GB18281.1-2000醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第1部分：通則.pdf

1 8 2 8 1 . 1 - - - 2 0 0 0前言本標(biāo)準(zhǔn)的全部技術(shù)內(nèi)容為強(qiáng)制性本標(biāo)準(zhǔn)等同采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) I S O 1 1 1 3 8 - 1 : 1 9 9 4 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物第 1 部分: 通B帥G貝 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、 附錄B 、 附錄C 、 附錄D、 附錄E和附錄F都是標(biāo)準(zhǔn)的附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家藥品監(jiān)督管理局提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)消毒技術(shù)與設(shè)備標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位: 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局廣州醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心、 江蘇省衛(wèi)生防疫站、 吉林省衛(wèi)生防疫站消毒科、 山東新華醫(yī)療器械股份有限公司。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人 : 陳嘉嘩、 顧健、 黃新宇、 楊兆旭。G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0I S O前言 I S O( 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織) 是由各國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化團(tuán)體( I S O成員團(tuán)體) 組成的世界性的聯(lián)合會(huì)。制定國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的工作通常由I S O的技術(shù)委員會(huì)完成。各成員團(tuán)體若對(duì)某技術(shù)委員會(huì)確立的標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目感興趣， 均有權(quán)參加該委員會(huì)的工作。與I S O保持聯(lián)系的各國(guó)際組織( 官方的或非官方的) 也可參加有關(guān)工作。在電工技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化方面， I S O與國(guó)際電工技術(shù)委員會(huì)(O E C ) 保持密切合作關(guān)系。 由技術(shù)委員會(huì)正式通過的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)草案提交各成員團(tuán)體表決， 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)需取得至少7 5 %參加表決的成員團(tuán)體的同意才能正式發(fā)布。 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)I S O 1 1 1 3 8 - 1由I S O / T C 1 9 8醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌( S t e r i l i z a t i o n o f h e a l t h c a r e p r o d u c t s ) 技術(shù)委員會(huì)制定。 I S O 1 1 1 3 8 包括了在“ 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物” 總標(biāo)題下的下列各個(gè)部分: 第 1 部分: 通則 第 2 部分: 環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物 第 3 部分: 濕熱滅菌用生物指示物 附錄 A、 附錄 B 、 附錄 C 、 附錄 D , 附錄 E和附錄 F為 I S O 1 1 1 3 8 本部分的有機(jī)組成部分。G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0引言 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了擬用于監(jiān)測(cè)滅菌周期的生物指示物在生產(chǎn)、 標(biāo)簽和性能方面的通用要求( 見第 1 章) ，規(guī)定的各項(xiàng)步驟和方法應(yīng)由訓(xùn)練有素合適的人員實(shí)施。 生物指示物不得用于生產(chǎn)者未在標(biāo)簽上規(guī)定的任何工藝， 生物指示物使用不當(dāng)會(huì)產(chǎn)生誤導(dǎo)結(jié)果。 生物指示物應(yīng)當(dāng)與物理和( 或) 化學(xué)的監(jiān)測(cè)手段配合在一起使用， 以證明滅菌工藝的功效。 