大腸桿菌檢測(cè)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、國(guó)標(biāo)法測(cè)定大腸桿菌樣本的細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)原理：國(guó)標(biāo)法操作的原理 實(shí)驗(yàn)器材：培養(yǎng)箱， 10 只移液管， 1 只 250ml 錐形瓶， 5 只大試管，試管架，4個(gè)平皿，500ml大燒杯1個(gè)，電子天平，紗布，脫脂棉，滅菌鍋，PH計(jì)或PH試紙，100ml量筒，橡皮手套，超凈臺(tái)實(shí)驗(yàn)藥品：磷酸鹽緩沖液，蒸餾水，LB培養(yǎng)基，瓊脂，5%NaO,H5%HCI實(shí)驗(yàn)步驟：-.10 只移液管， 1 只 250ml 錐形瓶， 5 只大試管， 4 個(gè)平皿， 500ml 大 燒杯 1 個(gè)， 100ml 量筒進(jìn)行洗滌，然后一起放入高壓蒸汽滅菌鍋中在 121攝氏度條件下滅菌20min。滅完菌后烘干，完成后放入超凈臺(tái)中。 用

2、酒精擦拭超凈臺(tái)，紫外消毒 30min.1：用電子天平稱取成品 LB 3.1241g 和瓊脂 1.8756g 放入 250ml 的潔 凈錐形瓶中。2:用量筒量取125ml的蒸餾水加入該錐形瓶中，制成培養(yǎng)基。3：用棉花堵住該錐形瓶的瓶口，用牛皮紙包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再將培養(yǎng)基放入滅菌鍋中在 121 攝氏度之下滅菌 20min。 4:滅完菌后放入超凈臺(tái)中備用。1取1只無(wú)菌250ml錐形瓶，用量筒向其中加入 49ml PBS2：將 1ml 樣品加入到該錐形瓶中，搖勻制成 1:50 的細(xì)菌溶液。3：取 4 只試管，編號(hào) 144：用無(wú)菌移液管分別向 4只試管中加入 9ml 的 PBS5：用 1ml 無(wú)

3、菌移液管從樣品中移取 1ml 菌液加入到 1中. 震蕩試管使菌液均勻。6:用1ml無(wú)菌移液管從1號(hào)試管中移取1ml的細(xì)菌溶液加入2號(hào)試管中，搖勻7:用另一只1ml無(wú)菌移液管從2號(hào)試管中移取lml細(xì)菌溶液，加 入 3 中，搖勻以此類推直至 4 只試管中均加入了細(xì)菌溶液。 9:取 4 只平皿，編號(hào) 1410:分別用4只無(wú)菌移液管從這4只試管中移取lml的菌液置于 4只平皿中，加入4 5 5 0攝氏度溫度下的培養(yǎng)基，約l5mm厚度。緩慢旋轉(zhuǎn)平皿使菌液與培養(yǎng)基混合均勻；待培養(yǎng)基冷凝后倒置。11:將培養(yǎng)基在3 6攝氏度條件下培養(yǎng)12小時(shí)。 12:取出培養(yǎng)皿，選擇細(xì)菌個(gè)數(shù)在 30 至 300 個(gè)之間的平皿

4、數(shù)細(xì)菌的 個(gè)數(shù)。四:實(shí)驗(yàn)結(jié)果（記得在操作過(guò)程和得到結(jié)果時(shí)拍照）1 號(hào)， 2 號(hào)菌落個(gè)數(shù)多不可計(jì)，舍棄4 號(hào)平皿中菌落數(shù)目小于 10 cfu ，舍棄3號(hào)平皿中菌落分布較均勻， 數(shù)3號(hào)中的菌落數(shù)，一共有 210個(gè) cfu 。計(jì)算樣品中細(xì)菌濃度為：1.05 X 105 Cfu/ml點(diǎn)評(píng)超凈臺(tái)中的實(shí)驗(yàn)步驟講述詳細(xì)， 明確，不錯(cuò)。前面的步驟敘述有點(diǎn)亂， 建議按照如下標(biāo)題重新調(diào)整順序。實(shí)驗(yàn)步驟：1、 儀器清洗將燒杯，培養(yǎng)皿、 試管等儀器用洗衣粉清洗， 超聲 5min. 然后用清水清洗，超聲5min,最后用三蒸水清洗，放入烘箱中烘干。2、 培養(yǎng)基配制精確稱量。放入錐形瓶中，加入。mL蒸餾水，搖勻 3，滅菌包扎、滅菌，烘干備用3、 超凈臺(tái)中的操作（如上） 除了實(shí)驗(yàn)步驟和結(jié)果，還要有討論和注意事項(xiàng) 例如： 實(shí)驗(yàn)討論：1、評(píng)價(jià)該方法（操作簡(jiǎn)易程度，靈敏度如何，適用性）2、為何選擇細(xì)菌個(gè)數(shù)在 30至 300個(gè)之間的平皿數(shù)細(xì)菌的個(gè)數(shù)？ 注意事項(xiàng)比如各種儀器的使用注意事項(xiàng)，