腫瘤生物治療-------戰(zhàn)勝癌癥的希望

1、腫瘤生物治療-戰(zhàn)勝癌癥的希望劉華 復旦大學附屬中山醫(yī)院腫瘤生物治療研究室主任，客座教授惡性腫瘤的危害盡管我國和許多發(fā)達國家花費巨額資金和大量人力進行研究攻克癌癥，但至今尚未取得根本性的進展，總體療效很不理想，許多癌癥患者的長期生存率仍然很低。據(jù)美國癌癥學會（American Cancer Society）分析，2007年全世界約有腫瘤患者 1200萬，其中760萬人死亡，每天達 2 萬人。而在2050年全世界將有腫瘤病人2700 萬，其中有1700 萬患者死亡。過去的三十年中，我國的癌癥發(fā)病率增加了80%。每年有260萬人被診斷為癌癥，同時有180萬病人死于惡性腫瘤。近幾年來，惡行腫瘤發(fā)病率在

2、中國呈明顯上升和年輕化的趨勢，嚴重威脅人民的生命和健康。惡性腫瘤治療十分困難的主要原因為是只有少數(shù)患者能夠在早期被發(fā)現(xiàn)，接受手術根治性治療。而大多數(shù)惡性腫瘤病人在診斷時已屬于中晚期，喪失了手術機會或手術不能全部切除，或手術后仍有殘留的腫瘤細胞。這些病人常選擇采用化療和放療。數(shù)十年的經(jīng)驗證明，化療和放療是行之有效的治療方法，但也有一些不足之處?；熀头暖煹耐ú∈牵旱谝唬熜Р粔蚶硐?，例如不能殺滅腫瘤干細胞。第二，容易產(chǎn)生耐藥性，以致腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移。第三，毒副作用嚴重，極大地影響了腫瘤患者的生活質(zhì)量。第四，損傷患者的免疫功能，放化療常導致腫瘤患者機體免疫力明顯降低，不利于腫瘤的控制。較新的靶向治療

3、藥物雖能減輕一些副作用，但同樣有療效不夠理想和不持久，容易產(chǎn)生耐藥性等缺點，而且治療費用昂貴。因此，臨床上迫切需要有一種療效確切，對防止腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移有很好的作用，不容易產(chǎn)生耐藥性，安全可靠，毒副作用輕微，同時能提高腫瘤患者自身的抗腫瘤的免疫功能的新型治療方法。什么是腫瘤生物治療腫瘤生物治療是以現(xiàn)代免疫學，細胞生物學和分子生物學等前沿學科為基礎，利用機體對腫瘤的細胞和體液免疫應答，通過生物手段或使用生物制劑來提供主動或被動免疫以期激活機體對腫瘤的主動免疫排斥反應，進而達到殺滅腫瘤細胞和根治腫瘤的比較理想的新療法。對控制免疫系統(tǒng)的細胞和分子調(diào)控機制的深入了解為我們提供了尋找更多的新型且前途廣闊的

4、癌癥免疫新療法的有利條件。免疫療法已成為多種癌癥的標準治療方法。例如：單克隆抗體、免疫佐劑以及致癌病毒疫苗已經(jīng)成為行之有效的抗腫瘤療法。美國國家食品與藥品管理局于2010年4月29日正式批準了腫瘤生物治療藥物 Provenge 的臨床應用。Provenge 是美國西雅圖的一家公司 (Dendreon Corp.) 的產(chǎn)品。臨床應用于前列腺癌患者的治療。2011年3月25日，美國國家食品與藥品管理局又批準了Yervoy作為治療晚期惡性黑色素瘤的藥物。這一藥物可以阻礙CTLA-4分子，增強機體免疫系統(tǒng)抗腫瘤的功能。腫瘤生物治療本質(zhì)上屬于一種生理性治療措施，這些以細胞和免疫為基礎的治療方法是通過和化