不管生物指示物獲得的結(jié)果如何， 若滅菌工藝某一物理/ 化學(xué)變量超過規(guī)定范圍， 滅菌周期均應(yīng)視作未達(dá)到預(yù)期效果。 生物指示物的性能會(huì)受到使用前的貯存環(huán)境、 使用方法或暴露滅菌工藝后所用的技術(shù)影響。因此，應(yīng)遵照生產(chǎn)者的建議進(jìn)行貯存和使用， 而且滅菌處理后， 應(yīng)盡快將生物指示物轉(zhuǎn)至規(guī)定的復(fù)蘇條件下生物指示物若超過了生產(chǎn)者規(guī)定的失效期， 應(yīng)不得使用。 生物指示物用于檢測(cè)滅菌工藝和滅菌設(shè)備的效果， 這類研究應(yīng)由訓(xùn)練有素合適的人員進(jìn)行。中 華 人 民共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物 第 1 部分: 通則 G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0i d t I S O 1 1 1 3 8 - 1 : 1 9 9 4S t e r i l i z a t i o n o f h e a l t h c a r e p r o d u c t s -B i o l o g i c a l i n d i c a t o r s -P a r t 1 : G e n e r a l， 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生產(chǎn)擬用于確認(rèn)和監(jiān)測(cè)滅菌周期的生物指示物和試驗(yàn)菌懸液在生產(chǎn)、 標(biāo)簽和操作方面的通用要求注1 : G B 1 8 2 8 1 - - 2 0 0 0 ( id t I S O 1 1 1 3 8 ) 的其他部分， 規(guī)定用于各指定滅菌工藝的生物指示物的專用要求.本標(biāo)準(zhǔn)不包括對(duì)已直接接種試驗(yàn)菌的產(chǎn)品或該類接種產(chǎn)品復(fù)蘇程序的要求， 本標(biāo)準(zhǔn)也未規(guī)定在一個(gè)載體上采用一種以上菌株或菌種的生物指示物的要求。2 引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文， 通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時(shí)， 所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會(huì)被修訂， 使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。G B / T 7 4 0 8 -1 9 9 4GB 1 8 2 8 1 . 2 - 2 0 0 0數(shù)據(jù)元和交換格式醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌信息互換日期和時(shí)間表示法( e q v I S O 8 6 0 1 : 1 9 8 8 )生物指示物第 2 部分: 環(huán)氧乙烷滅菌用生物指示物 ( i d t I S O 1 1 1 3 8 - 2 : 1 9 9 4 )G B 1 8 2 8 1 . 3 -2 0 0 0 醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌生物指示物 ( i d t I S O 1 1 1 3 8 - 3 : 1 9 9 5 )第 3 部分: 濕熱滅菌用生物指示物G B / T 1 9 0 0 2 -1 9 9 4 質(zhì)量體系生產(chǎn)、 安裝和服務(wù)的質(zhì)量保證模式( i d t I S O 9 0 0 2 : 1 9 9 4 )3 定 義 G B 1 8 2 8 1 -I S O 1 1 1 3 8 的各部分均采用下列定義3 . 1 生物指示物 b i o l o g i c a l i n d i c a t o r ( 1 3 1 ) 對(duì)特定滅菌處理有確定的抗力， 并裝在內(nèi)層包裝中可供使用的染菌載體。 注 2 : “ 指示物” 指包括指示卡、 片、 條、 帶、 器等各種形式的指示器件。3 . 2 載體c a r r i e r 涂覆有試驗(yàn)菌的支持材料。13 內(nèi)層包裝 p r i m a r y p a c k 保護(hù)染菌載體免受損壞和污染， 而不阻礙滅菌因子穿透的體系。3 . 4 外層包裝 s e c o n d a r y p a c k 裝有已包裝的生物指示物， 供運(yùn)輸和貯存的包裝體系。3 . 5 染菌載體i n o c u l a t e d c a r r i e r 已染上規(guī)定數(shù)量試驗(yàn)菌的載體。國(guó)家質(zhì)f技術(shù)監(jiān)督局 2 0 0 0 門2 一 1 3 批準(zhǔn)2 0 0 1 一 0 5 一 0 1實(shí)施G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 03 . 6 試驗(yàn)菌 t e s t o r g a n is m 用于制備染菌載體的微生物。17 活菌計(jì)數(shù) v i a b l e t e s t o r g a n i s m c o u n t 在要求的培養(yǎng)條件下， 通過計(jì)算長(zhǎng)成的單個(gè)菌落數(shù)， 而得到單位體積菌懸液中或染菌載體上的存活試驗(yàn)菌菌數(shù)3 . 