生物化學與分子生物學：生化專題

生化專題

基因表達調控一、基因表達的概念基因組(genome):一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因?；虮磉_(geneexpression)：基因經過轉錄、翻譯，產生具有特異生物學功能的蛋白質分子的過程。全部表達都會翻譯么？tRNArRNA

2007A-168.基因組是指A、以轉錄組學為基礎的研究領域B、一種生物體具有的所有遺傳信息的總和C、研究基因的結構,功能及表達產物的學科領域D、包過轉錄組學和蛋白質組學等內容的科學領域答案：B解析：一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息或整套基因稱為基因組。2002A-29．下列關于“基因表達”概念的敘述，錯誤的是

A．基因表達具有組織特異性B．基因表達具有階段特異性

C．基因表達均經歷基因轉錄及翻譯過程

D.某些基因表達產物是蛋白質分子

E.有些基因表達水平受環(huán)境變化影響答案：C

基因表達的多級調控基因激活轉錄起始轉錄起始轉錄后加工mRNA降解

蛋白質降解等蛋白質翻譯翻譯后加工修飾2009A-38.基因調控的基本控制點是A.mRNA從細胞轉運到細胞質B.轉錄起始C.轉錄后加工D.蛋白質翻譯及翻譯后加工答案：B二、基因表達的時間性及空間性（一）時間特異性按功能需要，某一特定基因的表達嚴格按特定的時間順序發(fā)生，稱為基因表達的時間特異性。多細胞生物基因表達的時間特異性又稱階段特異性。從侵入細菌到溶菌不同階段，噬菌體DNA的表達表現為：A、細胞特異性B、組織特異性C、空間特異性D、階段特異性答案：D（二）空間特異性在個體生長全過程，某種基因產物在個體按不同組織空間順序出現，稱之為基因表達的空間特異性?；虮磉_伴隨時間順序所表現出的這種分布差異，實際上是由細胞在器官的分布決定的，所以空間特異性又稱細胞或組織特異性。三、基因表達的方式按對刺激的反應性，基因表達的方式分為：（一）組成性表達:某些基因在一個個體的幾乎所有細胞中持續(xù)表達，被稱為管家基因。管家基因較少受環(huán)境因素影響，在個體各個生長階段的大多數或幾乎全部組織中持續(xù)表達被視為組成性基因表達。2010A-37．組成性基因表達的正確含義是A．在大多數細胞中持續(xù)恒定表達

B．受多種機制調節(jié)的基因表達c．可誘導基因表達D．空間特異性基因表達答案：A（二）誘導和阻遏表達在特定環(huán)境信號刺激下，相應的基因被激活，基因表達產物增加，這種基因稱為可誘導基因?？烧T導基因在特定環(huán)境中表達增強的過程，稱為誘導。如果基因對環(huán)境信號應答是被抑制，這種基因是可阻遏基因?？勺瓒艋虮磉_產物水平降低的過程稱為阻遏。

基因工程在體外將目的DNA片段與能自主復制的載體連接，形成重組DNA分子，進而在受體細胞中復制、擴增，從而獲得單一DNA分子的大量拷貝。工具酶功能限制性核酸內切酶識別特異序列，切割DNADNA連接酶使DNA切口封合或使兩個DNA分子或片段連接堿性磷酸酶切除末端磷酸基反轉錄酶合成cDNA；替代DNA聚合酶I進行填補，標記或DNA序列分析末端轉移酶

3′羥基末端進行同聚物加尾DNA聚合酶Ⅰ合成雙鏈cDNA分子或片段連接；缺口平移制作高比活性探針；DNA序列分析；填補3′末端Klenow片段具有完整DNA聚合酶I的5

3

聚合、35

外切活性。常用于cDNA第二鏈合成，雙鏈DNA3末端標記等多核苷酸激酶催化多聚核苷酸5′羥基末端磷酸化，或標記探針2001X-146．重組DNA技術中常用到的酶是