5、療或放療治療不同的作用機理，代表了一個非交叉性的耐藥性，而且其毒性也與化療和放療完全不同。其抗腫瘤的特異性和免疫記憶是其它方法所不能比擬的。由于生物治療具有安全性好、毒副作用低、可反復多次使用，是一種治療惡性腫瘤的人性化的治療方法。在防止腫瘤的復發(fā)和轉(zhuǎn)移方面，生物治療的地位更為重要。腫瘤生物治療的基本假設是，在適當?shù)臈l件下，惡性細胞是能夠被人體的免疫系統(tǒng)識別和攻擊的。在過去的50年中，人們主要采用了二種不同的方法來激發(fā)機體的抗腫瘤免疫反應。第一種方法是主動性免疫治療。主動免疫治療的目的是恢復和增強宿主受損的抗腫瘤的免疫反應，包括使用腫瘤疫苗，細胞因子和共刺激因子。另一種方法是被動性免疫治療。被

6、動免疫包括轉(zhuǎn)輸經(jīng)體外培養(yǎng)的免疫效應細胞（稱為過繼性免疫治療）或應用具有抗腫瘤活性的抗體。惡性腫瘤細胞至少具有六個特點：1，具有足夠的自我生長信號。2，對生長抑制信號具有耐受性。3，對細胞凋亡有耐受性。4，具有無限制生長能力。 5，持續(xù)的血管生成能力。 6，有細胞轉(zhuǎn)移的能力。與這些腫瘤細胞特征有關的蛋白質(zhì)組分代表了對治療干預的理想的靶點。具有重要意義的是，這些靶點是所有威脅生命的惡性腫瘤細胞共同的本質(zhì)上的特征。因此基于這些特征的分子靶點治療可用于絕大多數(shù)腫瘤，甚至是全部腫瘤的治療。已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)的與這些腫瘤特征有關的幾個蛋白質(zhì)歸納如下：1，與細胞分裂有關的蛋白質(zhì) (端粒酶, Cyp1B1 和 sur

7、vivin)。2，與細胞凋亡有關的蛋白質(zhì)(survivin, ML-IAP, Bcl-2, Bcl-X(L), 和 Mcl-1)。3，與細胞轉(zhuǎn)移有關的蛋白質(zhì) (Heparanase)。4，與血管生存有關的蛋白質(zhì)(survivin, Bcl-2 和 VEGFR)。5，與藥物耐受有關的蛋白質(zhì) （細胞色素 P450 CYP 1B1和P-glycoprotein）。這些蛋白質(zhì)都是潛在的腫瘤抗原。已有研究表明，在卵巢癌和直腸結(jié)腸癌等多種癌癥患者中，免疫細胞在腫瘤中的浸潤程度是一個很好的判斷預后的生物學指標。研究癌癥患者其腫瘤伴隨的免疫細胞浸潤和預后的關系也表明，在腫瘤病灶中有大量免疫細胞浸潤的患者（尤其

8、是活化的CD8+T細胞），治療后的復發(fā)和轉(zhuǎn)移明顯減少。以過繼性免疫效應細胞和其它生物技術為基礎的治療方法已被廣泛用于在不同的臨床和實驗室條件下治療各種惡性腫瘤并取得了良好的療效。回輸?shù)拿庖咝毎梢灾鲃拥刈R別和消滅腫瘤細胞，然后以記憶細胞的形式在體內(nèi)長期生存，監(jiān)視和清除體內(nèi)腫瘤細胞的復發(fā)和轉(zhuǎn)移。腫瘤生物治療具有以下的優(yōu)點：n 選擇性高，可以區(qū)分自體和非己的組織和細胞n 毒副作用輕，例如可用自體的淋巴細胞。n 對腫瘤細胞的殺傷作用徹底，包括可消滅腫瘤干細胞n 作用多樣性，例如特異性和非特異性免疫、細胞和體液免疫等n 有記憶性（記憶和中央記憶效應細胞）n 通過細胞因子的作用放大治療效果n 細胞毒