8 滅活 i n a c t i v a t i o n 在規(guī)定的培養(yǎng)條件下， 試驗(yàn)菌發(fā)芽、 生長(zhǎng)和( 或) 增殖的能力的喪失3 . 9 培養(yǎng) 條件 c u l t u r e c o n d it io n s 生產(chǎn)者說明的促進(jìn)試驗(yàn)菌發(fā)芽、 生長(zhǎng)和( 或) 增殖條件， 包括生長(zhǎng)培養(yǎng)基、 培養(yǎng)時(shí)間和溫度。3 . 1 0 公認(rèn)的 菌種 保存庫(kù) r e c o g n i z e d c u l t u r e c o l l e c t io n 指根據(jù)布達(dá)佩斯( B u d a p e s t ) 公約， 按專利法和法規(guī)保存微生物的、 國(guó)際公認(rèn)的國(guó)際菌種保存機(jī)構(gòu)11 1 D值 。v a l u e ; D e c i m a l r e d u c t i o n v a l u e 在設(shè)定的條件下， 滅活9 0 %的試驗(yàn)菌所需時(shí)間或輻射吸收劑量。3 . 1 2 存活菌曲線 s u r v i v o r c u r v e 表示在規(guī)定條件下， 試驗(yàn)菌的殺滅或存活與暴露增強(qiáng)的關(guān)系的曲線圖。3 . 1 3 1藝監(jiān)測(cè)器材 p r o c e s s c h a l l e n g e d e v i c e 模擬滅菌因子在被滅菌物品中處于滅菌最不利狀態(tài)的物件 注 3 :工藝監(jiān)測(cè)器材的構(gòu)成， 可以是將生物指示物t于滅菌因子最難達(dá)到的部位。 注4 : 工藝監(jiān)側(cè)器材的設(shè)計(jì)， 應(yīng)依據(jù)擬滅菌物品的種類和滅菌步驟進(jìn)行。生物指示物不應(yīng)當(dāng)干擾被測(cè)物品的性能 注5 : 工藝監(jiān)測(cè)器材可以是用染菌載體替代生物指示物。3 . 1 4 菌落形成單位 c o l o n y - f o r m i n g u n i t ( C F U ) 由單個(gè)或多個(gè)細(xì)胞所產(chǎn)生的、 肉眼可見活的微生物群落。3 . 1 5 自 身配 套的 生物指 示物 s e l f - c o n t a i n e d b i o l o g i c a l i n d ic a t o r 內(nèi)層包裝中含有細(xì)菌復(fù)蘇生長(zhǎng)所需培養(yǎng)基的生物指示物3 . 1 6 存活一 殺滅區(qū)間 s u r v i v a l - k i l l w i n d o w 在規(guī)定的條件下滅菌處理時(shí)， 生物指示物從全部長(zhǎng)菌( 存活暴露) 過渡到全部不長(zhǎng)菌( 殺滅暴露) 的暴露程度。3 . 1 7 標(biāo)定的 微生物總數(shù) n o m in a l p o p u l a t io n ( 生產(chǎn)者) 標(biāo)定的微生物數(shù)量 注6 : 微生物實(shí)際上的數(shù)f， 可因染菌和復(fù)蘇方法的精確性有差異而與微生物標(biāo)定的總數(shù)不同11 8 抗力 測(cè)量?jī)x r e s i s t o m e t e r 為產(chǎn)生限定條件下滅菌過程中物理化學(xué)變化規(guī)定組合， 以測(cè)量抗力的專用設(shè)備。4 生產(chǎn)、 操作和標(biāo)記要求4 門生產(chǎn)控制和質(zhì)量體系4 . 1 . 1 本標(biāo)準(zhǔn)所有需要進(jìn)行的工作， 都必須按照符合G B / T 1 9 0 0 2 要求的質(zhì)量控制體系進(jìn)行控制。4 門. 2 制造的組成成分來源記錄必須保存 制造的組成成分， 應(yīng)當(dāng)包括摻人或直接接觸試驗(yàn)菌懸液、 染菌載體或生物指示物的所有材料和組成成分4 . 1 . 3 由生產(chǎn)者提供的最終產(chǎn)品( 菌懸液、 染菌載體或生物指示物) 必須無雜菌。雜菌量大會(huì)有損產(chǎn)品的效用， 這一點(diǎn)在生產(chǎn)過程中必須經(jīng)確認(rèn)、 控制、 監(jiān)測(cè)和記錄。4 . 2 試驗(yàn)菌4 . 2 門試驗(yàn)菌必須是不用特殊容器設(shè)備而易于處理的菌株。6 09G B 1 8 2 8 11 -2 0 0 04 . 2 . 2 試驗(yàn)菌必須是存放在公認(rèn)的菌種保存庫(kù)內(nèi)規(guī)定的菌株， 必須參照菌種保存編號(hào)認(rèn)真鑒定。4 . 2 . 3 當(dāng)需使用未存放在公認(rèn)的菌種保存庫(kù)的試驗(yàn)菌時(shí)， 生產(chǎn)者必須負(fù)責(zé)將該特殊菌株交公認(rèn)的菌種保存庫(kù)保存。4 . 2 . 4 每批試驗(yàn)菌懸液的最初接種物必須: a )可迫溯到公認(rèn)的菌種保存庫(kù)保存的標(biāo)準(zhǔn)菌株， 而且可 b )驗(yàn)證其種類和純度。 指定保存試驗(yàn)菌菌種的方法應(yīng)當(dāng)能保證培養(yǎng)物不受污染， 且不會(huì)引起其固有的性質(zhì)發(fā)生變化。 每株試驗(yàn)菌都有特異的鑒定實(shí)驗(yàn)， 生產(chǎn)者應(yīng)提供有關(guān)資料并被證實(shí)。4 . 3 試驗(yàn)菌懸液4 . 3 . 1 生產(chǎn)者必須規(guī)定制備試驗(yàn)菌懸液的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。