Her2-檢測(cè)的概述課件

李麗麗病理應(yīng)用顧問上海羅氏制藥有限公司HER2檢測(cè)概述設(shè)備、試劑技術(shù)支持羅氏診斷醫(yī)學(xué)部銷售部市場(chǎng)部病理科學(xué)術(shù)支持銷售產(chǎn)品市場(chǎng)推廣Roche制藥自我介紹2精選2021版課件一、HER2檢測(cè)的概述

二、HER2檢測(cè)前的最佳實(shí)驗(yàn)——組織處理及固定

三、HER2檢測(cè)中的最佳實(shí)踐——方法及流程

四、HER2檢測(cè)后的最佳實(shí)踐——結(jié)果判讀

五、讀片

六、HER2檢測(cè)的質(zhì)控及質(zhì)保

HER2檢測(cè)系列內(nèi)容3精選2021版課件一、HER2檢測(cè)的概述

二、HER2檢測(cè)前的最佳實(shí)驗(yàn)——組織處理及固定

三、HER2檢測(cè)中的最佳實(shí)踐——方法及流程

四、HER2檢測(cè)后的最佳實(shí)踐——結(jié)果判讀

五、讀片

六、HER2檢測(cè)的質(zhì)控及質(zhì)保HER2檢測(cè)系列內(nèi)容4精選2021版課件內(nèi)容提要什么是HER2及其作用HER2檢測(cè)的意義---乳腺癌&胃癌HER2檢測(cè)的方法相關(guān)指南及檢測(cè)現(xiàn)狀5精選2021版課件

什么是HER2？6精選2021版課件HER2基因人類表皮生長(zhǎng)因子受體-2基因HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2(HER2)Gene定位于染色體17q21編碼跨膜受體樣蛋白（HER2蛋白）,具有酪氨酸激酶活性HER2蛋白分子量185kDa的糖蛋白:細(xì)胞外區(qū)（配體結(jié)合區(qū)）跨膜區(qū)（傳導(dǎo)信號(hào)）細(xì)胞內(nèi)區(qū)（激酶活性）HER2細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞外細(xì)胞膜HER27精選2021版課件

HER2狀態(tài)HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2基因HER2信使RNAHER2蛋白HER2正常表達(dá)細(xì)胞(HER2–)(~2萬個(gè)受體）HER2過表達(dá)的細(xì)胞(HER2+)(100–200萬個(gè)受體）8精選2021版課件HER2陽性的定義蛋白水平(過表達(dá)):細(xì)胞表面HER2蛋白受體表達(dá)大量增加基因水平(擴(kuò)增):

HER2編碼基因于細(xì)胞核內(nèi)拷貝增加IHCFISH9精選2021版課件IHC0IHC3+IHC1+IHC2+10精選2021版課件正常HER2基因于DNA復(fù)制時(shí)若發(fā)生分子轉(zhuǎn)換可能會(huì)轉(zhuǎn)變成癌基因正常細(xì)胞：無基因擴(kuò)增HER2陽性細(xì)胞：基因擴(kuò)增FISHFISH11精選2021版課件HER家族——HER二聚體觸發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)Cellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細(xì)胞運(yùn)動(dòng)抑制凋亡細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖轉(zhuǎn)移化療耐藥腫瘤生長(zhǎng)EGFEGFREGFRTGF

TGF

EGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信號(hào)級(jí)聯(lián)放大核膜IntracellularYardenYandSliwkowskMX.NatRevMolCellBiol2001;2:127–137.12精選2021版課件HER2過表達(dá)的結(jié)果正常HER2表達(dá)HER2基因擴(kuò)增導(dǎo)致HER2過表達(dá)HER2過表達(dá)導(dǎo)致腫瘤增殖促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖------腫瘤發(fā)生抑制細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)血管新生提高細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力,增強(qiáng)腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移作用MoasserMM.Oncogene,2007.26(46):6577FreudenberyJA,WangQ,Katsumata,etal.ExpMolPathol.2009.87(1):113精選2021版課件HER2檢測(cè)的臨床意義14精選2021版課件HER2對(duì)乳腺癌的臨床意義15精選2021版課件腫瘤流行病調(diào)查－中國(guó)Incidence–Thenumberofnewcasesofaspecificdisease(peryear)Mortality–Thenumberofdeathsofaspecificdisease(peryear)16精選2021版課件早期乳腺癌患者*