9、T淋巴細胞和巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷具有自我限制性n 不容易產(chǎn)生耐藥性 （Antigen Spreading）生物治療作為繼手術、放療和化療后治療腫瘤的第四模式，是目前腫瘤綜合治療模式中最活躍、最有前途的手段，也是今后癌癥治療的一個主要方向。生物治療有望達到完全消滅根治癌細胞的目的，并將逐漸取代其他方式成為未來癌癥治療的主要方向。目前用于抗腫瘤治療的免疫細胞有以下一些種類：1. LAK細胞1982年Grimm等首先報道外周血單個核細胞（PBMC）中加入IL-2體外培養(yǎng)4-6天，能誘導出一種非特異性的殺傷細胞，這類細胞可以殺傷多種對CTL、NK不敏感的腫瘤細胞。目前尚未發(fā)現(xiàn)LAK細胞特有的表面標

10、志，許多實驗表明，LAK細胞的前體細胞是NK細胞和T細胞。1984年11月Rosenberg研究組經(jīng)美國食品和藥品檢驗局（US Food and Drug Administration,FDA）批準下，首次應用IL-2與LAK協(xié)同治療25例腎細胞癌、黑素瘤、肺癌、結(jié)腸癌等腫瘤患者。治療用LAK細胞數(shù)量在0.6-18.4×1010，IL-2用量2.8×105-3.32×106U/kg。其中11例腫瘤縮小超過50%，1例黑素瘤完全消退。1988年該研究組總結(jié)了IL-2與LAK細胞協(xié)同治療222例腫瘤患者，其中16便患者腫瘤轉(zhuǎn)移灶完全消退，26例患者腫瘤消退50%以上，

11、該療法對轉(zhuǎn)移性腎細胞癌、黑素瘤、結(jié)腸癌和非何杰金氏淋巴瘤患者的療效較顯著。有報道乳腺癌、膀胱癌局部應用IL-2進行治療也獲得明顯療效。由于IL-2用量大，在治療過程中可出現(xiàn)毒副反應，最常見和最嚴重的毒副作用是出現(xiàn)毛細血管滲漏綜合征（Capillary Leak Syndrome, CLS）。2. TIL細胞1986年Rosenberg研究組又首先報道了腫瘤浸潤淋巴細胞 （Tumor Infiltrating Lymphocyte, TIL）。用機械處理和酶消化方法，從腫瘤局部分離出腫瘤浸潤的淋巴細胞，加入高劑量IL-2體外培養(yǎng)，殘存的腫瘤細胞7-13天全部死亡，擴增的淋巴細胞可供治療。TIL細

12、胞表型具有異質(zhì)性，絕大多數(shù)為CD3陽性。不同腫瘤來源的TIL細胞中，CD4+T細胞、CD8+T細胞的比例有差異，大多數(shù)情況下以CD8+T細胞為主。新鮮分離的TIL中CD25+細胞百分率較低，隨著體外加IL-2培養(yǎng)時間的延長，CD25+細胞百分率逐漸升高。NK細胞的標記（CD16，CD56）在TIL體外加IL-2培養(yǎng)過程中有先增高后降低的趨勢。經(jīng)IL-2活化的TIL與來自PBMC的LAK細胞比較，其特點是：（1）在治療中可以減少效應細胞和IL-2的用量，而且對LAK治療無效的晚期腫瘤仍有一定治療效果；（2）主要由CD8陽性細胞誘導而來，在動物實驗中發(fā)現(xiàn)TIL殺傷腫瘤作用具有特異性；（3）宿主的抑

13、制狀態(tài)有利于TIL的殺傷作用，因此治療時加用環(huán)磷酰胺（Cy）100mg/kg可明顯提高療效，可能與免疫抑制藥能消除抑制性細胞或因子，增強過繼免疫治療作用有關，因而可減少IL-2的用量，降低毒副反應；（4）可從手術切下腫瘤組織、腫瘤引流淋巴結(jié)、癌性胸腹水中獲得淋巴細胞，經(jīng)加IL-2培養(yǎng)后，其生長、擴增能力強于LAK細胞。已有報道應用TIL治療14例轉(zhuǎn)移性肺癌等晚期腫患者，其中4例腫瘤縮小50%以上，副作用明顯低于IL-2/LAK療法。3. CIK細胞1991年美國斯坦福大學醫(yī)學院骨髓移植研究中心報道了具有高增殖能力和高細胞毒性的細胞因子活化殺傷細胞（CIK，Ccytokine-Induced K

