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第1節(jié)DNA是主要的遺傳物質(zhì)第3章基因的本質(zhì)一、對(duì)遺傳物質(zhì)的早期推測(cè)1.20世紀(jì)20年代①大多數(shù)科學(xué)家認(rèn)為蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì);②依據(jù):氨基酸多種多樣的排列順序,可能蘊(yùn)含著遺傳信息。2.20世紀(jì)30年代①認(rèn)識(shí)到DNA由許多脫氧核苷酸聚合而成;②組成DNA的脫氧核苷酸有4種(圖3-1);③局限:對(duì)DNA的結(jié)構(gòu)沒(méi)有清晰地了解。美·列文
“四核苷酸假說(shuō)”1944年,美·艾弗里1928年,英·格里菲思二、肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)S型R型菌落菌體有無(wú)致病性(一)肺炎鏈球菌R型菌(菌落粗糙)表面光滑表面粗糙有多糖類的莢膜無(wú)多糖類的莢膜有無(wú)(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.科學(xué)家:格里菲斯2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程(圖3-2)3.分析:(1)第1組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:R型活細(xì)菌無(wú)致病性;(2)第2組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:S型活細(xì)菌有致病性;(3)第3組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:加熱致死的S型細(xì)菌無(wú)致病性;1.第4組小鼠的直接死因是什么?2.從小鼠體內(nèi)分離出的S型活菌來(lái)源于什么?3.從小鼠體內(nèi)只分離出了S型活菌嗎?思考S型活菌R型活菌轉(zhuǎn)化;轉(zhuǎn)化后的S型菌增殖;不是,還有R型活菌,且R型菌更多。(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.科學(xué)家:格里菲斯2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程(圖3-2)3.分析:(1)第1組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:R型活細(xì)菌無(wú)致病性;(2)第2組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:S型活細(xì)菌有致病性;(3)第3組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:加熱致死的S型細(xì)菌無(wú)致病性;(4)第4組實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:R型活細(xì)菌與加熱致死的S型細(xì)菌混合后,產(chǎn)生了S型活細(xì)菌,導(dǎo)致小鼠死亡。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論:加熱致死的S型細(xì)菌,含有某種促使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型活細(xì)菌的物質(zhì)——轉(zhuǎn)化因子。這種轉(zhuǎn)化因子究竟是什么物質(zhì)呢?(二)肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵思路:把S型細(xì)菌的各種物質(zhì)分開,單獨(dú)的、直接的觀察它們各自的作用。糖類
脂質(zhì)
蛋白質(zhì)RNA
DNA加熱殺死的S型細(xì)菌哪一個(gè)是“轉(zhuǎn)化因子”呢?(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)①對(duì)照組:對(duì)S型菌的提取液不作任何處理。有R型細(xì)菌的培養(yǎng)基S型S型細(xì)菌的提取物R型第一組(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)①對(duì)照組:對(duì)S型菌的提取液不作任何處理。②實(shí)驗(yàn)組:分別用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶處理。(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1.科學(xué)家:艾弗里及其同事2.實(shí)驗(yàn)過(guò)程(1)制備提取物①將加熱致死的S型細(xì)菌破碎②設(shè)法除去絕大多數(shù)的糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)(2)設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)①對(duì)照組:對(duì)S型菌的提取液不作任何處理。②實(shí)驗(yàn)組:分別用蛋白酶、RNA酶、酯酶和
DNA酶處理。轉(zhuǎn)化因子很可能是DNA(三)肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)3.結(jié)論:
DNA才是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)。4.局限:提取的DNA不純,且對(duì)DNA的結(jié)構(gòu)沒(méi)有很清晰的了解。
艾弗里等人進(jìn)一步分析了細(xì)胞提取物的理化特性,