這些條件能始終如一地生產(chǎn)出符合GB 1 8 2 8 1 . I -I S O 1 1 1 3 8 - 1的操作要求的試驗(yàn)菌懸液， 并根據(jù)情況分別符合GB 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2與G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3的特殊操作要求4 - 3 . 2 收集( 培養(yǎng)物) 和隨后的處理方法必須保證， 載體染菌時(shí)使用的菌懸液不含有對(duì)染菌載體或生物指示物的效能可能產(chǎn)生不 良影響的培養(yǎng)基殘留物。 如生產(chǎn)者已證明培養(yǎng)基殘留物對(duì)染菌載體或生物指示物的效能不會(huì)產(chǎn)生不良影響時(shí)， 則可不考慮此項(xiàng)要求 。4 . 3 . 3 為能追溯用于生物指示物和試驗(yàn)菌懸液生產(chǎn)的菌株是由菌種保存庫(kù)獲得， 試驗(yàn)菌懸液和( 或) 生物指示物的生產(chǎn)者必須保存可滿足要求的記錄。4 . 3 . 4 如果試驗(yàn)菌懸液用于制備染菌載體或染菌產(chǎn)品， 則每個(gè)盛放試驗(yàn)菌懸液的容器或包裝盒( 箱) 上必須附有下列說明: a ) 試驗(yàn)菌的名稱; b ) 提供試驗(yàn)菌的菌種保存庫(kù)名稱或縮寫和該菌種的編號(hào); 。 ) 菌懸液的標(biāo)稱容積以毫升為單位( 若不是懸液， 則以克為單位) ; d )供溯源生產(chǎn)經(jīng)歷的特殊的編碼; e )每毫升菌懸液中試驗(yàn)菌的活菌數(shù); f ) 推薦的貯存條件; B ) 按照G B / T 7 4 0 8 規(guī)定的方式標(biāo)明失效期或有效期( 即: X 年X月X日) ; h ) 生產(chǎn)者的名稱、 商標(biāo)、 地址或其他識(shí)別方法; 1 )處置方法4 . 3 . 5 若購(gòu)買者要求， 生產(chǎn)者必須提供試驗(yàn)菌懸液的抗力和性能特點(diǎn)的詳細(xì)情況， 這些數(shù)據(jù)必須通過購(gòu)買者和生產(chǎn)者雙方認(rèn)可的方法測(cè)得。4 . 3 - 6 生產(chǎn)者必須規(guī)定試驗(yàn)菌懸液的貯存條件和失效期。 在貯存期間必須對(duì)這些條件進(jìn)行監(jiān)測(cè)。 這些條件必須確保試驗(yàn)菌懸液能始終符合 G B 1 8 2 8 1 . 1 -I S O 1 1 1 3 8 - 1的操作要求， 并根據(jù)情況分別符合G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2 與G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3 的特殊操作要求4 . 3 . 7 對(duì)菌懸液必須進(jìn)行試驗(yàn)菌的活茵計(jì)數(shù) 用戶需要試驗(yàn)菌生長(zhǎng)指數(shù)情況時(shí)， 應(yīng)將活菌計(jì)數(shù)表達(dá)為占顯微鏡檢測(cè)所得細(xì)菌總數(shù)的百分比4 . 3 . 8 生產(chǎn)者轉(zhuǎn)運(yùn)試驗(yàn)菌懸液到第三方時(shí)， 必須保證在相似于規(guī)定貯存條件的控制條件下進(jìn)行( 參見4 . 3 . 6 ) .4 . 4 載體、 內(nèi)層包裝和設(shè)計(jì)4 , 4 . 1 載體和內(nèi)層包裝必須不得含有任何對(duì)生物指示物的使用產(chǎn)生不良影響的污染物( 物理的、 化學(xué)的或微生物的) 。4刁 . 2 載體和內(nèi)層包裝在滅菌處理過程中必須不得受到破壞， 否則染菌載體的使用性能會(huì)受不利影響。 61 0G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0 在內(nèi)層和外層包裝中的載體應(yīng)經(jīng)得起運(yùn)輸， 無損壞地送到用戶手上。 載體和( 或) 內(nèi)層包裝的設(shè)計(jì) ， 應(yīng)符合以下要求 : a )在貯存、 運(yùn)輸和裝卸中， 能盡量減少初始所染試驗(yàn)菌的損失; b ) 適用作滅菌工藝監(jiān)測(cè)器件的部件。4 . 4 . 3 必須通過觀察滅菌過程中載體和內(nèi)層包裝暴露干極限變化范圍及其化學(xué)和物理變化的程度， 來檢驗(yàn)是否符合 4 . 4 . 2的要求 注7 : 這些范圍見本標(biāo)準(zhǔn)的其他相關(guān)部分。4 . 4 . 4 在滅菌處理中和滅菌后， 載體和內(nèi)層包裝必須不得殘留或釋放任何物質(zhì)到培養(yǎng)基， 否則會(huì)抑制少量存活試驗(yàn)菌在培養(yǎng)條件下的生長(zhǎng)。 應(yīng)按附錄 F進(jìn)行試驗(yàn)， 檢查是否符合這一要求。4 . 4 . 5 若購(gòu)買者要求， 生產(chǎn)者必須提供每種載體尺寸的最大值和最小值。4 . 5 染菌載體4 . 5 . 1 制備一批染菌載體時(shí)， 只能采用同一株試驗(yàn)菌。4 . 5 . 2 染菌載體的制備必須是將試驗(yàn)菌懸液染在載體上， 然后在控制的條件下干燥。4 . 5 . 3 必須規(guī)定、 確認(rèn)和控制載體的染菌條件， 以保證染菌載體不受試驗(yàn)菌以外的其他雜菌污染， 否則會(huì)對(duì)G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2 和G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3中規(guī)定的產(chǎn)品使用產(chǎn)生不利影響。