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檢測(cè)報(bào)告檢測(cè)項(xiàng)目:抗生素抑菌實(shí)驗(yàn)送檢日期:2012-09-10送檢單位:檢驗(yàn)員:周俊1實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料指示菌、TSB肉湯、麥?zhǔn)媳葷峁?、LB平板培養(yǎng)基、MRS肉湯、L型波棒、牛津杯、滅菌陶瓷蓋、滅菌試管、微量移液器、密封發(fā)酵管、磷酸緩沖液等。2.1實(shí)驗(yàn)方法2.1.1指示菌使用大腸桿菌O157,O139,K88,K99型、金色葡萄球菌與沙門氏菌。2.1.2指示菌菌懸液的準(zhǔn)備(1)細(xì)菌復(fù)蘇:菌種平板劃線,36℃培養(yǎng)20h;挑取單菌落于TSB肉湯,置37℃振蕩培養(yǎng)16h;接種TSB肉湯,置37℃振蕩培養(yǎng)16h。(2)采用直接菌落懸液法,將培養(yǎng)好的菌液調(diào)整到5個(gè)麥?zhǔn)蠞舛?也就是細(xì)菌數(shù)為1×108cfu/ml)。此時(shí)指示菌菌懸液制備完畢。(注:在調(diào)整過程中需使用PH7.2的磷酸緩沖液進(jìn)行菌液的麥?zhǔn)蠞舛日{(diào)整)2.1.5LB檢測(cè)平板的制備的準(zhǔn)備將LB肉湯培養(yǎng)基加入瓊脂后,溶解均勻,在高壓滅菌釜中。121℃,高溫滅菌20min。將已滅菌的瓊脂培養(yǎng)基倒在玻璃培養(yǎng)皿內(nèi),每皿15ml(下層),待其凝固。再繼續(xù)將滅好的LB瓊脂培養(yǎng)基再次加固在已凝固的培養(yǎng)基上待凝固(上層)。使LB平板增厚。凝固后并使培養(yǎng)皿中水份干燥透,取100μl的指示菌菌懸液在平板上用L型波棒均勻涂布,涂布后以平板無可見水滴為準(zhǔn),此時(shí)的平板立刻進(jìn)行抑菌試驗(yàn)。2.1.6樣品原粉在培養(yǎng)基上的放置精確秤取樣品0.05克輕輕放入培養(yǎng)皿中,在水平放置的平皿中均勻地放置。2.1.7樣品抑菌擴(kuò)散及指示菌的培養(yǎng)將加入樣品原粉的平皿放置37℃的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)16h~24h后,進(jìn)行拍照記錄。結(jié)果:圖中黃褐色褐色粉末為15%桿菌肽鋅。O157O139K88K99金葡沙門抑菌圈大小如下表:(單位mm)O157O139K88K99金葡沙門15%桿菌肽鋅222324212823根據(jù)標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)抑菌圈大于15mm時(shí),該藥對(duì)細(xì)菌敏感。結(jié)論:結(jié)果表明,該桿菌肽鋅抑菌圈均大于15mm,對(duì)O157、O139、K88、K9
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