GB+7300.902-2022飼料添加劑 第9部分：著色劑 ββ-胡蘿卜素-4,4-二酮 (斑蝥黃)

CCSB46中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)代替-,4-x2022-07-13發(fā)布2023-08-01實(shí)施國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)ⅠGB7300.902—2022本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件為GB7300《飼料添加劑》的第902部分。GB7300已經(jīng)發(fā)布了以下部分：—第1部分：氨基酸、氨基酸鹽及其類似物L(fēng)-蘇氨酸(GB7300.101);—第1部分：氨基酸、氨基酸鹽及其類似物甘氨酸(GB7300.102);—第1部分：氨基酸、氨基酸鹽及其類似物蛋氨酸羥基類似物(GB7300.103);—第2部分：維生素及類維生素L-抗壞血酸-2-磷酸酯鹽(GB7300.201);—第2部分：維生素及類維生素維生素D3油(GB7300.202);—第2部分：維生素及類維生素甜菜堿(GB7300.203); 第2部分：維生素及類維生素甜菜堿鹽酸鹽(GB7300.204);—第3部分：礦物元素及其絡(luò)（螯）合物碘化鉀(GB7300.301);—第3部分：礦物元素及其絡(luò)（螯）合物亞硒酸鈉(GB7300.302);—第4部分：酶制劑木聚糖酶(GB7300.401);—第4部分：酶制劑植酸酶(GB7300.402);—第5部分：微生物釀酒酵母(GB7300.501);—第6部分：非蛋白氮尿素(GB7300.601);—第8部分：防腐劑、防霉劑和酸度調(diào)節(jié)劑碳酸氫鈉(GB7300.801);—第10部分：調(diào)味和誘食物質(zhì)谷氨酸鈉(GB7300.1001);—第10部分：調(diào)味和誘食物質(zhì)大蒜素(GB7300.1002)。本文件代替飼料添加劑斑螯黃與GB/T18970—2003相比，除編輯性修改外，主要技術(shù)變化如下：a)增加了以維生素A乙酸酯或β-胡蘿卜素為主要原料，經(jīng)化學(xué)合成制得的飼料添加劑β,β-胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）96型的技術(shù)要求，以及與之相關(guān)的所有內(nèi)容；d)增加了粒度0.42mm的分析篩的要求e)增加三苯基氧膦、二氯甲烷和總砷的指標(biāo)（見表1和表2)及相應(yīng)的測(cè)定方法（見7.8、7.9和g)增加了保質(zhì)期的規(guī)定（見9.5)。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出并歸口。本文件所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：—GB/T18970—2003。ⅡGB7300.902—2022飼料添加劑是指在飼料加工、制作、使用過程中添加的少量或者微量物質(zhì)，包括營(yíng)養(yǎng)性飼料添加劑和一般飼料添加劑。為便于使用，按照產(chǎn)品類別，GB7300《飼料添加劑》分為以下13個(gè)大類：—氨基酸、氨基酸鹽及其類似物；—維生素及類維生素；—酶制劑；—微生物；—非蛋白氮；—抗氧化劑；—防腐劑、防霉劑和酸度調(diào)節(jié)劑；—著色劑；—調(diào)味和誘食物質(zhì)；—粘結(jié)劑、抗結(jié)塊劑、穩(wěn)定劑和乳化劑；—多糖和寡糖；—其他。胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）是此大類第二個(gè)發(fā)布的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，所以本文件以GB7300.902編號(hào)，作為GB7300的第902部分。1GB7300.902—2022飼料添加劑第9部分：著色劑二酮（斑婺黃）本文件規(guī)定了飼料添加劑β,β-胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）產(chǎn)品的技術(shù)要求、取樣、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)本文件適用于以維生素A乙酸酯或β-胡蘿卜素為主要原料，經(jīng)化學(xué)合成制得的飼料添加劑β,β-胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）96型；以及以96型產(chǎn)品為原料，經(jīng)二氯甲烷溶解，加入飼料原料明膠或淀粉或飼料添加劑木質(zhì)素磺酸鹽等，噴霧干燥制得的飼料添加劑β,β-胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）10型。