4 , 5 . 4 在同一批生產(chǎn)的生物指示物中。 每一染菌載體上標(biāo)定的試驗(yàn)菌總數(shù)必須相同。4 . 5 . 5 生產(chǎn)者必須規(guī)定染茵載體的貯存條件和失效期。在貯存期間必須對(duì)這些條件進(jìn)行監(jiān)測(cè)， 這些條件必須始終如一地符合G B 1 8 2 8 1 . 1 -I S O 1 1 1 3 8 - 1 的操作要求， 并根據(jù)情況分別符合G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2 與G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3 對(duì)染菌載體的特殊操作要求。4 . 5 . 6 當(dāng)染菌載體包裝成為生物指示物時(shí)， 其包裝方式必須不得影響單個(gè)載體標(biāo)定的試驗(yàn)菌總數(shù)及其性能。4 . 5 . 了 每批染菌載體必須附有下列說明: a )標(biāo)明“ 染菌載體” ; b )試驗(yàn)菌的名稱; c ) 使用指南， 尤其是有關(guān)滅菌處理后用于復(fù)蘇試驗(yàn)活菌的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的數(shù)據(jù); d ) 提供試驗(yàn)菌的菌種保存庫(kù)名稱和該菌種的編號(hào); e ) 每個(gè)染菌載體的試驗(yàn)菌數(shù)目; f )供溯源生產(chǎn)經(jīng)歷的批號(hào)或特殊的編碼; 9 ) 染菌載體對(duì)適用的滅菌工藝的抗力特征數(shù)據(jù)， 包括測(cè)試條件和測(cè)定特征的方法; h ) 外層包裝中染菌載體的數(shù)量; i ) 推薦的貯存條件; J ) 按照G B / T 7 4 0 8 規(guī)定的方式標(biāo)明染菌載體的失效期( 即: X年X月X日) ; k ) 生產(chǎn)者的名稱、 商標(biāo)、 地址或其他識(shí)別方法; I )染菌載體適用的滅菌工藝; m) 處置方法。46 生物指示物4 . 6 . 1 必須把單個(gè)染菌載體分別裝人內(nèi)層包裝內(nèi)作為生物指示物。4 . 6 . 2 內(nèi)層包裝的設(shè)計(jì)、 構(gòu)造和確認(rèn)， 必須保證內(nèi)層包裝中的生物指示物根據(jù)情況分別符合G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2和G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3的操作要求。4 . 6 . 3 內(nèi)層包裝的設(shè)計(jì)、 構(gòu)造和確認(rèn)， 必須保證按照生產(chǎn)者的方法貯存和運(yùn)輸時(shí)， 生物指示物和染菌載體能避免污染及所染試驗(yàn)菌在載體上損失。4 . 6 . 4 必須規(guī)定、 確認(rèn)和控制進(jìn)行內(nèi)層包裝的環(huán)境條件， 以保證染菌載體不受試驗(yàn)菌以外的其他雜菌G B 1 8 2 8 11 -2 0 0 0污染， 否則會(huì)對(duì)G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2和G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3中規(guī)定的產(chǎn)品使用產(chǎn)生不利影響 。4 . 6 . 5 預(yù)定使用的內(nèi)層包裝須經(jīng)確認(rèn)。 應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn) 4 . 4 要求4 . 6 6 每個(gè)生物指示物的內(nèi)層包裝必須標(biāo)明下列內(nèi)容: a )試驗(yàn)菌的名稱; b )生物指示物的批號(hào); c )按照 G B / T 7 4 0 8規(guī)定的方式標(biāo)明生物指示物的失效期 即: x年x月x日) ; d )生物指示物適用的滅菌工藝; 的 生產(chǎn)者的名稱、 商標(biāo)、 地址和其他識(shí)別方法。4 . 6 . 了 生物指示物必須裝人外層包裝進(jìn)行運(yùn)輸和貯存。4 . 6 . 8 外層包裝必須標(biāo)明下列內(nèi)容: a ) 標(biāo)明“ 生物指示物” ; b ) 4 . 6 . 6 中規(guī)定的內(nèi)容; c ) 提供試驗(yàn)菌的菌種保存庫(kù)的名稱和該菌種的編號(hào); d )每個(gè)生物指示物的試驗(yàn)菌數(shù)目與該批染菌載體測(cè)得的數(shù)目相同; e ) 外層包裝中生物指示物的數(shù)量; f )推薦的貯存條件; 9 ) 內(nèi)層包裝中染菌載體上試驗(yàn)菌的抗力， 包括測(cè)試條件和測(cè)定特征的方法; h ) 使用指南， 尤其是有關(guān)滅菌處理后用于復(fù)蘇試驗(yàn)活菌的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件的數(shù)據(jù); 及 1 ) 處置方法。4 . 6 . 9 每個(gè)外層包裝內(nèi)必須裝有該批指示物合格證書副本， 其內(nèi)容必須包括 : a ) 4 . 6 . 