14、iller）細胞，受到了人們的高度重視和很大的興趣。 Wolf等人研究發(fā)現(xiàn)CIK細胞15天的培養(yǎng)細胞擴增倍數(shù)為754倍，而LAK細胞僅增長19倍。30天的培養(yǎng)CIK細胞可增長1000倍以上。在體外實驗中，比較CIK細胞和LAK細胞的殺傷活性發(fā)現(xiàn)，CIK細胞在第10-28天時，可殺傷2.5-3.5個對數(shù)級的腫瘤細胞，而LAK細胞僅能殺傷0.5-1.5個對數(shù)級的腫瘤細胞。CIK細胞對多藥耐藥的腫瘤細胞系同樣有殺傷作用和高的敏感性。在動物體內(nèi)實驗重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）鼠/人淋巴瘤模型的CIK細胞體內(nèi)抗腫瘤研究中，SCID鼠未注入CIK細胞和注入LAK細胞組的小鼠在40天內(nèi)全部死去，而注入CIK

15、細胞和淋巴瘤細胞株組80%以上的小鼠在100天也未見長腫瘤。美國斯坦福大學醫(yī)學院骨髓移植研究中心（Verneris）進行了I和II期臨床試驗，并取得了有意義的結(jié)果。1998年斯坦福大學醫(yī)學院和Becton Dickinson公司BDIS免疫中心，在臨床試驗中，檢測到病人的激活的CIK細胞能分泌多種細胞因子，如IL-2、IFN-r、TNF-a等。在2000年斯坦福大學醫(yī)學院又報道了惡性腫瘤表達的Fas配體（FasL）誘導效應細胞凋亡對細胞免疫治療影響的臨床研究，CIK細胞能克服該影響。在1999年，德國洪堡大學醫(yī)學院也進行了應用IL-2基因轉(zhuǎn)染的自體CIK細胞在患有腎癌、黑色素瘤和淋巴瘤轉(zhuǎn)移病人

16、的I期臨床試驗，取得了較好的臨床結(jié)果，IL-2基因轉(zhuǎn)染的自體CIK細胞進入體內(nèi)后，在2周后，用PCR檢測法仍能在外周血中檢測到IL-2基因轉(zhuǎn)染的自體CIK細胞的存在，在取得初步的結(jié)果的基礎上，將作進一步的臨床試驗。4. 樹突狀（DC）細胞 1973年Steiman和Cohn首次從脾臟中分離出樹突狀細胞 (Dendritic Cells，DCs)。 它是機體功能最強的專職抗原遞呈細胞(Antigen Presenting Cells, APC)，它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原。未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞，處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié)。DC與腫瘤的

17、發(fā)生、發(fā)展有著密切關系，大部分實體瘤內(nèi)浸潤的DC數(shù)量多則患者預后好。有效的抗腫瘤免疫反應的核心是產(chǎn)生以CD8+ T細胞為主體的細胞免疫應答，這也是DC作為免疫治療手段的基礎。最新研究顯示DC細胞與CIK細胞共培養(yǎng)后,提高了細胞的增殖速度和殺傷活性,且使其對腫瘤細胞的殺傷作用更具特異性。而且DCCIK細胞對于血液、消化、呼吸、泌尿及生殖系統(tǒng)等多個系統(tǒng)腫瘤細胞均有殺傷作用。Steiman也因他在“樹狀細胞及其在適應性免疫系統(tǒng)方面作用的發(fā)現(xiàn)”取得的成就，與Hoffmann、Beutler共同獲得了2011年的諾貝爾生理學或醫(yī)學獎。值得一提的是，Steiman 2006年就查出胰腺癌晚期。在醫(yī)學上，晚