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB1886.78—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑番茄紅素（合成）GB/T5917.1飼料粉碎粒度測(cè)定兩層篩篩分法GB/T6040紅外光譜分析方法通則GB/T6435—2014飼料中水分的測(cè)定GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定GB10648飼料標(biāo)簽GB/T13079飼料中總砷的測(cè)定GB/T13080飼料中鉛的測(cè)定原子吸收光譜法GB/T13081飼料中汞的測(cè)定GB/T14699.1飼料采樣中華人民共和國(guó)獸藥典一部(2020年版）3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4化學(xué)名稱、分子式、相對(duì)分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)式胡蘿卜素-4,4-二酮（斑螯黃）相對(duì)分子質(zhì)量：564.85（按2016年國(guó)際相對(duì)原子質(zhì)量）2GB7300.902—2022結(jié)構(gòu)式：5技術(shù)要求96型為紫紅色至紫褐色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；10型為紅色至紫紅色的流動(dòng)性粉末狀微粒。96型的光譜特征，應(yīng)符合斑螯黃紅外掃描光譜的特征；10型的光譜特征，應(yīng)符合斑螯黃紫外可見光掃描光譜的特征。5.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表1的要求。項(xiàng)目類型與指標(biāo)干燥失重/%≤ 8粒度通過孔徑為0.84mm的分析篩/%≥ 通過孔徑為0.42mm的分析篩/%≥ 熾灼殘?jiān)?%≤02 其他類胡蘿卜素/%≤5 三苯基氧膦(TPPO)/%≤二氯甲烷/(mg/kg)≤應(yīng)符合表2的要求。表2衛(wèi)生指標(biāo)項(xiàng)目類型與指標(biāo)鉛≤3GB7300.902—2022表2衛(wèi)生指標(biāo)（續(xù)）項(xiàng)目類型與指標(biāo)總砷（以As計(jì)）/(mg/kg)≤33≤1—按GB/T14699.1規(guī)定執(zhí)行。充分混勻，裝入磨口瓶中，備用。7試驗(yàn)方法除非另有規(guī)定，僅使用分析純?cè)噭Ｈ∵m量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下觀察其色澤和形態(tài)。96型按照GB/T6040規(guī)定進(jìn)行紅外掃描，斑螯黃標(biāo)準(zhǔn)品光譜特征應(yīng)符合附錄A圖A.1。10型取7.3.2.4.3中試液在220nm~560nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外可見光掃描，光譜特征應(yīng)符合附錄A圖A.2。二酮（斑婺黃）試樣用三氯甲烷提取，在波長(zhǎng)468nm~472nm之間有最大吸收峰，根據(jù)朗伯-比爾定律，其吸收強(qiáng)度和試液濃度成正比，根據(jù)吸收強(qiáng)度測(cè)定其含量。分析天平感量為平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣50mg（精確至0.1mg)于100mL棕色容量瓶中，加入10mL三氯甲烷溶解，用環(huán)己烷定容至刻度，混勻，作為試液。4GB7300.902—2022準(zhǔn)確移取試液5mL于100mL棕色容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，混勻，作為待稀釋溶液。準(zhǔn)確移取待稀釋溶液5mL于50mL棕色容量瓶中，用環(huán)己烷定容至刻度，混勻，作為待測(cè)試液。用1cm的比色皿，以環(huán)己烷為空白參照，在468nm~472nm波長(zhǎng)處測(cè)定待測(cè)試液的最大吸收試樣中斑螯黃含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)狑1計(jì)，數(shù)值以％表示，按公式(1)計(jì)算：式中：犃1—試樣溶液測(cè)得的最大吸收值；20000—稀釋倍數(shù)；—試樣的質(zhì)量，單位為克(g);試樣中斑螯黃的標(biāo)準(zhǔn)百分消光值(1%,1cm)。測(cè)定結(jié)果以平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字。在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于2%。試樣用水溶解后，用無水乙醇和二氯甲烷提取，在波長(zhǎng)470nm~476nm之間有最大吸收峰，根據(jù)朗伯-比耳定律，其吸收強(qiáng)度和試液濃度成正比，根據(jù)吸收強(qiáng)度測(cè)定其含量。7.3.2.2.1水：GB/T6682,三級(jí)。7.3.2.2.2無水乙醇。7.3.2.2.3二氯甲烷。7.3.2.2.4環(huán)己烷。7.3.2.2.5無水乙醇環(huán)己烷溶液：無水乙醇和環(huán)己烷的體積比為1∶9。分析天平感量為離心機(jī)可達(dá)到5GB7300.902—2022平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣0.1g（精確至0.1mg)于100mL棕色容量瓶中，加入5mL水，在60℃條件下超聲溶解5min,迅速冷卻至室溫，加50mL無水乙醇，然后用二氯甲烷稀釋定容，混勻，作為試液。