8中規(guī)定的內(nèi)容; b )生物指示物對(duì)適用染菌載體監(jiān)測(cè)的滅菌工藝的抗力特征數(shù)據(jù); 及 c ) 參考本標(biāo)準(zhǔn)G B 1 8 2 8 1 . 1 -I S O 1 1 1 3 8 - 1 和其他相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的說明。4 . 6 門0 每個(gè)外層包裝內(nèi)必須裝有為用戶編寫的處理和復(fù)蘇生物指示物的說明書， 其內(nèi)容必須規(guī)定 a ) 生物指示物必須按生產(chǎn)者規(guī)定的條件貯存; b ) 一個(gè)批次的生物指示物均不得在生產(chǎn)者規(guī)定的失效期外使用; c )生物指示物經(jīng)過被試驗(yàn)的滅菌程序后， 必須在生產(chǎn)者規(guī)定的時(shí)間內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)菌復(fù)蘇數(shù)檢測(cè); d ) 對(duì)生物指示物進(jìn)行試驗(yàn)菌復(fù)蘇數(shù)檢測(cè)時(shí)， 必須采用生產(chǎn)者規(guī)定的方法和條件。 若采用其他方法，必須經(jīng)過確認(rèn)4 - 7 自身配套的生物指示物4 . 7 . 1 自身配套的生物指示物必須符合本標(biāo)準(zhǔn)的所有要求。4 . 7 . 2 自身配套的生物指示物系統(tǒng)應(yīng)包裝牢固， 裝人外層包裝內(nèi)經(jīng)受得起運(yùn)輸裝卸， 至使用時(shí)無損壞。 自身配套的生物指示物系統(tǒng)的設(shè)計(jì) ， 應(yīng)當(dāng): a ) 在運(yùn)輸和裝卸中能盡量減少初始所染試驗(yàn)菌的損失; b )適用作滅菌工藝監(jiān)測(cè)器件的部件4 . 7 . 3 在滅菌處理中及其之后， 自身配套的生物指示物系統(tǒng)的材料， 必須不殘留或釋放出任何可抑制少量存活試驗(yàn)菌在培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)的物質(zhì)( 見附錄F ) 。5 抗力測(cè)定5 . 1 抗力試驗(yàn)要求5 門門每批生物指示物必須經(jīng)過試驗(yàn)， 以證明其抗力是否分別符合G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2和G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3 規(guī)定的使用要求5 . 1 . 2 抗力試驗(yàn)( 見 5 . 4和 5 - 5 ) 必須包括復(fù)蘇試驗(yàn)活菌數(shù)目測(cè)定和用以下兩種或更多的方法測(cè)定抗力 : a )通過建立存活菌曲線測(cè)定D值; b )通過部分陰性分析法測(cè)定 D值; c )用測(cè)得的D值計(jì)算存活一 殺滅區(qū)間， 并驗(yàn)證存活一 殺滅反應(yīng)特點(diǎn)。5 門. 3 由這些試驗(yàn)獲得的值， 必須分別在G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2 和G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3 規(guī)定的范圍內(nèi)， 在外層包裝( 見 4 . 6 - 8 ) 的標(biāo)簽上和每批染菌載體( 見 4 . 5 . 7 ) 合格證上， 至少標(biāo)有兩個(gè)上述數(shù)據(jù)。 注8 本標(biāo)準(zhǔn)的某些相關(guān)部分， 可能需要另加測(cè)定項(xiàng)目。 如G B 1 8 2 8 1 . 3 -I S O 1 1 1 3 8 - 3 濕熱滅菌用生物指示物， 需加 測(cè) 2值5 . 2 計(jì)算存活一 殺滅區(qū)間 存活一 殺滅區(qū)間必須采用附錄B和附錄 D測(cè)得的 D值之一， 及按下面公式計(jì)算 : 存活時(shí)間或存活劑量D值X G g N a -2 ) 殺滅時(shí)間或殺滅劑量(D值X( 館 N o + 4 ) 注 9 ; N 為每個(gè)載體上標(biāo)記的試驗(yàn)活菌數(shù)。5 . 3 復(fù)蘇試驗(yàn)活菌計(jì)數(shù)測(cè)定 復(fù)蘇試驗(yàn)活菌計(jì)數(shù)按附錄A測(cè)定。5 . 4 D值測(cè)定5 . 4 . 1 用于計(jì)算生物指示物D值所需的數(shù)據(jù)， 必須按照附錄 B ( 即用直接計(jì)數(shù)建立存活菌曲線) 和( 或) 附錄C ( 部分陰性分析法或最大可能數(shù) MP N 法) 測(cè)定。5 . 4 . 2 必須按照附錄B和( 或) 附錄D計(jì)算D值。5 . 4 . 3 可采用其他分析部分陰性數(shù)據(jù)的方法， 但必須證明與標(biāo)準(zhǔn)方法等同。5 . 5 存活 殺滅反應(yīng)測(cè)定 存活一 殺滅反應(yīng)特點(diǎn)必須按附錄 E進(jìn)行測(cè)定和驗(yàn)證6 1 3G B 1 8 2 8 11 -2 0 0 0 附錄A ( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)試驗(yàn)活菌數(shù)測(cè)定A 1 必須按A2 -A 4或其他方法檢查染菌載體上復(fù)蘇的試驗(yàn)活菌。如使用其他方法， 必須了解與標(biāo)準(zhǔn)方法的關(guān)系。