A．限制性核酸內切酶B．DNA連接酶C．DNA解鏈酶D．反轉錄酶答案：ABD

重組DNA技術操作的主要步驟載體質粒噬菌體病毒目的基因（外源基因）基因組DNA

cDNA人工合成PCR產物限制酶消化開環(huán)載體DNA目的基因連接酶重組體轉化體外包裝，轉染帶重組體的宿主篩選表型篩選酶切電泳鑒定菌落原位雜交2005X-136.在分子克隆中目的DNA可來自:A.原核細胞基因組DNAB．真核細胞基因組DNAC．PCB合成的DNAD．真核細胞mRNA反轉錄獲得的cDNA答案：ABCD2009X-161、重組DNA技術中，可用于獲取目的基因的方法有：ABA、化學合成法B、PCRC、WesternblottingD、基因敲除答案：AB1.化學合成法已知氨基酸序列推測DNA序列2.基因組DNA文庫限制性核酸內切酶：是識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶。常見的是II型。Ⅱ類酶識別序列特點—回文結構GGATCCCCTAGG2004A-31.能識別DNA特異序列并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶是A.核酸外切酶B.核酸內切酶C.限制性核酸外切酶D.限制性核酸內切酶E.核酸末端轉移酶答案：D2011A-38．下列選項中符合Ⅱ類限制性內切核酸酶特點的是:AA．識別的序列是回文結構

B．沒有特異酶解位點C.同時有連接酶活性D．可切割細菌體內自身DNA答案：A限制性內切酶識別序列不相同，切割DNA后產生相同粘性末端稱為配伍未端。3.

cDNA文庫4.聚合酶鏈反應PCR2012A-38.可以利用逆轉錄酶作為工具酶的作用是DA.質粒的構建B.細胞的轉染C.重組體的篩選D.目的基因的合成重組DNA技術主要步驟載體質粒噬菌體病毒目的基因（外源基因）基因組DNA

cDNA人工合成PCR產物限制酶消化開環(huán)載體DNA目的基因連接酶重組體轉化體外包裝，轉染帶重組體的宿主篩選表型篩選酶切電泳鑒定菌落原位雜交載體：供插入目的基因并導入宿主細胞表達或復制的工具克隆載體：插入外源DNA序列被擴增特意設計的載體，包括質粒、噬菌體、病毒DNA、酵母人工染色體質粒-小型環(huán)狀雙鏈DNA分子克隆載體具備條件：1.自主穩(wěn)定復制2.多克隆位點：識別3.遺傳標記便于篩選-抗生素4.分子量小，拷貝多2003X-136、下列關于質粒載體的敘述，正確的是ABCDA、具有自我復制能力B、有些質粒常攜帶抗藥性基因C、為小分子環(huán)狀DNAD、含有克隆位點答案：ABCD2011A-39作為克隆載體的最基本條件是A、DNA分子量較小B、環(huán)狀雙鏈DNA分子C、有自我復制功能D、有一定遺傳標志答案：C2006A-33．下列DNA中一般不用作克隆載體的是BA．質粒DNAB．大腸桿菌DNAC.病毒DNAD．噬菌體DNAE．酵母人工染色體答案：B2002A-30．在基因工程中將目的基因與載體DNA拼接的酶是

A．DNA聚合酶I

B．DNA聚合酶III

C．限制性內切核酸酶

D．DNA連接酶E.反轉錄酶

答案：D重組體導入受體細胞的方法：轉化：質粒轉入大腸桿菌物理生化不分家轉導：噬菌體導入細胞半導體轉染：重組DNA導入真核細胞病毒（DNA）感染將重組DNA分子導入受體細胞的方法有：BCDA、接合B、轉化C、轉導D、轉染答案：BCD1995X140．從帶有遺傳信息的mRNA構建成DNA重組體，要利用ABCDA．質粒B．限制性核酸內切酶C．DNA連接酶D．反轉錄酶答案：ABCD解析：重組過程為mRNA在反轉錄酶作用下合成與mRNA互補的cDNA(目的DNA)；組裝到質粒中去；借限制性核酸內切酶將質粒切開，利用DNA連接酶將質粒DNA與DNA連接起來。重組體篩選：1.直接選擇法(1)抗藥性標記選擇(2)標志補救：α互補篩選(3)分子雜交法：原位雜交、Southern印跡2.免疫學方法如免疫化學方法及酶免檢測分析等2010X-160．DNA重組技術中，用來篩選重組體的方法有A．標志補救B．分子雜交C．特異性抗體與產物結合

D．紫外分光光度計分析答案：ABC基因診斷與基因治療GeneticDiagnosisandGeneTherapy基因治療：將某種遺傳物質轉移到患者細胞內使其發(fā)揮作用，以達到治療疾病目的的方法。基本方法：（2011、2013年已考）1、基因矯正2、基因置換3、基因增補（主要）4、