18、期胰腺癌的惡化程度高，生存期不會超過6個月。然而，Steiman教授正是應用了自己的研究成果，使用DC細胞療法，成功地將生命延長了四年。5. 細胞毒T淋巴細胞1996年，美國西雅圖生技公司曾經(jīng)開發(fā)出了T細胞治療方法，希望通過加快淋巴細胞恢復來提高腫瘤的治療效果。為此Xcyte公司獲得了該T細胞治療方法的專利技術。但是由于該產(chǎn)品的抗腫瘤特異性效果不理想，導致腫瘤的殺傷效果不強，該公司已在2005年宣告解體。針對人類的惡性腫瘤一般具有抗原性弱、不容易為免疫細胞所識別；目前臨床所用的具有免疫活性的致敏淋巴細胞的治療方法都有難以獲得足夠數(shù)量的具有高度特異性抗腫瘤生物學效應的淋巴細胞；以及普遍存在的腫瘤

19、疫苗的特異性效應不強，臨床效果不確切這三大缺點，我們首創(chuàng)了一種獨特的方法來制備具有強大和多種抗腫瘤生物學效應的免疫效應細胞。我們所提出的新概念和新方法主要是改善腫瘤細胞的抗原性，提高免疫細胞的致敏性并促進其分化和增生，以及增強致敏免疫細胞的生物學效應。較好地克服了各種目前常用的免疫治療方法的不足之處。2006年，我們在創(chuàng)建體外三維腫瘤生物模型和利用其觀察細胞免疫治療方法的基礎上，提出了一個制備新一代抗腫瘤免疫細胞的新概念和新方法。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在三維模型中將免疫細胞與滅活的腫瘤細胞共同培養(yǎng)可以誘導免疫細胞對腫瘤細胞的顯著殺傷作用，同時伴有免疫細胞的顯著增生。這提示三維腫瘤模型不僅有利于模擬體

20、內(nèi)腫瘤生長方式，更為重要的是，其所形成的微環(huán)境有利于免疫細胞的增生和效應發(fā)揮，最終消滅腫瘤。與目前所采用的其他方法比較，腫瘤細胞在三維培養(yǎng)狀態(tài)下較全面地體現(xiàn)了體內(nèi)實體腫瘤所具有的生物學特性和基因表達，較好地表達了腫瘤細胞的抗原性。因此，三維腫瘤生物模型可增加腫瘤抗原的數(shù)量和提高抗原的質(zhì)量，提供一個與體內(nèi)實體腫瘤類似的抗原的來源。同時，三維環(huán)境也為免疫效應細胞充分發(fā)揮功能提供了一個理想的場所。通過類似于體內(nèi)細胞免疫的三維環(huán)境，免疫細胞可以有效地識別和采集抗原，充分調(diào)動以T細胞對靶細胞的特異性識別為前提的各種免疫細胞協(xié)調(diào)的抗腫瘤免疫應答。體外三維環(huán)境不僅可供腫瘤細胞充分表達具有異質(zhì)性的腫瘤抗原，也

21、提供了激活抗原所需的共刺激因子和細胞因子的環(huán)境，同時還有助于克服體內(nèi)可能的不利環(huán)境。通過剔除一些不相關的和可能抑制細胞免疫反應的物質(zhì)，消除對免疫細胞的負面調(diào)節(jié)作用，有利于更好地制備抗腫瘤的免疫效應細胞。細胞毒T淋巴細胞是一類可殺傷表達特異性抗原靶細胞的T細胞亞群。細胞毒T淋巴細胞是抗細胞內(nèi)感染、急性同種異型移植物排斥反應和殺傷腫瘤的主要效應細胞。研究人員發(fā)現(xiàn)，機體內(nèi)抵御病毒和腫瘤的細胞有 “立刻保護” 和 “長期保護”的分工：一類帶有 “戰(zhàn)士” 分子標記，能直接殺滅腫瘤細胞或病毒；另一類則顯示 “記憶細胞” 的特征，能潛伏多年以防未來的腫瘤復發(fā)或病毒再次入侵。我們所獲得的免疫細胞在早期幾天內(nèi)就