A 2 每份、 每批或每次暴露至少使用四個(gè)染菌載體， 必須把每個(gè)染菌載體放人一定體積的培養(yǎng)液中， 采用特定的方法( 如加入玻璃珠振搖， 放人均質(zhì)器中研磨， 采用超聲波或其他合適方法) 使試驗(yàn)菌從染菌載體上洗脫下來A 3 必須用適當(dāng)?shù)臒o菌稀釋液稀釋試驗(yàn)菌懸液， 使被接種到每平板培養(yǎng)基上的細(xì)菌產(chǎn)生 3 0 - 3 0 0 C F U之間菌落形成單位， 然后將適當(dāng)?shù)确莸膽乙号c融化的液體瓊脂培養(yǎng)基混合， 或涂在有固體培養(yǎng)基的平板上。生物指示物的生產(chǎn)者必須認(rèn)定或提供一種合適的復(fù)蘇培養(yǎng)基， 和( 或) 提供制備該培養(yǎng)基的所有數(shù)據(jù) 。A 4 樣本平板必須按生產(chǎn)者規(guī)定的溫度和時(shí)間培養(yǎng)。 注 1 0 : 一般對(duì)嗜熱菌采用 5 5 C 6 0 C 培養(yǎng)不少于4 8 h 對(duì)啥常溫菌采用 3 0 V - 3 7 0C培養(yǎng)不少于4 8 h , 注1 1 ; 培養(yǎng)的溫度過高會(huì)使培養(yǎng)基干燥而影響細(xì)藺生長(zhǎng)。A 5 經(jīng)適當(dāng)時(shí)間培養(yǎng)后， 必須對(duì)平板上的菌落形成單位進(jìn)行計(jì)數(shù)， 再計(jì)算出每個(gè)染菌載體上復(fù)蘇的試驗(yàn)活菌的平均數(shù)。 附錄B( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)存活菌曲線法 注1 2 : 理想的存活菌曲線在整個(gè)滅活范圍內(nèi)呈線性， 但實(shí)際上常常會(huì)發(fā)生偏離， 然而其線性必須保持在可接受的 范圍內(nèi) 存活菌f大于5 X1 0 ， 時(shí)， 可用直接計(jì)數(shù)法建立存活菌曲線測(cè)定其抗力. 而存活菌量小于5 x1 0 0 時(shí)， 應(yīng)使用最大可能數(shù)( MP N ) 法側(cè)定其抗力， 若由兩種方法測(cè)得的D值相關(guān)性良好， 則建立的線性存活菌曲線 無嚴(yán)重偏差。B 1 試樣必須按級(jí)暴露于規(guī)定的暴露條件下， 暴露的范圍應(yīng)當(dāng)注明。每級(jí)暴露的時(shí)間或劑量應(yīng)與先前的暴露時(shí)間或劑量不同， 但差距相等。 注 1 3 :關(guān)于暴皿所需設(shè)備操作要求的詳細(xì)情況， 分別參見 G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2 和 G B 1 8 2 8 1 . 3 - I S O 1 1 1 3 8 - 3 ,B 2 必須至少有5 次暴露， 包括: a ) 有一次暴露中試樣未經(jīng)滅菌因子處理( 可能未用滅菌因子或用非致死氣體代替) ; b ) 至少有一次基露使活菌總數(shù)減少到不多于初始接種量的0 . 0 1 %eB 3 每次測(cè)定中每次暴露所用的染菌載體必須不得少于4 個(gè)， 每次暴露必須采用數(shù)目相同的同樣的試樣B 4 每次暴露后 2h內(nèi)， 必須對(duì)試樣進(jìn)行處理， 讓試驗(yàn)菌從載體上脫落， 采用生產(chǎn)者規(guī)定的培養(yǎng)條件和注明的方法進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。B 5 用所得的全部存活菌數(shù)的常用對(duì)數(shù)值， 對(duì)時(shí)間( mi n ) 或劑量作圖， 用最小二乘法進(jìn)行回歸分析， 確定最佳線性曲線?；貧w分析時(shí)不應(yīng)包括原先細(xì)菌數(shù)。 . S l o g范圍內(nèi)的存活數(shù)據(jù)點(diǎn)。 計(jì)算所得直線斜率的負(fù)倒數(shù)值， 即等于以分鐘或吸收輻射劑量表示的 D值 。B 6 所得存活菌曲線的線性相關(guān)系數(shù)必須不小于 0 . 8 eG s 1 8 2 8 11 -2 0 0 0 附錄C ( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)部分陰性分析法或用有限S p e a r m a n - K a r b e r 法 連續(xù)測(cè)定D值的最大可能數(shù)( MP N) 法 注1 4 : 部分陰性數(shù)據(jù)通常用于通過最大可能數(shù)( MP N ) 法計(jì)算試驗(yàn)菌對(duì)滅菌工藝的劑盤反應(yīng)特點(diǎn)。C 飛 試樣應(yīng)按級(jí)暴露于規(guī)定的暴露條件下 ， 除時(shí)間或劑量外 ， 其他工藝變量均應(yīng)恒定 ， 每次暴露必須采用不少于2 。 個(gè)相同的試樣， 每級(jí)暴礴的時(shí)間或劑量應(yīng)與先前的暴露時(shí)間或劑量不同， 但差距相等。 每次暴露必須采用數(shù) 目相同的同樣的試樣 注 1 5 :關(guān)于基露所需設(shè)備操作要求 的詳細(xì)悄況， 分別參 見 G B 1 8 2 8 1 . 2 -I S O 1 1 1 3 8 - 2和 G B 1 8 2 8 1 . 3 - I S O 1 1 1 3 8 - 3C 2 每次暴露后 2 h內(nèi)， 應(yīng)按無菌操作將每個(gè)染菌載體轉(zhuǎn)移到一個(gè)含適量規(guī)定無菌培養(yǎng)液的試管中， 每個(gè)試樣都必須使用同樣容積的培養(yǎng)基， 若生產(chǎn)者把培養(yǎng)基作為生物指示物的一部分， 則必須遵照生產(chǎn)者的培養(yǎng)要求。 