原料藥分析方法開發(fā)流程

1、原料藥分析方法開發(fā)流程分析方法在藥物的研發(fā)過程中起到的是燈塔”的作用，是原料藥及制劑開發(fā)、質(zhì)量控制的標(biāo)尺及眼睛，因此分析方法在藥物開發(fā)過程中起到了領(lǐng)航員的作用。下面簡單的介紹一下原料藥分析方法的開發(fā)流程。 原料藥的分析方法開發(fā)一般分為兩大部分：1 1、起始物料的分析方法開發(fā)；2 2、中間體及 APIAPI的分析方法開發(fā)。按照正常的邏輯順序，應(yīng)該是起始物料的分析方法開發(fā)先行，但是一般在實(shí)際操作過程中，往往是中間體及APIAPI 的分析方法先行開發(fā)。主要是因?yàn)?，在打通工藝路線時期或者是文獻(xiàn)調(diào)研的階段，主要是針對中間體及APIAPI 的分析方法的工作。只有在工藝優(yōu)化的中期或者中后期，對起始物料廠家基

2、本選定時才會有針對性的啟動起始物料的分析方 法開發(fā)工作。雖然如此，考慮到邏輯順序，還是按照起始物料、中間體、APIAPI 這樣的順序進(jìn)行逐一介紹。 一、起始物料1 1、 合成路線的獲取在啟動分析方法開發(fā)工作之前，一定要獲得起始物料廠家提供的合成路線，需要包括以下幾點(diǎn)：起始物料、中間體、反應(yīng)溶劑、后處理溶劑及關(guān)鍵催化劑等。如果廠家提供反應(yīng)步 驟過長，一般選擇 3-53-5 步即可。2 2、 雜質(zhì)分析結(jié)合起始物料廠家提供的工藝路線，對可能存在或者產(chǎn)生的各種雜質(zhì)進(jìn)行詳細(xì)的分析，為分析方法開發(fā)的方向奠定一個基礎(chǔ)， 也好對所需要的儀器耗材有提前的準(zhǔn)備。一般涉及雜質(zhì)如下：雜質(zhì)種類雜質(zhì)主要來源一般檢測手段一

3、般所需耗材普通雜質(zhì)起始物料、中間體、副產(chǎn)物、 降解產(chǎn)物HPLCHPLC普通 C18C18 柱、氨基 柱手性雜質(zhì)含手性中心的化合物、引入 手性的反應(yīng)HPLCHPLC、旋光儀手性柱GTIGTI起始物料、中間體、副產(chǎn)物HPLCHPLC、LC-MSLC-MS、GC-MSGC-MS普通 C18C18 柱、毛細(xì)管柱重金屬催化劑原子吸收、ICP-MSICP-MS、藥典通 用方法空心陰極燈、鉛標(biāo) 準(zhǔn)溶液溶劑殘留反應(yīng)溶劑、后處理溶劑、副產(chǎn)物GCGC細(xì)管柱無機(jī)鹽縛酸劑、干燥劑、調(diào)節(jié)pHpH的試劑比濁法、熾灼殘?jiān)?、比色法相?yīng)的分析溶劑3 3、分析方法的開發(fā)起始物料路線中所涉及的雜質(zhì)種類，進(jìn)行對應(yīng)分析方法的開發(fā)。以廠

4、家COACOA 及提供的分析方法為基礎(chǔ)，結(jié)合自身工藝對起始物料質(zhì)量的要求，建立適合自己的起始物料內(nèi)控方法。4 4、分析方法的驗(yàn)證在 APIAPI 工藝進(jìn)行逐級放大前，取得起始物料供應(yīng)商提供的不小于3 3 批的中試生產(chǎn)批量樣品，使用一批次進(jìn)行分析方法驗(yàn)證工作， 其余批次進(jìn)行分析方法重現(xiàn)工作， 同時也是為了 驗(yàn)證廠家提供起始物料質(zhì)量的穩(wěn)定和可控。5 5、雜質(zhì)限度制定的依據(jù)根據(jù)多批次起始物料的檢測結(jié)果，以及 APIAPI 雜質(zhì)限度的要求，結(jié)合工藝路線對雜質(zhì)的清除能力，制定起始物料中雜質(zhì)的限度。需重點(diǎn)關(guān)注基因毒性雜質(zhì)及毒性較大的試劑溶劑。物料名稱制定依據(jù)起始物料1 1、結(jié)合自身工藝對雜質(zhì)的清除效率；2

5、 2、結(jié)合自身工藝所涉及溶劑；3 3、相關(guān)起始物料所涉及 GTIGTI 及手性雜質(zhì)的引入；中間體1 1、結(jié)合自身工藝對雜質(zhì)的清除效率2 2、結(jié)合之后反應(yīng)對水分及溶劑殘留的要求3 3、GTIGTI 及手性雜質(zhì)的引入4 4、APIAPI 中關(guān)鍵雜質(zhì)的要求APIAPI1 1、結(jié)合反應(yīng)體系中較大雜質(zhì)和清除率較低的雜質(zhì)情況2 2、結(jié)合指導(dǎo)原則要求3 3、結(jié)合所涉及溶劑及催化劑的情況二、中間體中間體分為過程控制及質(zhì)量控制，過程控制主要監(jiān)控反應(yīng)進(jìn)行的程度，質(zhì)量控制是制定中間體的中控標(biāo)準(zhǔn)。1 1、過程控制方法1 1）過程控制方法的開發(fā)根究反應(yīng)液的具體情況以及涉及物料自身的性質(zhì)，中間體的過程控制方法可以選擇 T

