種子擴大培養(yǎng) 實驗室階段

4.2種子擴大培養(yǎng)過程——實驗室階段4種子擴大培養(yǎng)種子擴大培養(yǎng)的一般工藝流程見圖1-2-5，其過程大致可分為實驗室制備階段和生產(chǎn)車間種子制備階段。步驟1～6為實驗室制備階段，包括瓊脂斜面、固體培養(yǎng)基擴大培養(yǎng)或搖瓶液體培養(yǎng)；步驟7～9為生產(chǎn)車間種子制備階段，其主要的任務是種子罐擴大培養(yǎng)。種子擴大培養(yǎng)過程——實驗室階段4.2.1種子的制備工藝實驗室種子的制備一般采用兩種方式：4.2.2實驗室種子制備對于產(chǎn)孢子能力強的及孢子發(fā)芽、生長繁殖快的菌種可以采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)孢子，孢子可直接作為種子罐的種子，這樣操作簡便，不易污染雜菌。對于產(chǎn)孢子能力不強或孢子發(fā)芽慢的菌種，可以用液體培養(yǎng)法。種子擴大培養(yǎng)過程——實驗室階段123孢子的制備1、細菌孢子的制備2、霉菌孢子的制備3、放線菌孢子的制備細菌的斜面培養(yǎng)基多采用碳源限量而氮源豐富的配方。培養(yǎng)溫度一般為37℃。細菌菌體培養(yǎng)時間一般為1~2天，產(chǎn)芽孢的細菌培養(yǎng)則需要5~10天。霉菌孢子的培養(yǎng)一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。培養(yǎng)的溫度一般為25~28℃。培養(yǎng)時間一般為4~14天。放線菌的孢子培養(yǎng)一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。培養(yǎng)溫度一般為28℃。培養(yǎng)時間為5~14天。種子擴大培養(yǎng)過程——實驗室階段對于產(chǎn)孢子能力不強或孢子發(fā)芽慢的菌種，如產(chǎn)鏈霉素的灰色鏈霉菌（S.griseus）、產(chǎn)卡那霉素的卡那鏈霉菌（S.Kanamuceticus）可以用搖瓶液體培養(yǎng)法。將孢子接入含液體培養(yǎng)基的搖瓶中，于搖瓶機上恒溫振蕩培養(yǎng)，獲得菌絲體，作為種子。其過程如下：

液體種子制備1、好氧培養(yǎng)試管→三角瓶→搖床→種子罐種子擴大培養(yǎng)過程——實驗室階段例如：生產(chǎn)啤酒的酵母菌一般保存在麥芽汁瓊脂或MYPG培養(yǎng)基（培養(yǎng)基配制：3克麥芽浸出物，3克酵母浸出物，5克蛋白胨，10克葡萄糖和20克瓊脂與升水中）的斜面上，于4℃冰箱內(nèi)保藏。每年移種3-4次。將保存的酵母菌種接入含10ml麥芽汁的500-1000ml三角瓶中，再于25℃培養(yǎng)2-3天后，再擴大至含有250-500ml麥芽汁的500-1000ml三角瓶中，再于25℃培養(yǎng)2天后，移種至含有5-10L麥芽汁的卡氏培養(yǎng)罐中，于15-20℃培養(yǎng)3-5天即可作100L麥芽汁的發(fā)酵罐種子。從三角瓶到卡氏培養(yǎng)罐培養(yǎng)期間，均需定時搖動或通氣，使酵母菌液與空氣接觸，以有利與酵母菌的增殖。2、