生物指示物的生產(chǎn)者應(yīng)認(rèn)定或提供一種合適的復(fù)蘇培養(yǎng)基， 和( 或) 提供制備該培養(yǎng)基的所有數(shù)據(jù) 。染菌載體按生產(chǎn)者推薦的溫度培養(yǎng)。在按生產(chǎn)者推薦的培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)之后， 檢查試驗(yàn)菌的生長(zhǎng)情根據(jù)試驗(yàn)菌的特點(diǎn)， 若肉湯培養(yǎng)基變混濁， 或肉湯表面有菌生長(zhǎng)， 或試管底部有沉淀， 則說明有菌生結(jié)果記錄為可復(fù)蘇試驗(yàn)菌的染菌載體數(shù)與每次暴露于亞致死劑量的染菌載體數(shù)之比。C3況么C4 附錄D ( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)用有限S p e a r m a n - K a r b e r 法計(jì)算 D值D 1 計(jì)算 D值 注1 6 有限S p e a r m a n - K a r b e r 法要求。 遞次暴露水平不同， 但間隔( d ) 固 定， 而且每次基璐中 使用同 樣的試樣的數(shù)目 ( n ) 相同D 1 . 1 所選暴露間隔或水平( U U z ， 一， U k ) 必須搜蓋整個(gè)部分陰性區(qū)域， 初始暴礴( U, ) 必須顯示無一樣品無菌或r =0 。 最終暴露( U k ) 必須是全部樣品無菌或r =n 。 若在U : 前的暴露中樣品無陰性( r =0 ) ,而在U、 后的暴露中樣品完全陰性( r =n ) ， 在U， 和U 、 之間至少有兩部分反應(yīng)間隔( r 0 且r n ) ， 則試驗(yàn)才算有效。用下面公式計(jì)算直至無菌的平均暴露( U, k ) 或有限S p e a r ma n : K a r b e r 法估算:U d d=U k 一萬一 n式中: U . k 直至無菌的平均基露( 有限S p e a r m a n - K a r b e r 法估算) ; U k 最初顯示全部樣品無苗的暴露, r k =n 1 ， 暴露的時(shí)間或劑量; d - 一 暴露之間的時(shí)間或劑量間隔( 見注 1 6 ) 1 。 每次暴露時(shí)生物指示物試樣的數(shù)目; r . 每次暴露達(dá)到無菌試樣數(shù) 目; U , 無一個(gè)生物指示物為陰性的最長(zhǎng)暴露, r =0 ; U k 在 U ， 之前的一次暴茲 ;G B 1 8 2 8 1 . 1 -2 0 0 0 藝r 在 U、 和 Uk - , 之間所有暴露中無菌的生物指示物數(shù)( r ) 的總和D 1 . 2 通過下面公式計(jì)算 D值D值 = U, kI g No + 0 . 2 5 0 7式中U , k - 一 一直至無菌的平均暴露;No 一 通過全部活菌計(jì)數(shù)測(cè)得的每個(gè)生物指示物上的平均活芽胞數(shù)。用有限S p e a r m a n - K a r b e r 法計(jì)算認(rèn)k 的方差、 標(biāo)準(zhǔn)差和可信區(qū)間注1 7 : 有限S p e a r m a n - K a r b e r 計(jì)算方法使得計(jì)算認(rèn)* 的方差成為可能， 再推算標(biāo)準(zhǔn)差和可信區(qū)間.1 按下面公式計(jì)算U、 的方差即( U , k ) .勺，LDD d2U ,k “n ( n -石X 藝r ; ( n一r )式中 :d -暴露之間的時(shí)間或劑量間隔;， 每次基露試樣的數(shù) 目;r - 一 每次暴露無菌試樣的數(shù)目;藝r . ( n -r , ) U , 和 U k - ， 之間每次暴露 r乘以( n -r ) 值的總和D 2 . 2 按下面公式計(jì)算U , 的標(biāo)準(zhǔn)差( S D , , , ) :S D I ,、 一 創(chuàng) 瓦一D 2 . 3 用U ,k 的 上、 下可信區(qū)間( U ,k 的 可信區(qū)間是U , k 士2 S D c , ; P = 0 . 9 5 ) 計(jì)算D值的上、 下可信區(qū)間公式 :U , k 的下限, D值= U, kI g No +O . 2 5 0 7U* 的上限: D值= U, kI g Np +O . 2 5 0 7 附錄E ( 標(biāo)準(zhǔn)的附錄)存活一 殺滅反應(yīng)特點(diǎn) 注 1 8 : 監(jiān)測(cè)部分生物學(xué)監(jiān)測(cè)籍的存話一 殺滅反應(yīng)特點(diǎn)， 可為該批所有生物指示物性能一致提供保證的又一方法。E l 由建立存活菌曲線或部分陰性分析( 見附錄B和附錄D) 計(jì)算的D值， 都可用于計(jì)算存活和殺滅的時(shí)間或劑量E 2 必須至少用 5 0 個(gè)相同的試樣 ， 證實(shí)存活時(shí)間或存活劑量和殺滅時(shí)間或殺滅劑量。E 3 在進(jìn)行存活時(shí)間或存活劑量和殺滅時(shí)間或殺滅劑量測(cè)定中， 應(yīng)至少用5 0 個(gè)相同的試樣。 所標(biāo)明的每個(gè)樣品上( 中) 試驗(yàn)菌存活的暴露時(shí)間或劑量， 表示存活特性。 所標(biāo)明的每個(gè)樣品上( 中) 殺滅所有菌的暴露時(shí)間或劑量， 表示殺滅特性。E Q 存活一 殺滅反應(yīng)特點(diǎn)必須用生物指示物抗力測(cè)定器測(cè)定。存活和殺滅的時(shí)間或劑量被表示為: 存活時(shí)間或存活劑量)( 館 No -2 ) X D值 殺滅時(shí)間或殺滅劑量G( I