根尖微核年華中師范大學(xué)生物系建立了蠶豆根尖微核測(cè)試，用于監(jiān)測(cè)水環(huán)境污染，經(jīng)鑒定已列入國家測(cè)試，用于監(jiān)測(cè)水環(huán)境污染，經(jīng)鑒定已列入國家生物生物監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范（水環(huán)境

9、部分）監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范（水環(huán)境部分）實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試電鍍廠污水電鍍廠污水實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試微波微波實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試致變因素：n化學(xué)因素：化學(xué)因素：藥物（環(huán)磷酰胺、氮芥、白硝安、甲氨喋呤、阿糖胞苷等抗癌藥物；農(nóng)藥（有機(jī)磷農(nóng)藥）；工業(yè)毒物（苯、甲苯、鋁、砷、二硫化碳、氯丁二稀、氯乙烯單體等）；食品添加劑（食品的防腐劑、色素等）n物理因素：物理因素：電離輻射。微小劑量的射線能不斷積累。n生物因素：生物因素：生物體產(chǎn)生的生物類毒素；某些生物體（如雜色曲霉等）實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膎理解微核測(cè)定的方法理解微核測(cè)定

10、的方法和意義和意義。n檢測(cè)和了解環(huán)境中對(duì)檢測(cè)和了解環(huán)境中對(duì)生物體不利的因素生物體不利的因素實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)材料n蠶豆根尖蠶豆根尖（由蠶豆制備（由蠶豆制備根尖）根尖）實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)方案內(nèi)容實(shí)驗(yàn)方案內(nèi)容1、題目：、題目：對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響對(duì)蠶豆根尖細(xì)胞微核的影響2、前言、前言（即：（即：對(duì)環(huán)境和生物體有什么危害，為什么能用微核的產(chǎn)生對(duì)環(huán)境和生物體有什么危害，為什么能用微核的產(chǎn)生來說明來說明對(duì)生物的不利影響，別人有無做過同類實(shí)驗(yàn)研究，如別人做對(duì)生物的不利影響，別人有無做過同類實(shí)驗(yàn)研究，如別人做過，有什么結(jié)論，你為什么還做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，如果別人沒

11、有做過，你做的時(shí)過，有什么結(jié)論，你為什么還做這個(gè)實(shí)驗(yàn)，如果別人沒有做過，你做的時(shí)候需要注意哪些。寫此部分的時(shí)候要查一些資料）候需要注意哪些。寫此部分的時(shí)候要查一些資料）3、實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)材料：受體材料：為蠶豆，其它的藥物或其它，儀器材料（如計(jì)數(shù)器等）受體材料：為蠶豆，其它的藥物或其它，儀器材料（如計(jì)數(shù)器等）4、方案設(shè)計(jì)（要詳細(xì)與具體）、方案設(shè)計(jì)（要詳細(xì)與具體）：對(duì)照組：（用自來水處理）對(duì)照組：（用自來水處理）處理組（幾種處理：劑量、時(shí)間）處理組（幾種處理：劑量、時(shí)間）具體的實(shí)驗(yàn)步驟具體的實(shí)驗(yàn)步驟5、數(shù)據(jù)處理方法、數(shù)據(jù)處理方法：設(shè)計(jì)表格設(shè)計(jì)表格統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)（細(xì)胞數(shù)、微核數(shù)），統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)（細(xì)胞數(shù)、微核數(shù)），計(jì)算微核千分率計(jì)算微核千分率實(shí)驗(yàn)十二(方案設(shè)計(jì))誘變物質(zhì)的微核測(cè)試實(shí)驗(yàn)方案撰寫要求實(shí)驗(yàn)方案撰寫要求1、要有題目，作者（包括班級(jí)和學(xué)號(hào)）。、要有題目，作者（包括班級(jí)和學(xué)號(hào)）。2、格式：、格式：標(biāo)題用三號(hào)，黑體，居中；標(biāo)題用三號(hào)，黑體，居中；作者、班級(jí)和學(xué)號(hào)（位作者、班級(jí)和學(xué)號(hào)（位于標(biāo)題下一行）用小四號(hào)，宋體，居中；于標(biāo)題下一行）用小四號(hào)，宋體，居中；正文一級(jí)標(biāo)題用小正文一級(jí)標(biāo)題用小四號(hào)，宋體，加粗；四號(hào)，宋體，加粗；正文（包括參考文獻(xiàn)）用五號(hào)，宋體；正文（包括參考文獻(xiàn)）用五號(hào)，宋體；正文左右頁邊距寬為正文左右頁邊距寬為2.54cm ；3、參考文獻(xiàn)至少、參考文獻(xiàn)至少5篇（可以是網(wǎng)