HER2陰性(n=771) HER2陽性(n=189)HER2過表達(dá)對(duì)早期乳腺癌預(yù)后不利存活率(%)01260961201009080706050402436487284108時(shí)間等級(jí)檢驗(yàn)p=0.0004

Wilcoxon檢驗(yàn)p=0.0009*未經(jīng)選擇的I,II和III期乳腺癌患者時(shí)間(月)PaulettiGetal.JClinOncol.2000;18:3651–3664.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.17精選2021版課件HER2過表達(dá)會(huì)降低乳腺癌轉(zhuǎn)移/復(fù)發(fā)患者的存活率DawoodSetal.JClinOncol201028:92–98.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.0.80.60.40.20.001224364860整體存活率確診后時(shí)間(月) HER2陰性(n=1,782) HER2陽性(n=118)1.018精選2021版課件HER2陽性與含蒽環(huán)類藥物的化療療效相關(guān)FISH:乳腺癌HER2陽性(n=160)FISH:乳腺癌HER2陰性(n=460)CEFCMF整體存活率(%)p=0.681008060402000510p=0.061008060402000510時(shí)間（年）時(shí)間(年)CEF,環(huán)磷酰胺、表阿霉素和氟尿嘧啶;CMF,環(huán)磷酰胺、甲氨蝶呤和氟尿嘧啶CEFCMFPritchardKIetal.NEnglJMed2006;354:2103–2107.整體存活率(%)19精選2021版課件HER2過表達(dá)和（或）擴(kuò)增與紫杉醇臨床獲益有關(guān)乳腺癌HER2-陽性乳腺癌HER2-陰性紫杉醇無紫杉醇

無病存活率1008060402000510

無病存活率1.00.80.60.40.200510時(shí)間(年)時(shí)間(年)紫杉醇無紫杉醇HayesDFetal.ASCOAnnualMeeting2006;Abstract510.HER2/紫杉醇相關(guān)性（p=0.0093）20精選2021版課件曲妥珠單抗有效改善HER2陽性轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者預(yù)后10080604020001224364860確診后時(shí)間(月)存活率(%)DawoodSetal.JClinOncol2010;28:92–98.Reprintedwithpermission.?2008AmericanSocietyofClinicalOncology.Allrightsreserved.HER2陽性狀態(tài)與患者存活率無關(guān)HER2陽性,曲妥珠單抗

(n=191)HER2陰性(n=1782)HER2陽性,無曲妥珠單抗

(n=118)一項(xiàng)回顧性研究數(shù)據(jù)顯示，與HER2陰性乳腺癌相比，HER2陽性乳腺癌患者接受曲妥珠單抗治療后的死亡率下降44%[多變量分析后危險(xiǎn)比（HR）為0.56;95%CI0.45–0.69;p<0.0001]21精選2021版課件HER2狀態(tài)對(duì)乳腺癌的臨床重要性乳腺癌的HER2陽性率約為15–20%對(duì)于乳腺癌患者，HER2狀態(tài)與無病生存期（DFS）及總體存活（OS）密切相關(guān)，是患者預(yù)后的重要預(yù)測(cè)因子HER2狀態(tài)也可預(yù)測(cè)乳腺癌的藥物治療效果，包括對(duì)曲妥珠單抗治療的反應(yīng)對(duì)紫杉醇及蒽環(huán)類藥物治療的反應(yīng)對(duì)三苯氧胺的耐藥性CarlsonRW,etal.JNCCN2006:4(Suppl.3):S1–S22.

HER2狀態(tài)評(píng)估對(duì)于確定患者是否接受抗HER2靶向治療至關(guān)重要22精選2021版課件HER2對(duì)胃癌的臨床意義23精選2021版課件胃癌

世界第二致死癌癥，中國(guó)為高發(fā)區(qū)早期診斷，較困難預(yù)后差，絕大多數(shù)患者直到晚期才出現(xiàn)相應(yīng)癥狀約16%轉(zhuǎn)移性胃癌或胃-食管腫瘤患者為HER2陽性(ToGA實(shí)驗(yàn))24精選2021版課件