22、具有免疫學活性，表現(xiàn)為免疫細胞對腫瘤細胞抗原的采集和傳遞、阻止腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移、以及直接殺傷和裂解腫瘤細胞等多種多樣的生物學效應。例如我們可以觀查到大量致敏淋巴細胞黏附和覆蓋于腫瘤細胞的表面或者其邊緣，阻止腫瘤細胞的生長；或在腫瘤邊緣監(jiān)視腫瘤細胞的運動；或是形成一道由淋巴細胞組成的屏障阻止腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。如發(fā)生腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移時，免疫效應細胞會對這些轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞進行攻擊以殺滅這些轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞。對腫瘤細胞進行殺滅的整個過程表現(xiàn)為免疫效應細胞對腫瘤細胞進行穿孔、然后腫瘤細胞的胞漿從穿孔處流出、接著其他淋巴細胞對腫瘤細胞以接觸的形式進行攻擊、對部份細胞膜進行剝離、最后由致敏活化的巨噬細胞吞噬整個腫瘤

23、細胞。亦可觀察到致敏的小淋巴細胞和肝癌細胞進行接觸后，腫瘤細胞在數(shù)分鐘內(nèi)就被完全溶解。巨噬細胞對于腫瘤細胞的殺傷作用和過程表現(xiàn)為巨噬細胞首先和腫瘤細胞發(fā)生接觸，通過一定時間，推測是觸發(fā)應答，啟動興奮和激活階段，最終將腫瘤細胞吞噬消滅。在體外我們還觀察到實體腫瘤被致敏的免疫效應細胞攻擊，最終明顯縮小和消失的過程。CD8 T細胞治療的優(yōu)點：n 能特異性的識別腫瘤細胞n 與腫瘤細胞可發(fā)生緊密的接觸和黏附從而產(chǎn)生相應的生物學效應n 通過多種途徑殺滅腫瘤細胞n 對白細胞介素-2的依賴低n 長效的記憶細胞有利于發(fā)揮抗腫瘤復發(fā)和轉(zhuǎn)移的作用我們已治療了近500例多種實體腫瘤如肝癌、腸癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、卵

24、巢癌、淋巴瘤和胰腺癌等，以及白血病患者。我們治療的病人大多為晚期腫瘤，患者多數(shù)有各種臨床癥狀和多處轉(zhuǎn)移，包括癌性胸水和腹水。接受我們的免疫效應細胞治療后多數(shù)患者的臨床癥狀有明顯改善，伴隨著腫瘤的縮小和腫瘤標志物的明顯下降或恢復正常，以及生存期的延長。另外，我們還觀察到這一治療方法可激活晚期腫瘤患者的細胞和體液免疫功能，表現(xiàn)為外周血中的單核細胞和嗜酸性細胞計數(shù)的顯著增多以及免疫球蛋白IgG和IgA的明顯升高。此外，治療后患者腫瘤組織中可見大量激活的淋巴細胞的浸潤。我們研制的免疫效應細胞的臨床應用安全、有效。接受免疫效應細胞治療的病人通常僅有輕到中等度的發(fā)熱，未見有其他明顯的毒副反應。我們的方法具

25、有整體和系列的創(chuàng)新性及相關的自主知識產(chǎn)權。包括三維細胞培養(yǎng)裝置、體外腫瘤生物模型、高效的免疫細胞。我們部分研究結(jié)果已經(jīng)在第七屆亞洲臨床腫瘤學大會暨第九屆全國腫瘤學大會、腫瘤多學科綜合治療暨首屆腫瘤靶向治療東方國際論壇、2006亞太地區(qū)國際腫瘤生物學和醫(yī)學會議和 “第18屆歐洲癌癥學會-美國國立癌癥研究所-美國癌癥研究學會聯(lián)合大會“（18th EORTC-NCI-AACR Symposium）和2007年AACR等國內(nèi)外學術會議上報告。我們的一些論文和文章摘要刊登在 ”腫瘤”、“歐洲癌癥雜志” 和中國臨床腫瘤學教育專輯（2006）等期刊上。其中“三維腫瘤生物模型的創(chuàng)建從體外腫瘤生物學研究到臨床應