移取試液適量，4000r/min離心5min。準(zhǔn)確移取1mL上清液于50mL棕色容量瓶中，用無水乙醇環(huán)己烷溶液稀釋至刻度，作為待測(cè)試液。用1cm的比色皿，以環(huán)己烷為空白參照，在波長(zhǎng)470nm~476nm之間測(cè)定待測(cè)試液的最大吸收試樣中斑螯黃含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)狑2計(jì)，數(shù)值以％表示，按公式(2)計(jì)算：式中：犃2—試樣溶液測(cè)得的最大吸收值；5000—稀釋倍數(shù)；—試樣的質(zhì)量，單位為克(g);試樣中斑螯黃的標(biāo)準(zhǔn)百分消光值(1%,1cm)。測(cè)定結(jié)果以平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留3位有效數(shù)字。在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不大于0.5%。平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣1g（精確到0.1mg),按GB/T6435—2014中8.1規(guī)定執(zhí)行。按GB/T5917.1規(guī)定執(zhí)行。按《中華人民共和國(guó)獸藥典一部(2020年版）》熾灼殘?jiān)ǎǜ戒?841)規(guī)定執(zhí)行。其中稱樣量為1g,放冷后加2mL硝酸和1mL硫酸使其濕潤(rùn)。試樣用三氯甲烷提取，在波長(zhǎng)470nm處斑螯黃和其他類胡蘿卜素有吸收峰，用面積歸一法計(jì)算其6GB7300.902—2022他類胡蘿卜素的含量。濾膜有機(jī)相。7.7.3.1液相色譜儀：配紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。準(zhǔn)確移取7.3.1.4.1中的試液5mL于50mL的棕色容量瓶中，用乙腈定容至刻度，搖勻。過0.45μm濾膜，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，確定斑螯黃的保留時(shí)間。斑螯黃產(chǎn)品液相色譜圖見7.7.4.2溶劑峰及雜質(zhì)峰測(cè)定在100mL的容量瓶中加入10mL三氯甲烷，用環(huán)己烷定容至刻度，搖勻。準(zhǔn)確移取5mL于50mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，搖勻。過0.45μm濾膜，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，與7.7.4.3液相色譜參考條件色譜柱,柱長(zhǎng)內(nèi)徑粒徑流動(dòng)相：乙腈和水的體積比為95∶5。流速進(jìn)樣量：20μL。運(yùn)行時(shí)間：40min。7.7.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理試樣中其他類胡蘿卜素含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)∞3計(jì)，數(shù)值以％表示，按公式(3)計(jì)算：式中：Ax—試樣中除斑螯黃組分和溶劑峰及引入雜峰以外的其他峰面積之和；Ay—試樣中斑螯黃組分的面積之和。測(cè)定結(jié)果以平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字。1)本文件中的SymmetryshieldRP-18是由美國(guó)沃特世(Waters)公司提供的色譜柱商品名。給出這一信息是為了方便本文件的使用者，并不表示對(duì)該產(chǎn)品的認(rèn)可。如果其他產(chǎn)品具有相同的效果，則可使用這些等效產(chǎn)品。7GB7300.902—2022在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對(duì)差值不大于該算術(shù)平均值的10%。平行做兩份試驗(yàn)。準(zhǔn)確稱取試樣0.5g（精確至0.1mg)于100mL容量瓶中，加入5mL水，在60℃條件下超聲溶解5min,迅速冷卻，加50mL的無水乙醇，然后用二氯甲烷稀釋至刻度，混勻。取適量試液于4000r/min條件下離心5min。準(zhǔn)確移取50mL上清液于100mL雞心瓶中，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60℃水浴蒸餾至干（如有少量水分不能蒸除，可在雞心瓶中加入適量的無水乙醇繼續(xù)蒸餾，直至瓶中溶劑蒸干）。準(zhǔn)確移取10mL色譜純四氫呋喃溶解殘?jiān)?，取試液適量，過0.45μm濾膜后待測(cè)。液相色譜條件按GB1886.78—2016附錄A中A.5規(guī)定執(zhí)行。在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對(duì)差值不大于該算術(shù)平均值的10%。試樣用甲苯（或二甲基亞砜）溶解后，于頂空裝置中，使二氯甲烷充分氣化達(dá)到平衡，經(jīng)頂空自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣后氣相色譜法測(cè)定，外標(biāo)法定量。