HER2對(duì)胃癌患者預(yù)后的影響SongYetal.ChinJCancer2010;29:76–81.中國(guó)研究：晚期胃癌患者的生存率平均生存率(月)p有HER2過表達(dá)5.90.021沒有HER2過表達(dá)12.6平均生存率(月)p有HER2擴(kuò)增5.50.028沒有HER2擴(kuò)增12.6有或沒有HER2過表達(dá)

(n=83)有或沒有HER2擴(kuò)增

(n=83)100806040200061218總體生存率

(%)*時(shí)間(月)100806040200061218總體生存率

(%)*沒有HER2過表達(dá)有

HER2過表達(dá)沒有

HER2擴(kuò)增有HER2擴(kuò)增時(shí)間(月)25精選2021版課件應(yīng)用HER2靶向治療藥物進(jìn)行化療能突破進(jìn)展型胃癌12個(gè)月平均總體存活時(shí)間EOX6XP7ECX6ECF6DCF4EOF6IF5FP4FAMTX2BSC1SP3BSC,最佳支持治療;F,5－氟尿嘧啶;A,阿霉素;MTX,甲氨蝶呤;S,S-1;C/P,順鉑;I,喜樹堿;X,順鉑;

E,表柔比星;O,奧沙利鉑;

D,多西紫杉醇FP/XP+T8FP/XP+T(探索性)81.MuradA.M,etal.Cancer1993;72:37–41;2.VanhoeferU,etal.JClinOncol2000;18:2648–2657;3.AjaniJA,etal.ASCOGastrointestinalCancersSymposium2009;Abstract8;4.VanCutsemE,etal.JClinOncol2006;24:4991–4997;

5.DankM,etal.AnnOncol2008;19:1450–1457;6.CunninghamD,etal.NEJM2008;358:36–46;

7.KangY.K,etal.AnnOncol2009;20:666–673;8.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.061218時(shí)間

(月)FP/XP+T:IHC3+或FISH陽性的患者FP/XP+T(探索性):IHC2+/FISH陽性或IHC3+的患者26精選2021版課件ToGA研究提供的HER2陽性率的數(shù)據(jù)目標(biāo)

人群(IHC2+/FISH+或IHC3+)探索性分析ToGA人群符合

ToGA資格(IHC3+和/或

FISH+)78%22%78%16%不符合

ToGA資格不符合

ToGA資格IHC0/FISH+或IHC1+/FISH+6%27精選2021版課件主要研究終點(diǎn):OS（總生存）IHC3+orFISH+28精選2021版課件主要研究終點(diǎn):OS（總生存）IHC3+orIHC2+/FISH+29精選2021版課件HER2狀態(tài)對(duì)胃癌的臨床意義所有的胃或胃食管結(jié)合部癌患者都應(yīng)在初次診斷時(shí)檢測(cè)腫瘤的HER2狀態(tài)。HER2在胃癌中過表達(dá)預(yù)示更差的疾病結(jié)局以及進(jìn)展性更強(qiáng)的疾病類型準(zhǔn)確的胃癌HER2表達(dá)和基因擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)果是進(jìn)展期胃癌HER2靶向治療患者篩選和療效預(yù)測(cè)的前提2010年，歐洲和美國(guó)先后批準(zhǔn)化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃食管交界癌患者KelleyJRandDugganJM.JClinEpidemiol2003;56:1–9.BangYJ,etal.Lancet2010;376:687–697.BangYJ,etal.JClinOncol2008;26:Abstract4526.GravalosCandJimenoA.AnnOncol2008;19:1523–1529.30精選2021版課件HER2檢測(cè)對(duì)乳腺癌及胃癌患者得到正確診療有很重要的意義HER2檢測(cè)的意義31精選2021版課件HER2常用檢測(cè)方法32精選2021版課件HER2常用檢測(cè)方法免疫組織化學(xué)(IHC):應(yīng)用抗體檢測(cè)蛋白過表達(dá)是乳腺及胃組織檢測(cè)HER2狀態(tài)的首要方式1原位雜交