6、LCTLC或者 HPLCHPLC 的手段進(jìn)行控制。一般在反應(yīng)過程中主要關(guān)心的是原料的剩余及產(chǎn)物的生成情況，所以確保在原料及產(chǎn)物峰周圍沒有干擾。如果有需要特殊關(guān)注的雜質(zhì)，也需確保雜質(zhì)的分離度、峰純度等。2 2）過程控制方法的驗(yàn)證如果過程控制的方法只是定性的檢測，在方法驗(yàn)證時一般只需進(jìn)行：專屬性、檢測限、 耐用性等方面的驗(yàn)證工作。 如果涉及定量檢測的方法， 則需要進(jìn)行全面的分析方法驗(yàn)證工作。2 2、質(zhì)量控制方法1 1） 質(zhì)量控制方法的開發(fā)對中間體的質(zhì)量控制， 一方面根據(jù)工藝優(yōu)化的結(jié)果制定質(zhì)量控制的限度，另一方面需要根據(jù) APIAPI 質(zhì)量的要求對中間體所涉及雜質(zhì)的限度進(jìn)行定量的控制。當(dāng)然，質(zhì)量控制

7、方面不 只是雜質(zhì)限度的控制， 如果接下來的反應(yīng)是無水反應(yīng)，上一步的中間體依然需要對水分的限度進(jìn)行嚴(yán)格的控制。中間體的制備過程中，也會涉及 GTIGTI、手性雜質(zhì)及重金屬等雜質(zhì)的研究。一般情況，此 類雜質(zhì)最好放在中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行， 如果控制有難度或者在之后的反應(yīng)過程中仍然會 又引入及生成，放在之后的步驟控制或者 APIAPI 控制均可。2 2） 質(zhì)量控制方法的驗(yàn)證一般情況下，中間體的質(zhì)量控制均會涉及雜質(zhì)的定量檢測，因此中間體質(zhì)控方法的驗(yàn)證均需要按照定量檢測的方法進(jìn)行全面的分析方法驗(yàn)證工作。三、API同起始物料分析方法開發(fā)基本一致，在APIAPI 分析方法的開發(fā)前期，首先需要進(jìn)行有關(guān)化合物或

8、者相似化合物分析方法的調(diào)研工作，其次進(jìn)行雜質(zhì)的分析工作。 針對不同類型的雜質(zhì)選擇有針對性的文獻(xiàn)報道的方法為方法開發(fā)的基礎(chǔ)，結(jié)合工藝本身，對分析方法進(jìn)行逐步的優(yōu)化。有關(guān)物質(zhì)的制定，可以根據(jù)靠近終反應(yīng)步驟的雜質(zhì)譜以及最后一步反應(yīng)的雜質(zhì)體系 進(jìn)行制定。溶劑殘留的制定需要結(jié)合起始物料所涉及的溶劑，如果有與起始物料有差異的溶劑，那么差異溶劑需要在起始物料中進(jìn)行控制；若能包含起始物料所涉及溶劑，可以將所用溶劑在終產(chǎn)品中進(jìn)行控制， 起始物料中只需進(jìn)行干燥失重的檢測。同時，還需要關(guān)注一些潛在的溶劑，例如：反應(yīng)中涉及苯的衍生物，也需要關(guān)注苯的殘留控制等。3 3、分析方法的開發(fā)根據(jù)不同的雜質(zhì)種類，APIAPI 的

9、分析方法涉及到普通雜質(zhì)、手性雜質(zhì)、殘留溶劑、基因毒 性雜質(zhì)、重金屬等。普通雜質(zhì)：一般采用 HPLCHPLC 法，在進(jìn)行分析方法開發(fā)之前，首先要進(jìn)行充分的文獻(xiàn)調(diào)研工作，查詢各國藥典標(biāo)準(zhǔn)、文獻(xiàn)、專利中是否收載了相同或同類化合物，以此為基礎(chǔ)進(jìn)行分析方法的開發(fā)，結(jié)合 APIAPI 的理化性質(zhì)以及對各步反應(yīng)機(jī)理的分析，進(jìn)行分析方法的逐步 優(yōu)化。在分析方法優(yōu)化過程中，應(yīng)同時對APIAPI 進(jìn)行強(qiáng)制降解實(shí)驗(yàn)，評估分析方法對潛在降解產(chǎn)物的分離能力。手性雜質(zhì)：采用 HPLCHPLC 法，選用手性色譜柱或手性流動相。對有多個手性中心的，對 映異構(gòu)體需采用手性色譜進(jìn)行分析，非對映異構(gòu)體，一般可與普通雜質(zhì)采用同一方法進(jìn)行控制。殘留溶劑：殘留溶劑采用 GCGC 法，根據(jù)溶劑的種類，選擇不同極性的色譜柱進(jìn)行分離。除要關(guān)注合成工藝中使用的溶劑外，還需要關(guān)注潛在的殘留溶劑，如使用了甲苯，需要對苯進(jìn)行檢測與控制，使用了甲基叔丁基酰， 需要關(guān)注叔丁醇的殘留， 酯鍵斷裂過程中產(chǎn)生的醇 類等?；蚨拘噪s質(zhì)：由于基因毒性雜質(zhì)的限度較低，對方法的靈敏度要求較高，一般要用到HPLC-MSHPLC-MS 或 GC-MSGC-MS , ,在分析方法開發(fā)中，需重點(diǎn)關(guān)注檢測限是否能滿足質(zhì)量控制的要求。重金屬：對于一般的重金屬，采用藥典通則的檢測方法即可，對于 pdpd 等重金屬需要特 殊研究。4 4