7.9.2.396型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：準(zhǔn)確稱取二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)品（純度大于或等于99%)0.2g（精確至0.1mg)于預(yù)先加入約30mL甲苯的100mL棕色容量瓶中，充分振蕩搖勻，用甲苯定容至刻度，混勻。該溶液的質(zhì)量濃度為2mg/mL?，F(xiàn)用現(xiàn)配。7.9.2.496型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：準(zhǔn)確移取二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液適量，用甲苯稀釋成質(zhì)量濃度分別為的二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?，F(xiàn)用現(xiàn)配。7.9.2.510型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：準(zhǔn)確稱取二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)品（純度大于或等于99%)0.2g（精確至0.1mg)于預(yù)先加入約30mL二甲基亞砜的100mL棕色容量瓶中，充分振蕩搖勻，用二甲基亞砜定容至刻度，混勻。該溶液的質(zhì)量濃度為2mg/mL。現(xiàn)用現(xiàn)配。7.9.2.610型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：準(zhǔn)確移取二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液適量，用二甲基亞砜稀釋成質(zhì)量濃度分別為和的二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?，F(xiàn)用現(xiàn)配。分析天平感量為8GB7300.902—20227.9.3.3氣相色譜儀：配氫火焰檢測(cè)器。頂空進(jìn)樣瓶苯，蓋緊瓶蓋，振搖試樣至分散，放置于60℃超聲波提取儀中超聲30min,直至試樣完全溶解（可用強(qiáng)光照射觀察樣品溶液，如有不溶物，可以加溫、加長(zhǎng)超聲時(shí)間，直至樣品完全溶解）。混勻待用。平行做兩份試驗(yàn)。稱取試樣0.1g（精確至0.1mg)于20mL頂空進(jìn)樣瓶中，準(zhǔn)確加入4mL二甲基亞砜，蓋緊瓶蓋，振搖試樣至分散，放置于60℃超聲波提取儀中超聲30min,直至試樣完全分散均勻（可用強(qiáng)光照射觀察樣品溶液，如有不溶物，可以加溫、加長(zhǎng)超聲時(shí)間，直至樣品完全分散均勻）。混勻待用。7.9.4.3氣相色譜參考條件色譜柱：固定相為(6%-氰丙基-苯基）甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱，柱長(zhǎng)30m,內(nèi)徑0.5mm,膜厚0.25μm,或性能相當(dāng)者。流速進(jìn)樣模式：分流進(jìn)樣。柱溫箱溫度保持升溫到保持頂空樣品爐溫度：100℃。7.9.4.4標(biāo)準(zhǔn)系列溶液測(cè)定在儀器的最佳條件下，準(zhǔn)確移取96型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液10mL、10型產(chǎn)品二氯甲烷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液4mL分別于20mL頂空進(jìn)樣瓶中，立即蓋緊瓶蓋，壓緊。放置到100℃頂空裝置的平衡室中平衡30min,然后測(cè)定。30min,然后測(cè)定。7.9.5試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理試樣中二氯甲烷含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)狑4計(jì)，數(shù)值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(4)計(jì)算：犿49GB7300.902—2022式中：s—標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的試液中二氯甲烷的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);V—試樣稀釋的體積，單位為毫升(mL);m4—試樣的質(zhì)量，單位為克(g)。測(cè)定結(jié)果以平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留3位有效數(shù)字。在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對(duì)差值不大于該算術(shù)平均值的10%。按GB/T13080規(guī)定執(zhí)行。按GB/T13079規(guī)定執(zhí)行。按GB/T13081規(guī)定執(zhí)行。8檢驗(yàn)規(guī)則組批