26、用“ 被評為2006 年度中國臨床腫瘤學優(yōu)秀論文，榮獲中國臨床腫瘤學科學基金的獎勵。2007年我國權威官方新聞機構(gòu)新華網(wǎng)對我們的工作進行了專門報道，題為我國科學家首次成功構(gòu)建三維腫瘤模型，將原本在人體內(nèi)生長發(fā)展的癌細胞放到體外觀察培養(yǎng)，直至消滅，有望成為我國在國際腫瘤科學研究領域的新突破口。解放日報、文匯報以及國內(nèi)的眾多媒體都進行了轉(zhuǎn)載。我們的研究工作也被列為2007年度中國國內(nèi)十大醫(yī)學新聞評選的候選第五條新聞。我們的項目也得到了上海市科學技術委員會和國家自然科學基金會的寶貴支持和資助。什么病人適合于腫瘤生物治療過繼性細胞免疫治療可用于絕大多數(shù)腫瘤患者，如淋巴瘤、肝癌、肺癌、腎癌、乳腺癌、胃癌

27、、大腸癌、卵巢癌、惡性黑色素瘤等。治療的主要適應癥包括：n 手術后患者，用于清除微小轉(zhuǎn)移病灶，防止腫瘤的復發(fā)和轉(zhuǎn)移n 已經(jīng)喪失手術機會的患者n 放療、化療失敗的患者和無法進行放療、化療的中晚期患者n 接受放化療后出現(xiàn)嚴重毒副反應，不能繼續(xù)耐受的病人n 局部或介入治療后病人n 接受靶向治療患者n 癌性胸、腹腔積液、心包積液患者n 其他沒有禁忌癥的患者如有以下情況，應該慎用或禁用生物治療：n 懷孕婦女n 有其他免疫缺陷疾病或器官移植史者n 一周內(nèi)使用過大劑量糖皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑者 ( 包括化療 )n 心、肺、肝、腎或骨髓功能明顯低下者n 有嚴重過敏史或活動性感染者n 重度黃疸什么時候和如何進

28、行腫瘤生物治療：根據(jù)每個患者的具體病情，醫(yī)生與患者或家屬討論并擬定抗腫瘤治療方案采集患者外周血50毫升，分離單個核細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)擴增。腫瘤生物治療應在醫(yī)院進行，醫(yī)院提供相應的醫(yī)療條件，確保遵循GCP（Good Clinic Practice) 的準則提供精心的臨床治療。同時，細胞培養(yǎng)實驗室遵循GTP (Good Tissue Practice) 的標準進行優(yōu)質(zhì)細胞培養(yǎng)。n 細胞數(shù)量不低于5×109 /次。每周 1 次, 連續(xù) 4 次為 1個療程 ；病情嚴重者也可每周 2 次, 連續(xù) 8 次為 1個療程。n 毒副作用及處理: n CTL 細胞治療中出現(xiàn)的主要副作用是畏寒或寒戰(zhàn)、發(fā)熱、

29、乏力等。發(fā)熱常常出現(xiàn)在治療后 48小時, 體溫一般 38 左右 , 發(fā)熱在 24小時內(nèi)?？删徑? 不需特殊處理。對體溫超過 38 的患者可用物理降溫或解熱藥物對癥處理。n 少數(shù)患者可能出現(xiàn)輕度頭痛、四肢酸痛、乏力、和惡心等消化道癥狀，可做相應對癥處理。 生物治療的療效包括：有效地殺滅腫瘤細胞，減輕臨床癥狀，改善生活質(zhì)量，提高免疫機能，延長生存期。具體可見各種臨床癥狀的改善，包括食欲增加，體力增強，疼痛減輕，體重增加。腫瘤的體積縮小或消失，血中腫瘤標志物降低或恢復正常，轉(zhuǎn)移性腫大淋巴結(jié)消退，癌性胸腹水減少或完全吸收，機體免疫功能的增強等。以免疫干預為基礎的腫瘤治療新策略臨床療效評價的一個重要發(fā)展

