凡納濱對蝦信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子（Lv-STAT）基因的克隆及表達特征分析.pdf

? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 第 ? 卷第 ? 期 ? 年 ? 月 ? 水?產(chǎn)?學?報 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文章編號? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 收稿日期? ? ?修回日期? ? ? 資助項目?國家?九七三?項目? ? ?國家?八六三?高技術研究發(fā)展計劃? ? ? ? ? ?國家科技支 撐計劃項目? ? ? ? ? ? ? ? ?天津市自然科學基金項目? ? ? ? ? ? ?天津師范大學博士基金項 目? ? ? ? ? 通信作者?孫金生? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 凡納濱對蝦信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子? ? ? ? ? ? ? ?基因的 克隆及表達特征分析 張?鈴?劉逸塵?張亦陳?孫?妍?耿緒云?孫金生? ? 天津師范大學生命科學學院?天津市動植物抗性重點實驗室?天津? ? 天津市水生動物疫病預防控制中心?天津? 摘要? 信號傳導及轉(zhuǎn)錄激活因子? ? ? ? ?是生物體內(nèi)重要信號通路 ? ? ? ? ? ? ?的關鍵組分? 在機體免疫?生長?發(fā)育等方面起到重要作用? 實驗從凡納濱對蝦血細胞中克隆獲得了 ? ? ? ? 基因的全長 ? ? ? ?序列 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?其 ? ? ?區(qū)全長 ? ? ?編碼 ? 個氨基酸?預測的分子量為 ? ? ?等電點為 ? ? 利用 ? ? ? ?在線軟 件分析表明?該基因編碼的蛋白主要結構域由 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?和 ? ? ? ? ? ? ? 部分組成?但不具有信號肽結構? 將 ? ? ? ? ? ?與來源于其它物種的 ? ? ? ?進行氨基酸多序列 比對后發(fā)現(xiàn)?該基因家族中的關鍵位點在 ? ? ? ? ? ?中同樣保守? 系統(tǒng)發(fā)生分析結果顯示? ? ? ? ? ?與斑節(jié)對蝦?中國明對蝦的 ? ? ? ?親緣關系最近? 在組織表達模式分析基礎上進一步 研究了該基因應答 ? ? ?感染的表達變化特征?發(fā)現(xiàn)在感染后早期? ? 和 ? ?該基因在 血細胞中均呈顯著上調(diào)表達趨勢?上述研究表明該基因在一定程度上參與了凡納濱對蝦體內(nèi) 由 ? ? ?引發(fā)的先天免疫應答過程? 關鍵詞? 凡納濱對蝦? ? ? ? ? ? 表達模式分析? 先天免疫 中圖分類號? ? ? ? 文獻標志碼? ? 信 號 轉(zhuǎn) 導 及 轉(zhuǎn) 錄 激 活 因 子 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?是 ? ? ? ? ? ? ?信號通路的關鍵組分?該通路是許多細胞 因子信號由胞膜向核內(nèi)傳遞的重要途徑?廣泛 參與細胞增殖?分化?凋亡以及胚胎發(fā)育和機體免 疫調(diào)節(jié) 等 生 物 學 過 程? 是 近 年 來 的 研 究 熱 點? ? ? ? ? ? ? ?信號通路中有 ? 個重要組分?酪氨酸 激酶 相 關 受 體? 酪 氨 酸 激 酶 ? ? ? 和 轉(zhuǎn) 錄 因 子 ? ? ? ? ? 目前認為? ? ? ? ? ? ?信號通路能被許多 細胞因子及生物化學介質(zhì)等配體激活?這些配體 通過結合相應的酪氨酸激酶相關受體?使受體發(fā) 生二 聚 化 從 而 激 活 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 隨 后 ? ? ? ?上特定的酪氨酸殘基會被活化的 ? ? ? ? 磷 酸化?從而形成二聚體?以此形式跨越核膜并與 ? ? ?靶序列特異性結合?進而啟動細胞因子應答 基因轉(zhuǎn)錄? ? ? ? ? ? 的結構在進化上較保守?是 一類可由蛋白酪氨酸激酶 ? ? ? ? 活化的潛在的轉(zhuǎn) 錄因子家族?于 ? 世紀 ? 年代初在干擾素誘導 基因轉(zhuǎn)錄的研究中被發(fā)現(xiàn)? ? 近年來的研究顯 示? ? ? ?單體主要位于靜息細胞的胞漿中?磷酸 化的 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 可以形成同源或異源二聚 體進入細胞核?從而對靶基因的表達加以調(diào)控?