技術(shù)(ISH):利用核酸探針檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增，可用于復(fù)檢經(jīng)IHC檢測(cè)難以確定結(jié)果的病例及疑難病例11.WolffACetal.JClinOncol2007;25:118–145.IHC：顯示組織細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)狀態(tài)ISH：顯示組織細(xì)胞基因的擴(kuò)增狀態(tài)33精選2021版課件實(shí)驗(yàn)室HER2檢測(cè)方法總結(jié)IHC通過抗體檢測(cè)HER2蛋白表達(dá)FISH通過熒光標(biāo)記的DNA探針檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增SISH通過DNP標(biāo)記之DNA探針并通過后續(xù)顯色反應(yīng)(銀染)來檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增通過地高辛標(biāo)記之DNA探針并通過后續(xù)顯色反應(yīng)(DAB信號(hào))來檢測(cè)HER2基因擴(kuò)增CISH通過DNP標(biāo)記之DNA和染色體著絲粒探針并通過后續(xù)顯色反應(yīng)(HER2銀染及17號(hào)染色體堿性磷酸酶紅染)檢測(cè)HER2DualSISH34精選2021版課件HER2檢測(cè)方法之優(yōu)缺點(diǎn)檢測(cè)方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)IHC大多病理實(shí)驗(yàn)室均采用，相對(duì)較易，較快，較便宜，可自動(dòng)化操作，免疫組化切片保存較久并可反復(fù)檢評(píng)可同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)結(jié)果易受檢測(cè)步驟影響產(chǎn)生偏倚檢測(cè)結(jié)果較主觀，半定量FISH檢測(cè)結(jié)果相對(duì)免疫組化更加定量化穩(wěn)定性好可自動(dòng)化操作檢測(cè)價(jià)格昂貴，信號(hào)強(qiáng)度隨時(shí)間衰減較難鑒定乳腺癌侵微小浸潤(rùn)灶不能同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)病理醫(yī)生及技術(shù)員接受相關(guān)技術(shù)操作及檢測(cè)結(jié)果分析的訓(xùn)練較少CISH與原位雜交相比較少受實(shí)驗(yàn)前分析及處理步驟影響操作較快，普通光鏡觀察即可染色長(zhǎng)期穩(wěn)定可同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)與熒光原位雜交相比技術(shù)較新，操作欠相關(guān)經(jīng)驗(yàn)缺乏經(jīng)驗(yàn)之人員較難分析檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)HER2及CEP17拷貝數(shù)需制備不同切片SISH全自動(dòng)顯色原位雜交(自動(dòng)圖像分析)其他優(yōu)點(diǎn)與顯色原位雜交相同可檢測(cè)HER2過表達(dá)之微小腫瘤灶(胃癌)可觀察HER2異質(zhì)性染色結(jié)果(胃癌）檢測(cè)HER2基因及CEP17拷貝數(shù)需制備不同切片DSISH全自動(dòng)顯色原位雜交(自動(dòng)圖像分析)HER2及CEP17可于亮視野顯微鏡觀察其他優(yōu)點(diǎn)與顯色原位雜交/銀染原位雜交相同缺乏經(jīng)驗(yàn)之人員較難分析檢測(cè)結(jié)果多體性時(shí)較難分析35精選2021版課件國(guó)內(nèi)外相關(guān)指南國(guó)外指南：ASCO/CAP乳腺癌HER2檢測(cè)指南（2007）NCCN乳腺癌臨床實(shí)踐指南（2012）NCCN胃癌臨床實(shí)踐指南（2011）歐洲胃癌HER2檢測(cè)指南（2011）國(guó)內(nèi)指南：乳腺癌HER2檢測(cè)指南（2009版）胃癌HER2檢測(cè)指南(2011)3636精選2021版課件NCCN乳腺癌及胃癌臨床實(shí)踐指南37精選2021版課件乳腺癌HER2檢測(cè)指南（2009版）38精選2021版課件胃癌HER2檢測(cè)指南（2011版）39精選2021版課件BilousMetal.ModPathol2003;16:173─182.WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.AlbarelloL,etal.AdvAnatPathol

2011;18(1):53–5940精選2021版課件我國(guó)HER2檢測(cè)目前仍面臨哪些問題？41精選2021版課件*IHC3+或IHC2+/FISH陽性05101520253035HER2陽性率(%)1234567891011121314151617181920212223242526272829303132333435363738394041424344454647484950515253545556575859606162636465666768697071727374757677787980avmaxmin檢測(cè)中心(匿名)HER2陽性率:15%

范圍:9%–35%英國(guó)各檢測(cè)中心的HER2檢測(cè)陽性率*不盡相同MillerK,UKNEQAS(私人交流).42精選2021版課件中國(guó)各檢測(cè)中心乳腺癌

HER2IHC檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)來源于中國(guó)抗