30、領域是評估常規(guī)和免疫治療相結(jié)合的協(xié)同治療方式，從而解決個性化治療的局限性問題，獲得更多的臨床益處。若干能在臨床前和臨床研究中應用的免疫治療且與傳統(tǒng)的治療起協(xié)同作用的獨特的策略已經(jīng)被提出（例如與手術、局部和靶向性治療以及與使用化療藥物或放療為基礎的治療的聯(lián)合）。這些研究結(jié)果與開發(fā)聯(lián)合疫苗、T細胞、化療和單克隆抗體治療的新方法有很密切的聯(lián)系，預示著普遍適用于各種癌癥的協(xié)同治療具有驚人的發(fā)展前景。由于免疫療法及癌癥藥物的復雜性，為了在不久的將來實現(xiàn)對癌癥的控制提供更有效的治療方法，癌癥免疫學家和臨床醫(yī)師有必要進行緊密的合作。表1. 免疫治療結(jié)合手術治療增強療效的基礎l 手術治療減少腫瘤負荷，相對增加

31、細胞毒T淋巴細胞，更好的控制殘余腫瘤或癌細胞。l 手術減少抑制性調(diào)節(jié)T細胞和其他免疫抑制因子。 l 手術去除腫瘤，減少腫瘤抗原的慢性刺激，避免免疫細胞應答的無能。 l 免疫治療針對性地消除潛伏的或殘余的腫瘤細胞，預防手術后的腫瘤復發(fā)。 l 以免疫細胞為基礎的治療可在手術后恢復期的早期進行，不必顧慮對傷口愈合的不良影響。 l 免疫治療可從手術標本中的腫瘤中提取自身腫瘤抗原，同時也可擴增腫瘤浸潤淋巴細胞供臨床治療。l 生物治療導致腫瘤局限并縮小，為手術創(chuàng)造條件。腫瘤的形成和發(fā)展需要有癌細胞作為種子，也伴有環(huán)境的改變，尤其是免疫調(diào)控機制的異常，為腫瘤的生存提供了有利的環(huán)境。目前常用的放化療方法常常是

32、在殺傷了癌細胞種子的同時也損傷了機體防御功能的環(huán)境。將放化療和生物治療科學地結(jié)合在一起，可起到協(xié)同殺傷腫瘤細胞的效果，同時保護和改善患者的免疫功能。為更好地控制腫瘤提供一個良好的環(huán)境。表 2. 化療或放療結(jié)合免疫治療的優(yōu)點l 化療和放療能殺死腫瘤細胞，包括對免疫耐受腫瘤細胞并提供腫瘤抗原的交叉遞呈。l 放療和化療去除免疫抑制細胞。l 減少細胞因子的競爭。l 增加可供利用的抗原遞呈細胞并改善功能。l 免疫治療殺傷對化療、放療耐藥的腫瘤細胞。l 免疫治療提供效應細胞來接受交叉遞呈的腫瘤抗原和其他危險信號。l 免疫治療減輕放化療的毒性作用，增強對放化療的耐受性.l 激素治療誘導抗腫瘤細胞和體液免疫反應。惡性腫瘤是一種非常復雜的疾病，但也可以把癌癥的治療簡單化，體內(nèi)腫瘤主要以兩種形式存在，一種形式是實體腫瘤，另一種是微小的轉(zhuǎn)移病灶。我們可以利用各種不同的局部治療的有效手段，如射頻、伽瑪?shù)丁⒊暤兜葘嶓w腫瘤進行積極的治療。同時進行生物治療來控制散在性的或殘留的腫瘤細胞，為腫瘤病人提供全方位的治療。表3. 免疫治療結(jié)合局部靶向治療增強療效的策略l 局部治療打破腫瘤屏障和克服免疫耐受。l