它 們可被細胞因子和生長因子特異性激活并調(diào)節(jié)基 因轉(zhuǎn)錄?因此它們作為細胞質(zhì)中的信號傳感器和 細胞核中的轉(zhuǎn)錄激活因子發(fā)揮作用? 目前?對 于線蟲?果蠅?斑馬魚?人等模式生物 ? ? ? ?的研 究結果顯示?在無脊椎動物中僅發(fā)現(xiàn)一種 ? ? ? ? 基因?而哺乳動物的 ? ? ? ?家族則包括 ? 種 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 期張?鈴?等?凡納濱對蝦信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子? ? ? ? ? ? ?基因的克隆及表達特征分析? ? ? ? ?蛋白? ? ? ? ? ?其中 ? ? ? ?有 ? ? ? ?和 ? ? ? ? ?兩種異構體 ? ? ? ? ?蛋白約含有 ? ? ? 個氨基酸?其在染色體以及在早期真核生物 中的分布可以表明?這個家族起源于一個單一的 原始基因?該家族基因的產(chǎn)生是由于不同染色體 間插入轉(zhuǎn)座子而形成的? 近年來發(fā)現(xiàn) ? ? ? ?還 在調(diào)節(jié)宿主的先天和后天免疫反應中發(fā)揮了關鍵 作用?另外 ? ? ? ? ? ? ?信號通路參與細胞抵御 病毒 和 細 菌 侵 染 的 免 疫 應 答 過 程? ? 雖 然 ? ? ? ? ? ? ?通路在哺乳類中已得到廣泛研究?但 在節(jié)肢類動物中的研究仍較少?部分研究推斷甲 殼類的 ? ? ? ?基因保守結構域應該與已知的昆蟲 綱中 ? ? ? ?基因有相似的功能和對病毒感染的應 答 機 制? ? 實 驗 擬 在 克 隆 凡 納 濱 對 蝦 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?的 ? ? ? ?基因的基礎上? 對其進行序列和結構分析?并進一步分析其組織 表達特征和應答 ? ? ?感染的表達變化模式?實 驗將為深入探討該信號通路在對蝦抗病毒免疫應 答過程中的作用及調(diào)控機制提供參考? ?材料與方法 ? ?實驗材料 實驗動物?菌株?質(zhì)粒?凡納濱對蝦?體長 ? ? ? ? ? 購于天津神堂水產(chǎn)育苗養(yǎng)殖有限公 司?實驗前在水族箱循環(huán)系統(tǒng)中暫養(yǎng) ? ?使其適 應實驗室內(nèi)養(yǎng)殖環(huán)境?宿主菌株 ? ? ? ? ?為本實 驗室保存?克隆載體 ? ? ?購自 ? ? ? ? ? ? ?大 連?公司? 實驗試劑 ? ? ? ? ? ? ? 總 ? ? ? 提 取 試 劑盒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?其 它 試 劑 均 為 國 產(chǎn) 或 進 口 分 析 純 產(chǎn)品? 實驗儀器?梯度 ? ? ?儀? ? ? ? ? ?核酸 蛋 白 測 定 儀 ? ? ? ? ? ? ? ? 臺 式 冷 凍 離 心 機 ? ? ? ? ?恒溫培養(yǎng)箱?上海博訊實業(yè)有限公 司醫(yī)療設備廠? ? ?總 ? ? ?的提取及第一鏈 ? ? ? ?的合成 參照劉麗靜等?的方法?提取健康凡納濱對 蝦血細胞?心臟?鰓?肝胰腺?胃?腸道和肌肉的總 ? ? ? ?經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳與核酸蛋白測定儀進行 定性和定量分析? ? ?保存?zhèn)溆? 以 ? ? ? ? 各組織總 ? ? ?為反轉(zhuǎn)錄模版? ? ?引物? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 為 反 轉(zhuǎn) 錄 引 物? 根 據(jù) ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 說明書?合成第一鏈 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?全長克隆 根據(jù)前期轉(zhuǎn)錄組測序結果?設計序列特異性 引物 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?和 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?以對 蝦血細胞 ? ? ? ?為模板進行 ? ? ?擴增?將獲得的 目的 基 因 片 段 進 行 回 收 純 化 后? 與 克 隆 載 體 ? ? ?連接?挑取檢測正確的陽性克隆進行測 序驗證? ? ? ? ? ? ? ? ?基因的生物信息學分析 利用 在 線 軟 件 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?將測序后的 ? ? ? ? ? ?基因序列進行 翻譯?并對推斷的蛋白序列進行分子量及等電點 的預測?利用 ? ? ? ? ? ? 