發(fā)現(xiàn)這些特性都與DNA的極為相似。S型細(xì)菌的提取物三、科學(xué)方法“減法原理”艾弗里的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組特異性地去除了一種物質(zhì),從而鑒定出DNA是遺傳物質(zhì)?!凹臃ㄔ怼迸c常態(tài)相比,人為增加某種影響因素的稱為“減法原理”。與常態(tài)相比,人為去除某種影響因素的稱為“減法原理”。eg在“比較過(guò)氧化氫在不同條件下的分解”的實(shí)驗(yàn)中,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組分別作加溫、滴加FeCl3溶液、滴加肝臟研磨液的處理,就利用了“加法原理”。吸附合成組裝釋放注入遺傳物質(zhì)?(一)科學(xué)家:赫爾希和蔡斯(二)實(shí)驗(yàn)材料:T2噬菌體1.成分:DNA和蛋白質(zhì)2.生活方式
是一種專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)的病毒;3.增殖特點(diǎn)C、H、O、N、PC、H、O、N、S四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)噬菌體侵染大腸桿菌四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(三)探究T2噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)注入細(xì)菌的成分1.提出問(wèn)題:T2噬菌體侵染細(xì)菌時(shí)注入細(xì)菌的成分是什么?2.作出假說(shuō):
假說(shuō)一
;
假說(shuō)二
;
假說(shuō)三
;只注入DNA只注入蛋白質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)一起注入3.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題1:DNA和蛋白質(zhì)是肉眼看不見的分子,如何觀察它們是否注入細(xì)菌?(1)方法:放射性同位素標(biāo)記技術(shù)注:只能檢測(cè)放射性的強(qiáng)弱,不能區(qū)別具體是哪種元素的放射性。四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì):C、H、O、N、SDNA:C、H、O、N、P問(wèn)題2:標(biāo)記噬菌體的哪種元素才能將DNA與蛋白質(zhì)區(qū)分開?(2)標(biāo)記元素:35S---蛋白質(zhì)
32P---DNA問(wèn)題3:能用含放射性原料的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)噬菌體嗎?
怎樣標(biāo)記噬菌體?3.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)不能大腸桿菌含35S的培養(yǎng)基T2噬菌體裂解釋放含35S的原料四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)大腸桿菌含32P的培養(yǎng)基T2噬菌體含32P的原料裂解釋放四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)3.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(3)實(shí)驗(yàn)步驟①標(biāo)記噬菌體a.分別用含有35S和32P的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)大腸桿菌;b.再用上述大腸桿菌來(lái)培養(yǎng)T2噬菌體。35S標(biāo)記的T2噬菌體32P標(biāo)記的T2噬菌體四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)有標(biāo)記的噬菌體未標(biāo)記的大腸桿菌②用35S或32P標(biāo)記的T2噬菌體分別侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)eg
35S標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌只注入DNA只注入蛋白質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)一起注入上清液沉淀物四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)③短時(shí)間保溫后,用攪拌器攪拌
④離心假說(shuō)一假說(shuō)二假說(shuō)三四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)4.預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果有無(wú)有無(wú)有無(wú)有無(wú)有無(wú)有無(wú)5.實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證假說(shuō)一假說(shuō)一和三6.實(shí)驗(yàn)結(jié)論:噬菌體注入細(xì)菌的成分是DNA;
DNA才是T2噬菌體的遺傳物質(zhì)。四、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(四)分析1.形成子代噬菌體時(shí):(1)模板來(lái)自
;(2)原料、能量、場(chǎng)所等由
提供;2.誤差分析(1)標(biāo)記35S的一組實(shí)驗(yàn)中,沉淀物有放射性的原因?(2)標(biāo)記32P的一組實(shí)驗(yàn)中,上清液有放射性的原因?
①保溫時(shí)間過(guò)短,親代噬菌體還未侵染到大腸桿菌;
②保溫時(shí)間過(guò)長(zhǎng),部分子代噬菌體被釋放出來(lái)。攪拌不充分噬菌體大腸桿菌五、煙草花葉病毒的侵染實(shí)驗(yàn)正?;ㄈ~病RNA蛋白質(zhì)結(jié)論:RNA是煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)。病毒RNA病毒DNA病毒真核生物原核生物生物DNA是遺傳物質(zhì)RNA是遺傳物質(zhì)(生物界
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