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文檔簡介
第1節(jié)DNA是主要的遺傳物質(zhì)第3章基因的本質(zhì)一、對遺傳物質(zhì)的早期推測1.20世紀(jì)20年代①大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì);②依據(jù):氨基酸多種多樣的排列順序,可能蘊含著遺傳信息。2.20世紀(jì)30年代①認(rèn)識到DNA由許多脫氧核苷酸聚合而成;②組成DNA的脫氧核苷酸有4種(圖3-1);③局限:對DNA的結(jié)構(gòu)沒有清晰地了解。美·列文
“四核苷酸假說”1944年,美·艾弗里1928年,英·格里菲思二、肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實驗S型R型菌落菌體有無致病性(一)肺炎鏈球菌R型菌(菌落粗糙)表面光滑表面粗糙有多糖類的莢膜無多糖類的莢膜有無(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗1.科學(xué)家:格里菲斯2.實驗過程(圖3-2)3.分析:(1)第1組實驗說明:R型活細(xì)菌無致病性;(2)第2組實驗說明:S型活細(xì)菌有致病性;(3)第3組實驗說明:加熱致死的S型細(xì)菌無致病性;1.第4組小鼠的直接死因是什么?2.從小鼠體內(nèi)分離出的S型活菌來源于什么?3.從小鼠體內(nèi)只分離出了S型活菌嗎?思考S型活菌R型活菌轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)化后的S型菌增殖;不是,還有R型活菌,且R型菌更多。(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗1.科學(xué)家:格里菲斯2.實驗過程(圖3-2)3.分析:(1)第1組實驗說明:R型活細(xì)菌無致病性;(2)第2組實驗說明:S型活細(xì)菌有致病性;(3)第3組實驗說明:加熱致死的S型細(xì)菌無致病性;(4)第4組實驗說明:R型活細(xì)菌與加熱致死的S型細(xì)菌混合后,產(chǎn)生了S型活細(xì)菌,導(dǎo)致小鼠死亡。4.實驗結(jié)論:加熱致死的S型細(xì)菌,含有某種促使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌的物質(zhì)——轉(zhuǎn)化因子。這種轉(zhuǎn)化因子究竟是什么物質(zhì)呢?(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗關(guān)鍵思路:把S型細(xì)菌的各種物質(zhì)分開,單獨的、直接的觀察它們各自的作用。糖類
脂質(zhì)
蛋白質(zhì)RNA
DNA加熱殺死的S型細(xì)菌哪一個是“轉(zhuǎn)化因子”呢?(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實驗過程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對照實驗①對照組:對S型菌的提取液不作任何處理。有R型細(xì)菌的培養(yǎng)基S型S型細(xì)菌的提取物R型第一組(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實驗過程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對照實驗①對照組:對S型菌的提取液不作任何處理。②實驗組:分別用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶處理。(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實驗過程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對照實驗①對照組:對S型菌的提取液不作任何處理。②實驗組:分別用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶處理。轉(zhuǎn)化因子很可能是DNA(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗3.結(jié)論:
DNA才是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)。4.局限:提取的DNA不純,且對DNA的結(jié)構(gòu)沒有很清晰的了解。
艾弗里等人進(jìn)一步分析了細(xì)胞提取物的理化特性,
發(fā)現(xiàn)這些特性都與DNA的極為相似。S型細(xì)菌的提取物三、科學(xué)方法“減法原理”艾弗里的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實驗中,每個實驗組特異性地去除了一種物質(zhì),從而鑒定出DNA是遺傳物質(zhì)?!凹臃ㄔ怼迸c常態(tài)相比,人為增加某種影響因素的稱為“減法原理”。與常態(tài)相比,人為去除某種影響因素的稱為“減法原理”。eg在“比較過氧化氫在不同條件下的分解”的實驗中,與對照組相比,實驗組分別作加溫、滴加FeCl3溶液、滴加肝臟研磨液的處理,就利用了“加法原理”。吸附合成組裝釋放注入遺傳物質(zhì)?(一)科學(xué)家:赫爾希和蔡斯(二)實驗材料:T2噬菌體1.成分:DNA和蛋白質(zhì)2.生活方式
是一種專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)的病毒;3.增殖特點C、H、O、N、PC、H、O、N、S四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗噬菌體侵染大腸桿菌四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗(三)探究T2噬菌體侵染細(xì)菌時注入細(xì)菌的成分1.提出問題:T2噬菌體侵染細(xì)菌時注入細(xì)菌的成分是什么?2.作出假說:
假說一
;
假說二
;
假說三
;只注入DNA只注入蛋白質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)一起注入3.設(shè)計實驗問題1:DNA和蛋白質(zhì)是肉眼看不見的分子,如何觀察它們是否注入細(xì)菌?(1)方法:放射性同位素標(biāo)記技術(shù)注:只能檢測放射性的強弱,不能區(qū)別具體是哪種元素的放射性。四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗蛋白質(zhì):C、H、O、N、SDNA:C、H、O、N、P問題2:標(biāo)記噬菌體的哪種元素才能將DNA與蛋白質(zhì)區(qū)分開?(2)標(biāo)記元素:35S---蛋白質(zhì)
32P---DNA問題3:能用含放射性原料的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)噬菌體嗎?
怎樣標(biāo)記噬菌體?3.設(shè)計實驗四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗不能大腸桿菌含35S的培養(yǎng)基T2噬菌體裂解釋放含35S的原料四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗大腸桿菌含32P的培養(yǎng)基T2噬菌體含32P的原料裂解釋放四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗3.設(shè)計實驗四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗(3)實驗步驟①標(biāo)記噬菌體a.分別用含有35S和32P的培養(yǎng)基來培養(yǎng)大腸桿菌;b.再用上述大腸桿菌來培養(yǎng)T2噬菌體。35S標(biāo)記的T2噬菌體32P標(biāo)記的T2噬菌體四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗有標(biāo)記的噬菌體未標(biāo)記的大腸桿菌②用35S或32P標(biāo)記的T2噬菌體分別侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗eg
35S標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌只注入DNA只注入蛋白質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)一起注入上清液沉淀物四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗③短時間保溫后,用攪拌器攪拌
④離心假說一假說二假說三四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗4.預(yù)期實驗結(jié)果有無有無有無有無有無有無5.實驗驗證假說一假說一和三6.實驗結(jié)論:噬菌體注入細(xì)菌的成分是DNA;
DNA才是T2噬菌體的遺傳物質(zhì)。四、噬菌體侵染細(xì)菌的實驗(四)分析1.形成子代噬菌體時:(1)模板來自
;(2)原料、能量、場所等由
提供;2.誤差分析(1)標(biāo)記35S的一組實驗中,沉淀物有放射性的原因?(2)標(biāo)記32P的一組實驗中,上清液有放射性的原因?
①保溫時間過短,親代噬菌體還未侵染到大腸桿菌;
②保溫時間過長,部分子代噬菌體被釋放出來。攪拌不充分噬菌體大腸桿菌五、煙草花葉病毒的侵染實驗正常花葉病RNA蛋白質(zhì)結(jié)論:RNA是煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)。病毒RNA病毒DNA病毒真核生物原核生物生物DNA是遺傳物質(zhì)RNA是遺傳物質(zhì)(生物界
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