工具? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 進 行 同 源 比 對 分 析? 采 用 ? ? ? ? ? ? ? 和 ? ? ? ? 軟件對其進行多序列比較和聚類分 析?系統(tǒng)發(fā)生樹采用 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 方法構建? ? ? ? ? ? ? ? ?基因的組織表達分析 實驗前隨機挑選 ? 尾對蝦?取部分鰓組織提 取 ? ? ? ? 用 ? ? ? 特 異 性 引 物 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?和 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?進行病毒特異 性擴增?未見特異性病毒條帶? 取 ? 尾對蝦進行 正常飼養(yǎng)?作為對照組?另取 ? 尾對蝦經(jīng) ? ? ?人 工感染 ? ? 后提取不同組織作為實驗組?對照組 和實驗組均設 ? 個平行? 分別提取各個組對蝦的 血細胞?心臟?鰓?肝胰腺?胃?腸和肌肉共 ? 種組織 總 ? ? ? ?并通過反轉(zhuǎn)錄合成 ? ? ? ? ?以 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?和 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?為目的基因擴 增 引 物? 以 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 和 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?為內(nèi)參基因擴 增引物進行 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?檢測? ? ? ? ? ? ? ? ?基因在血細胞中應答白斑桿狀病 毒感染的表達變化特征 選用前述無特定病毒檢出的對蝦分別設置空 白組?對照組和實驗組?每組 ? 個平行?每個平行 ? 尾對蝦?空白組無任何注射?對照注射稀釋病 毒的緩沖液?實驗組注射病毒懸液 ? ? ? ?濃度為 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?水?產(chǎn)?學?報? 卷 ? ? ? 注射后分別于 ? ? 和 ? ? 分別取血細胞和肝胰腺?提取總 ? ? ?并經(jīng)反轉(zhuǎn) 錄獲得 ? ? ? ? ?利用 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?方法定量檢測 ? ? ? ?基因在病毒感染進程中的表達變化特征? 為了驗證病毒感染的有效性?于注射感染后的第 ? 天?從 ? ? ?感染組和對照組分別隨機取 ? 尾 對蝦檢測?結果顯示僅感染組檢出了 ? ? ?特異 性擴增條帶? ?結果 ? ? ? ? ? ? ? ?基因全長 ? ? ? ?的序列分析 實驗克隆獲得凡納濱對蝦 ? ? ? ?基因 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 注 冊 號? ? ? ? 全 長 ? ? ? ? ? ? ? ? ?區(qū)全長 ? ? ?編碼的多肽序列 含 ? ? ? ?其預測的分子量為 ? ? ?等電點為 ? ? 經(jīng) ? ? ? ? ? 的 ? ? ? ?分析顯示其氨基酸 序列含有 ? 個保守結構域? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 和 ? ? ? ?結 構 域? ? ? ? 中未發(fā)現(xiàn)信號肽序列? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?分別符 合 ? ? ? ?的螺旋結構域? ? ?結合域的結構特 征?而 ? ? ? 則是存在于已發(fā)現(xiàn)的所有 ? ? ? ?分子 中?是進化上最保守也是功能最重要的區(qū)域? ? ? ? ? ? ? ?的多序列比對分析 基于 ? ? ? ? ? ?結果?將 ? ? ? ? ? ?氨基酸序列推 斷的結構域與其它甲殼動物中報道的 ? ? ? ?結構 域進行比對?相似度上限設置為 ? 結果發(fā)現(xiàn) 它們在螺旋結構域? ? ?結合域? ? ? 結構域上 有很多相同序列?圖 ?顯示這些序列具有較強 的保守性? ? ? ? ? ?結構域中?第 ? ? 個氨 基酸中?單橫線標示? 富含 ? ? ? ? 等堿性氨基 酸? ? ? 結構域具有核心保守序列 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?雙橫線標示? 在 ? ? ? 結構域之后靠近羧 基端?甲殼綱動物和人的 ? ? ? ? ? ?