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文檔簡介

1、重組蛋白藥物生物學(xué)活性檢測黃文龍2014年2月28日2021-10-292021-10-292021-10-292021-10-291.生物學(xué)活性檢測必要性 藥品有效性必須是療效確切,且含有特定的有效活性成分和一定濃度含量 凡是不能用理化方法測定其含量或有效成分或雖有理化方法測定但不能真實(shí)反映臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值的藥物效價(jià)測定,可用生物測定法進(jìn)行測定 生物學(xué)活性測定是生物測定的重要內(nèi)容2021-10-292.生物技術(shù)藥物的生物學(xué)活性檢測方法 體內(nèi):動(dòng)物模型分析 體外:細(xì)胞(組織、器官)培養(yǎng)分析 酶促反應(yīng)法、免疫學(xué)法(體外)2021-10-29 蛋白藥物的細(xì)胞學(xué)活性檢測原理:相同條件下通過實(shí)驗(yàn)組與對

2、照組對特定細(xì)胞生理或生存狀況的影響程度來判斷藥物的活性 例:抗腫瘤藥物活性檢測2021-10-29例:抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測腫瘤細(xì)胞(對數(shù)期) 胰蛋白酶處理 細(xì)胞懸液 稀釋 96孔板培養(yǎng)24h 實(shí)驗(yàn)組、對照組設(shè)置 培養(yǎng)45d 棄去上清液 加MTT, 37繼續(xù)培養(yǎng)4 h 小心棄上清,加 DMSO 37繼續(xù)培養(yǎng)4 h 測定光密度值腫瘤細(xì)胞生長抑制率(1- OD實(shí)驗(yàn)/OD對照) 100在酶標(biāo)儀上以實(shí)驗(yàn)波長為570 nm,參比波長為450 nm2021-10-29細(xì)胞培養(yǎng)分析 優(yōu)點(diǎn):時(shí)間較短(13d)成本低、重復(fù)性好 缺點(diǎn):不精確 如:MTT顯色反應(yīng)2021-10-29酶促反應(yīng)、免疫學(xué)法 優(yōu)點(diǎn):簡單、靈敏、快速、精確 缺點(diǎn):不一定反應(yīng)整體活性2021-10-293.藥物生物學(xué)活性檢測的意義 2021-10-29 思考題:1.重組蛋白藥物的生物學(xué)活性檢測方法主要有哪些?2.抗腫

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