都存在保守 序列 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 期張?鈴?等?凡納濱對蝦信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子? ? ? ? ? ? ?基因的克隆及表達特征分析? 圖 ? ? ? ? ? ?推斷氨基酸序列與其它物種 ? ? ? ?氨基酸的多序列比對結果 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?將 ? ? ? ? ? ?與同其具有較高同源性的 ? ? ? ? 做系統(tǒng)發(fā)生樹?分析它們之間的進化關系?圖 ? 圖 ? ? ? ? ? ?與其它相近物種 ? ? ? ?的進化發(fā)生分析 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 結果顯示這些序列分別聚為兩組? ? ? ? ? ?與節(jié) 肢類的斑節(jié)對蝦?中國明對蝦的 ? ? ? ?親緣關系 最近?并且與人類 ? ? ? ? ? ? ? ?分布在了進化樹 的同一支上?而與其他人類 ? ? ? ?基因親緣關系 較遠? ? ? ? ? ? ? ? ?基因的組織表達分析 利用 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?方法分析了 ? ? ? ? ? ?在 不同組織中的表達特征?圖 ?結果顯示該基因 在血細胞?肝胰腺中表達水平較高?在鰓?胃?腸中 也有少量的表達?而在心臟?肌肉中未見表達? 病 毒感染后 ? ?該基因在肝胰腺?血細胞中顯著上 調(diào)表達? ? ?在胃?腸和鰓組織中未見顯著 上下調(diào)表達? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?基因應答白斑桿狀病毒感染的表 達變化特征 經(jīng)半定量 ? ? ? ? ? ?方法分析了對蝦血細胞中 ? ? ? ? ? ?基因在病毒? ? ?感染后的不同時間 的表達變化特征?圖 ? 結果表明?病毒感染可 以顯著誘導 ? ? ? ? ? ?基因的表達?病毒刺激后的 極早期時間里? ? ? 和 ? ?該基因在兩個組 織中表達量均升高?與空白組? ?相比有顯著差 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?水?產(chǎn)?學?報? 卷 異? ? ? 血細胞中該基因的表達量在 ? ? 和 ? ? 相當? 感染后 ? ? 該基因在血細胞中的表 達量達到高峰?分別約為空白組和對照組該基因 表達量的 ? 和 ? 倍?隨著感染時間的延長? ? ? ?基因表達量總體呈逐漸下降的趨勢? 圖 ?凡納濱對蝦 ? ? ? ? ? ? ?基因的組織表達特征 ? 心臟? ? 鰓? ? 肝胰臟? ? 胃? ? 腸? ? 肌肉? ? 血淋巴? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 圖 ? ? ?感染后凡納濱對蝦血細胞中 ? ? ? ? ? ? ?基因的表達變化模式 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?討論 近年來的研究顯示經(jīng)典的 ? ? ? ? ? ? ?信號 通路除了廣泛參與細胞增殖?分化?凋亡以及胚胎 發(fā)育外?還在先天免疫應答方面起到重要作用? 實驗從南美白對蝦血細胞中克隆到該通路的關鍵 組 分 ? ? ? ? 的 ? ? ? ? 全 長 序 列 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?分析預測其蛋白結構中不含信號肽?說 明 ? ? ? ? ? ?無跨膜移位活動?為胞漿蛋白? ? 個 保 守 結 構 域? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 以 及 ? ? ? 結構域?分別符合 ? ? ? ?的 ? ? 末端結構域? 螺旋結構域? ? ?結合域和 ? ? ? 結構域的結構 特征? 顯 示 了 其 進 化 的 保 守 性? 有 研 究 認 為 ? ? ? ? ?中的 ? ? 位氨基酸是潛在的入核定 位序列?因為這段區(qū)域富含堿性氨基酸? 在 ? ? ? ? ? ?的 ? ? ? ? ? ?結構域中?第 ? ? ? 位氨 基酸中?圖 ?單橫線標示?同樣富含 ? ? ? ? 等 堿性氨基酸?同時?由于 ? ? ?結合域富含 ?折 疊?符合 ? ? ? ? ? ?的結構特征?因此推斷該序列可 能是 ? ? ? ? ? ?潛在的核定位序列?將會對多聚化 的 ? ? ? ?進入核膜有幫助? ? ? ? 結構域的核心保 守序列為 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?圖 ?雙橫線標 示?已報道的無脊椎動物和人的 ? ? ? ? ? ?與 人的 ? ? ? ? ? ?核心保守序列僅存在一個氨基酸的 差別?保守的 ? ? ? 結構域具有多種功能?包括對 ? ? ? ?分子和其相應的受體特異性相互作用起決 定作用?介導活化的 ? ? ?對 ? ? ? ?的磷酸化?磷 酸化的 ? ? ? ?蛋白可通過其酪氨酸區(qū)域和 ? ? ? 位點間互相結合形成同源或異源多聚體穿越核 膜?從而行使其信號傳遞的功能?此外? ? ? 結構 域之后靠近羧基端的一個酪氨酸一旦被磷酸化? 可以使 ? ? ? ?二聚化開啟入核機制?是非常重要 的位點? 人 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?的磷酸化酪氨酸位點 ? ? ? 位 點 ? 分 別 為? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?以及 ? ? ? ?的 ? ?位點分 別為 ? ? ?和 ? ?比對顯示凡納濱對蝦 和其它甲殼動物的 ? ? ? ?與人的 ? ? ? ? ? ?具有 同一類 ? ?位點?提示可能具有相似的作用機制? 進化分析顯 示? ? ? ? ? ?與節(jié)肢類斑 節(jié)對 蝦?中國明對蝦的 ? ? ? ?親緣關系最近?與人類 ? ? ? ? ? ? ?也分布在了進化樹的同一支上?但與 其它類型的人類 ? ? ? ?基因關系較遠? 有報道指 出?昆蟲綱等無脊椎動物的 ? ? ? ?以及脊椎動物 的 ? ? ? ? ? ?同源 ?這與本研究的結果一致? 值得 注 意 的 是? 雖 然 人 類 ? ? ? ?家 族 已 發(fā) 現(xiàn) ? ? ? ? ? ? ? ?共 ? 種類型?但在無脊椎動物如果 蠅? 按 蚊 和 對 蝦 中 卻 分 別 都 只 發(fā) 現(xiàn) 一 種 ? ? ? ? ?且同源性很高?這提示各物種的 ? ? ? ? 可 能 起 源 于 共 同 的 祖 先? 另 一 方 面? 人 的 ? ? ? ? ? ? ?在進化系統(tǒng)上比較古老?而 ? ? ? ? ? 屬于進化較近源的基因?也支持這一結果? 從 各種 ? ? ? ?的共有序列出發(fā)將有助于深入解析該 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 期張?鈴?等?凡納濱對蝦信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子? ? ? ? ? ? ?基因的克隆及表達特征分析? 基因的基本功能? 組織表達分析顯示? ? ? ? ? ?具有一定的組 織表達特異性?僅在血細胞?肝胰腺中高表達?分 析病毒感染后該基因在血細胞中的表達模式顯 示?在 ? ? ?的感染極早期? ? 前?血細胞內(nèi)的 ? ? ? ? ? ?迅速應答?此后逐漸下降?至感染末期總 體呈現(xiàn)下降趨勢?表明該基因可能在感染的極早 期就參與了 ? ? ?引發(fā)的先天免疫應答過程?在 病毒感染組中 ? ? ? ? ? ?的表達量基本都高于對照 組?表明該基因可能在病毒感染后持續(xù)發(fā)揮著作 用? 本實驗系統(tǒng)分析了 ? ? ? ? ? ?的結構域特點? 組織表達特征以及宿主受病毒感染后的應答模 式?為了解 ? ? ? ? ? ? ? ?信號通路在凡納濱對蝦抗 病毒免疫應答過程中的作用機制提供了參考? 參考文獻? ? ? ?李清剛? 細胞因子受體介導的信號傳遞 ? ? ? ? ? ? ? ? 研究新進展 ? ? ? 國 外 醫(yī) 學 免 疫 學分 冊? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?馬煥艷?韓鳳麗?盛潔?等? 家蠶 ? ? ? ?基因的克隆? 表達及多克隆抗體制備與組織表達差異分析? ? 中國蠶學會第六屆青年學術研討會論文集? 楊凌? 中國蠶學會? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?張雷?周榮斌 姚詠明?等? ? ? 煙堿型乙酰膽堿受體 對小鼠 ? ? ? ? ? ?調(diào) 節(jié)性 ?細 胞 中 轉(zhuǎn) 錄 因 子 ? ? ? ? ?表達 的 影 響 ? ? ? 臨 床 急 診 雜 志? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?王小中?馮文莉?涂植光? ? ? ? ? ? 與白血病? ? 江 西醫(yī)學檢驗? ? ? ? ? ?黃田英?李慶章?侯曉明? 乳腺中 ? ? ? ? ? ? ? ?信號 通路的研究進展? ? 中國乳品工業(yè)? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?周向紅?閻斌倫?李士虎? 中國明對蝦主要過敏原 基因分子克隆與序列分析? ? 水產(chǎn)科學? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 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